3. Производные 1,5-бензотиазепина

Т аблица 7. Сравнительная характеристика методов количественного анализа производных 1,5-бензотиазепина по 3-м фармакопеям

По фармакопеи США количественное определение субстанции, таблеток, капсул на содержание дилтиазема проводят методом ВЭЖХ. При анализе субстанции в качестве подвижной фазы готовят смесь буфера (Буфер: растворяют 1.16 г сульфокамфорнай кислоты в 1000 мл 0.1 м ацетата натрия и добовляют 0.1 М гидроксида натрия до pH 6.2.), ацетонитрила, и метанола (50:25:25), фильтруют, и дегазируют. Неподвижная фаза - силикагель. Детектируют спектрофотометрически при 240 нм. При анализе таблеток и капсул падвижная фаза - готовят фильтрованную и дегазированную смесь Буфера (Буфер - Растворяют 6.9 г моноосновного фосфата калия в 1000 мл воды, добавляют 0.1 М соляной кислоты до pH 3.0) и добавляют 0.50 мл триэтиламина и ацетонитрил (50:50). Неподвижная фаза - силикагель. Детектируют спектрофотометрически при 240 нм [13]. По Британской фармакопее таблетки и инъекции лоразепама определяют методом неводного титрования. В качестве растворителя используют смесь 2 мл безводной муравьиной кислоты и 60 мл уксусного ангидрида, титранта – 0.1М хлорная кислота. Определяют конечную точку потенциометрически [14].

4. Производные триазолобензодиазепина

Т аблица 8. Сравнительная характеристика методов количественного анализа производных триазолобензодиазепина по 3-м фармакопеям

Фармакопея США для количественного определения субстанции и таблеток алпразолама рекомендует метод ВЭЖХ со стандартным образцом в подвижной фазе. Подвижная фаза - готовят фильтрованную и дегазированную смесь ацетонитрила, хлороформа, бутилового спирта, воды, и ледяной уксусной кислоты (850:80:50:20:0.5). Неподвижная фаза - силикагель. Детектируют спектрофотометрически при 254 нм [13]. По Британской фармакопее количественное определение субстанции алпразолама проводят методом неводного титрования. Растворитель – смесь 3 объемов безводной уксусной кислоты и 2 объемов уксусного ангидрида. Титруют 0.1 М хлорной кислотой, определяя конечную точку потенциометрически [14].

5. Выводы

На основании данных, полученных в результате изучения трех фармакопей (а также Европейской и Украинской фармакопеи) [19]., можно сделать вывод, что базовыми методами количественного определение субстанций и готовых лекарственных средств на основе производных диазепина и азепина является высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ), с использованием стандартных образцов, и титрование в неводной среде. Очень редко используется УФ-спектрофотометрия, в основном Британской фармакопеей. Причем в фармакопее страны с развитой фармацевтической промышленностью – США - превалирует метод ВЭЖХ. Данный метод по своим характеристикам соответствует требованиям количественного анализа около 80-90% препаратов. Важным достоинством метода ВЭЖХ является его высокая точность, а также возможность определить небольшие количества веществ. Являясь универсальным методом, он позволяет оптимизировать процесс контроля качества и использовать его при анализе на примеси, установления подлинности и количественного определения одновременно, оценивая пики хроматограммы. Но ВЭЖХ с использованием соответствующих стандартных образцов требует больших затрат времени на проведение калибровки и анализа. При этом производительность контроля качества очень низка, а стоимость высока в связи с затратами времени на проведение анализа конкретного препарата, и необходимостью использования условий анализа (колонка, элюент и т.п.), специфичных для каждого препарата (наряду с пробоподготовкой).

