4. Методы количественного определения

1. Производные дибензоазепина

Т аблица 5. Сравнительная характеристика методов количественного анализа производных дибензоазепина по 3-м фармакопеям

Фармакопея США для количественного определения субстанции и таблеток карбамазепина рекомендует также метод ВЭЖХ со стандартным образцом в подвижной фазе. Падвижная фаза - готовят смесь воды, метанола, и тетра-гидрофурана (85:12:3), добавляют 0.2 мл муравьиной кислоты и 0.5 мл триэтиламина. Фильтруют и дегазируют. Неподвижная фаза - силикагель. Детектируют спектрофотометрически при 230 нм [13]. По Британской фармакопее субстанцию и таблетки карбамазепина определяют методом ВЭЖХ. Подвижная фаза - 30 объемов тетрагидрофурана, 120 объемов метанола и 850 объемов воды, добавляя 0.2 мл безводной муравьиной кислоты и 0.5 мл триэтиламина. Неподвижная фаза – силикагель нитриловый. Детектируют спектрофотометрически при 230 нм [14].

Международная фармакопея предлагает проводить количественное определение спектрофотометрически. Измеряют поглощение слоя в 1 см полученного раствора при 285 нм. Рассчитывают количество карбамазепина в испытуемом веществе путем сравнения со стандартным образцом карбамазепина [15].

2. Производные бензодиазепина

Т аблица 6. Сравнительная характеристика методов количественного анализа производных бензодиазепина по 3-м фармакопеям.

По фармакопее США субстанцию и капсулы на количественное содержание диазепама исследуют с применением ВЭЖХ. Подвижная фаза - готовят фильтрованную и дегазированную смесь ацетонитрила, воды, и метанола (2:2:1). Неподвижная фаза – силикагель. Детектируют спектрофотометрически при 254 нм. Таблетки и инъекции диазепама по фармакопее США исследуют также используя ВЭЖХ. Подвижная фаза - готовят фильтрованную и дегазированную смесь ­метанола и воды (65:35). Неподвижная фаза – силикагель. Детектируют спектрофотометрически при 254 нм [13]. Количественное определение субстанции диазепама по Британской фармакопее выполняют методом титрования в неводной среде. В качестве растворителя используют уксусный ангидрид, титранта – 0,1М хлорную кислоту, индикатора – нильский синий. Титруют до желтовато-зеленого цвета. Инъекции и таблетки диазепама определяют спектрофотометрически. Для инъекций используют в качестве растворителя фосфатный буфер, хлороформ, серная кислота в метаноле. Максимум поглощения при 368 нм. Для таблеток растворитель - серная кислота в метаноле. Максимум поглощения при 284 нм [14]. Международная фармакопея рекомендует определять субстанцию диазепама с помощью титрования в неводной среде. В качестве растворителя предлагает использовать ледяную уксусную кислоту, титранта – 0,1М хлорную кислоту, определять конечную точку потенциометрически [15].

По фармакопее США субстанцию оксазепама определяют методом неводного титрования. В качестве растворителя используют диметилформамид, титранта – 0.1 М тетрабутиламмония гидроксид. Определяют конечную точку потенциометрически, используя ртутный электрод и принимая меры предосторожности от поглощения атмосферного углекислого газа. Количественное содержание окзазепама в капсулах по фармакопее США определяют методом УФ-спектрофотометрии в максимуме поглощения 229 нм, используя в качестве растворителя этанол. Таблетки оксазепама исследуют по 2-м методикам:

1. УФ-спектрофотометрии в максимуме поглощения 229 нм, используя в качестве растворителя этанол.

2. Титрование в неводной среде. Растворитель - смесь безводной муравьиной кислоты и уксусного ангидрида, титрант 0.1 М хлорная кислота. Конечную точку определяют патенциометрически [13].

Количественное определение субстанции оксазепама по Британской фармакопее выполняют методом титрования в неводной среде. В качестве растворителя используют смесь безводной уксусной кислоты и уксусного ангидрида, титранта – 0,1М хлорную кислоту. Определяют конечную точку потенциометрически. Количественное содержание оксазепама в таблетках определяют спектрофотометрически. Растворитель этанол. Максимум поглощения при 230 нм [14].

