40. Как изучают протеолитические св-ва бактерий.

Д-е протеолитических ферментов изучают на средах с желатином, молоком, сывороткой, пептоном. При разложении желатина среда становится жидкой. При разложении казеина (молочного белка) появляется просветление молока и оно приобретает вид молочной сыворотки.

В процессе ферментации пептонов образуются индол, сероводород, аммиак, кот-е сдвигают pH в щелочную сторону. Посев проводят на МПБ. Для обнаружения сероводорода в среду помещают фильтровальную бумагу с р-ром ацетата свинца – бумага чернеет. Для выявления индола используют бумагу с р-ром щавелевой к-ты – бумага краснеет. Аммиак – лакмусовая бумага синеет.

41. Как изучают сахаролитические св-ва бактерий.

Эту способность оценивают по изменению окраски среды вследствие образования органических кислот. Используют среды Гисса: пептонная вода, углевод, многоатомные спирты и индикатор. При разложении углевода образуется к-та и индикатор меняет цвет с желтого на красный. Бактерии по-разному ферментируют углеводы, поэтому ряды пробирок приобретают пёстрый вид – набор сред называется «пёстрый ряд».

Газообразование – определяют способность микробов ферментировать углеводы с образованием кислоты и газа. В сосуды со средами вносят стеклянные поплавки, запаянные с одного конца, кот-е всплывают после наполнения их газом.

При разложении молочного сахара (среда Эндо) – цвет колонии меняется соответственно индикатору (красного цвета).

42. Методы культивирования анаэробов.

Облигатными анаэробами называются микроорганизмы, не растущие на поверхности аэрируемой питательной среды. Питательные среды: экстракты и белковые гидролизаты + факторы роста + цельная или лизированная кровь. Для выделения анаэробов из смеси культур к питательным основам добавляют желчь, антибиотики, бриллиантовую зелень. Используют среды Кита-Тароцци, Вильсона-Блэра. Посевы в жидких средах заливают вазелиновым маслом. В плотных средах либо заливают тонким слоем агара, либо используют анаэростат (откуда откачивают воздух).

Создают анаэробные условия с помощью следующих методов:

1. физические – кипячение и быстрое охлаждение, высокие пробирки (в глубине происходит рост), вакуумное удаление воздуха с последующей заменой его инертным газом;

2. химические – применение щелочных р-ров, натрия гидросульфита, различных других веществ-редуцентов для связывания остатков О₂;

3. биологические – совместное выращивание анаэробов и аэробов; помещение в питательную среду кусочков печени, мозга, кот-е адсорбируют на себе О₂.

43. Определение подвижности бактерий по Пешкову.

Определение подвижности по Пешкову - при помощи внесения бактерий уколом в столбик полужидкого агара – подвижные растут по всей толще среды, неподвижные – по уколу.

44. Как у бактерий определяют способность выделять индол?

В процессе ферментации пептонов образуются индол, сероводород, аммиак, кот-е сдвигают pH в щелочную сторону. Посев проводят на МПБ. Для выявления индола используют бумагу с

р-ром щавелевой к-ты – бумага краснеет.

45. Как у бактерий определяют способность выделять сероводород?

В процессе ферментации пептонов образуются индол, сероводород, аммиак, кот-е сдвигают pH в щелочную сторону. Посев проводят на МПБ. Для обнаружения сероводорода в среду помещают фильтровальную бумагу с р-ром ацетата свинца – бумага чернеет.

46. Состав среды Эндо, как на ней растут кишечные бактерии?

Содержит агар, лактозу, основной фуксин, Na₂SO₃. Селективно-дифференцировочная среда для кишечной палочки. На среде Эндо лактоза-положительные эшерихии образуют фуксиново-красные колонии с металлическим блеском, лактоза-отрицательные – бледно-розовые или бесцветные с темным центром.

47. Как изучают развёрнутые биохимические св-ва бактерий?

Д-е протеолитических ферментов изучают на средах с желатином, молоком, сывороткой, пептоном. При разложении желатина среда становится жидкой. При разложении казеина (молочного белка) появляется просветление молока и оно приобретает вид молочной сыворотки.

В процессе ферментации пептонов образуются индол, сероводород, аммиак, кот-е сдвигают pH в щелочную сторону. Посев проводят на МПБ. Для обнаружения сероводорода в среду помещают фильтровальную бумагу с р-ром ацетата свинца – бумага чернеет. Для выявления индола используют бумагу с р-ром щавелевой к-ты – бумага краснеет. Аммиак – лакмусовая бумага синеет.

Д-е сахаролитических ферментов: эту способность оценивают по изменению окраски среды вследствие образования органических кислот. Используют среды Гисса: пептонная вода, углевод, многоатомные спирты и индикатор. При разложении углевода образуется к-та и индикатор меняет цвет с желтого на красный. Бактерии по-разному ферментируют углеводы, поэтому ряды пробирок приобретают пёстрый вид – набор сред называется «пёстрый ряд».

Газообразование – определяют способность микробов ферментировать углеводы с образованием кислоты и газа. В сосуды со средами вносят стеклянные поплавки, запаянные с одного конца, кот-е всплывают после наполнения их газом.

При разложении молочного сахара (среда Эндо) – цвет колонии меняется соответственно индикатору (красного цвета).

Определение ферментов микробов:

1. плазмокоагулаза – определяют скорость свёртывания микробом плазмы крови;

2. гемотоксин – вызывает лизис эритроцитов на кровяном агаре, вокруг колонии видна зона просветления среды;

3. лецитиназа – разрушает белок яичного желтка, вокруг колоний зона помутнения с радужным венчиком;

4. гиалуронидаза – расщепляет гиалуроновую к-ту в составе соединительной ткани. Утрачивается способность гиалуроновой к-ты образовывать сгусток;

5. фибринолизин – растворяет фибрин плазмы.