Произошедшие за последние 10 лет изменения в фармацевтической отрасли Беларуси, направленные на модернизацию производств, интенсифицировали внедрение ВЭЖХ в контроль качества технологического процесса. Организации-разработчики также начали более активно включать ВЭЖХ метод в соответствующие разделы фармакопейных статей и технологических регламентов. Стали появляться хроматографы в региональных органах контроля качества лекарственных средств. Вместе с тем, при общей положительной направленности, процесс в значительной мере сдерживается отсутствием общей упорядоченности.

В первую очередь следует отметить отсутствие соответствующей современным требованиям общей фармакопейной статьи на метод. Скупое изложение основ хроматографии в XI-й Государственной Фармакопее не может методически обеспечить становление в Беларуси высокотехнологичного фармацевтического производства и в равной степени тормозит формирование современных аналитических подразделений государственной службы контроля качества лекарственных средств.

Нужно отметить нецелесообразность прямого заимствования в рамках внедрения в Беларуси GMP и GLP зарубежного опыта в решении этой проблемы [17, 18]. Это связано, в первую очередь, с необходимостью больших материальных затрат, как на приобретение оборудования (преимущественно зарубежного), так и на подготовку специалистов. В стране отсутствует единая система подготовки специалистов по ВЭЖХ применительно к фармацевтическому анализу, что привело к появлению в многочисленных ФСП на регистрируемые вновь или перерегистрируемые лекарственные средства, разнообразных методик хроматографического определения отдельных соединений. Данные методики в значительной мере отражают специфику лабораторно-методической базы организации-разработчика, и. учитывая сложность метода, не всегда воспроизводимы контрольно-аналитическими лабораториями на местах. Не оптимально подобранные аналитические условия определения многих соединений часто не позволяют получать удовлетворительные результаты при замене сорбента в колонке на его аналог, при отклонениях в составе экстрагента и элгоента, условий экстракции и элюирования (давление, температура, режим элюирования и т.д.) смене режима детектирования.

Немаловажное значение для точного определения низких концентраций действующих веществ, что характерно для целого ряда современных лекарственных препаратов, либо выявления примесей, особенно на фоне нескольких сопутствующих компонентов с близкими физико-химическими свойствами, имеет точное воспроизведение иногда не описанных в ФСП особенностей методики. Большое значение в этой ситуации имеет и используемый метод обработки сигнала детектора, применяемые алгоритмы математического анализа хромато грамм.

Безусловно, большинство задач фармацевтического ВЭЖХ анализа с успехом решается при наличии прибора, предназначенного для универсальных аналитических лабораторий и рассчитанного на определение низких концентраций разнообразных по свое природе веществ. Средняя рыночная стоимость такого прибора составляет 60-100 тысяч долларов США, а годовое обслуживание расходными материалами обходится в сумму порядка 5000 долларов. Очевидно, только немногие организации могут позволить себе подобное оснащение, особенно с учетом необходимости постоянной работы в отделах контроля качества фармацевтических предприятий или региональных контрольно-аналитических лабораториях сразу нескольких приборов, в силу большой продолжительности традиционно используемых процедур анализа.

Нивелирующе-дифференцирующее действие растворителей в отно­шении тех или иных электролитов играет огромную роль в анали­тической химии и представляет практически неисчерпаемую воз­можность использования этого явления в практике заводских и научно-исследовательских лабораторий. Наиболее широкое прак­тическое применение в количественном определении производных диазепина и азепина приобрели методы неводного титрования, описанные всеми рассмотренными фармакопеями. Особое значение титриметрических методов неводных растворов состоит в том, что они позволяют определять многие тысячи инди­видуальных веществ и анализировать их смеси, что практически невозможно осуществить в водных средах вследствие плохой их растворимости в воде, сильного гидролизующего действия воды, нечетких конечных точек титрования и т. п. Практически все производные диазепина и азепина (темазепам, оксазепам, диазепам, темазепам, лоразепам, лордиазепоксид, и др.) относятся к числу таких веществ, которые очень плохо растворимы в воде. Все это говорит о значительных преимуществах методов дифференцированного титрования неводных растворов по сравнению с титрованием их водных растворов.