Коллектив института неорганической химии и электрохимии им. Р. И. Агладзе АН Грузии, Тбилиси, провел исследования в отношении использования полярографического метода для количественного определения оксазепама. Полярографические измерения проводились на полярографе ОН-105 ("Radelkic" ВНР). В качестве рабочего электрода применяли ртутный капельный электрод с принудительным отрывом капли, электродом сравнения служил насыщенный каломельный электрод, а вспомогательным электродом — платиновая проволока. Исследования проводили в кислой среде (смесь кислого буфера рН = 3,8 с хлоридом лития в соотношении 1:9). В 0,1 М растворе йодида тетрабутиламмония на полярограммах наблюдаются два пика с Е' = -2,25 Ви Е" = -2,46 В. Калибровочный график построен на основании статистически обработанной зависимости предельного тока от концентрации. На основании результатов измерения дифференциальной емкости двойного слоя установлена высокая адсорбируемость нозепама на ртути. В результате было установлено, что полярографичесский метод обладает высокой чувствительностью, точностью, наличием надежной, недорогой серийной аппаратуры и может с успехом применяться в анилизе производных бензодиазепина [15].

По фармакопее США количественное определение субстанции, таблеток, капсул, инъекций на содержание хлордиазепоксида проводят с помощью ВЭЖХ. Падвижная фаза - готовят фильтрованную и дегазированную смесь ­метанола и воды (60:40). Неподвижная фаза- силикагель. Детектируют спектрофотометрически при 254 нм. По Британской фармакопеи количественное определение субстанции хлордиазепоксида выполняют методом титрования в неводной среде. В качестве растворителя используют безводную уксусную кислоту, титранта – 0,1М хлорную кислоту. Определяют конечную точку потенциометрически. Таблетки и капсулы определяют спектрофотометрически. Растворитель соляная кислота. Максимум поглощения при 308 нм.

Количественное определение субстанции нитрозепама по Британской фармакопеи выполняют методом титрования в неводной среде. В качестве растворителя используют смесь лединой уксусной кислоты и уксусного ангидрида, титранта – 0,1М хлорную кислоту. Определяют конечную точку потенциометрически. Количественное содержание нитрозепама в таблетках определяют спектрофотометрически. Растворитель соляная кислота в метаноле. Максимум поглощения при 280 нм [14]. Международная фармакопея рекомендует проводить исследование субстанции нитрозепама методом неводного титрования. В качестве растворителя предлагает использовать уксусный ангидрид, титранта – 0,1М хлорную кислоту, определять конечную точку потенциометрически [15].

По фармакопее США субстанцию лоразепама определяют методом титрования в неводной среде. В качестве растворителя используют диметилформамид, титранта – 0.1 М тетрабутиламмония гидроксид. Определяют конечную точку потенциометрически, используя ртутный электрод и принимая меры предосторожности от поглощения атмосферного углекислого газа. Таблетки и инъекции – методом ВЭЖХ. В первом случае подвижная фаза – готовят смесь метанола и ­моноосновной фосфат аммония на 0.05 м. ­(50:50). Доводят гидроксидом аммония до pH 6.5, фильтруют и дегазируют. Неподвижная фаза – силикагель. Детектируют спектрофотометрически при 240 нм. Во втором - подвижная фаза - готовят фильтрованную и дегазированную смесь воды, ацетонитрила, и ледяной уксусной кислоты (55:45:2). Неподвижная фаза – силикагель. Детектируют спектрофотометрически при 254 нм [13]. По Британской фармакопее субстанцию лоразепама определяют методом неводного титрования. В качестве растворителя используют диметилформамид, титранта – 0.1 М тетрабутиламмония гидроксид. Определяют конечную точку потенциометрически, используя ртутный электрод и принимая меры предосторожности от поглощения атмосферного углекислого газа. Инъекции лоразепама используя ВЭЖХ. Подвижная фаза - готовит фильтрованную и дегазированную смесь Буферного раствора (Буфер: растворяют 5.444 г моноосновного ­фосфата калия ­в 2000 мл воды. Доводят фосфорной кислотой до pH 3.0) и ацетонитрила (53:47). Неподвижная фаза – силикагель. Детектируют спектрофотометрически при 254 нм. Количественное содержание лоразепама в таблетках определяют спектрофотометрически. Растворитель этанол. Максимум поглощения при 230 нм [14].

По Фармакопеи США субстанцию и капсулы на количественное содержание темазепама исследуют с применением ВЭЖХ. Подвижная фаза - готовят фильтрованную и дегазированную смесь ацетонитрила, воды, и метанола (2:2:1). Неподвижная фаза – силикагель. Детектируют спектрофотометрически при 254 нм [13].