44. Как бактериофаг может изменить генетические св-ва бактерии?

Бактериофаги – вирусы, паразитирующие в клетках бактерий. Морфология: ДНК-содержащий геном, нуклеокапсид организован по типу смешанной симметрии.

Различают бактериофаги: вегетативные, вирулентные, дефектные, зрелые, умеренные.

Ассоциация фаговой ДНК с геномом бактерии способна качественно изменять св-ва бактерии. Присутствие фаговой ДНК может также изменять морфологию или антигенные св-ва – это лизогенная конверсия.

Св-ва меняются не только у бактерии, но и у фага. Размножаясь в клетке, он способен захватывать некоторые гены бактерии и, инфицируя другую клетку, передаёт приобретённые гены новому хозяину. Это называется трансдукцией. В этом участвуют умеренные и дефектные фаги. Используются как векторы в генной инженерии.

45. Первично-трипсинизированные культуры и перевиваемые культуры клеток.

Применяются для выделения вирусов.

Первично-трипсинизированные культуры – сущность: разрушение межклеточных связей в тканях протеолитическими ферментами и разобщение клеток для выращивания монослоя на стекле. Источник получения: ткани и органы эмбрионов человека и животных, а также извлечённые у человека при операции. Используют нормальные и злокачественно перерождённые ткани. Способность клеток размножаться тесно связана со степенью дифференцировки ткани: чем ниже дифференцировка, тем лучше клетки размножаются in vitro. Поэтому ткани эмбриона и опухоли лучше использовать.

Культуры перевиваемых клеток – культуры клеток, способных к размножению неопределённо долгое время. Ткани берут чаще опухолевые.

46. Как РНК-содержащие вирусы интегрируют в хромосомы клеток?

Процесс включения РНК вируса в хромосому клетки начинается с синтеза ДНК-копии генома вируса при участии вирионного фермента полимеразы. Происходит наращивание 2-й спирали, после чего концы обеих нитей соединяются друг с другом, замыкая молекулу ДНК в кольцо. Образовавшаяся вирусная ДНК встраивается в клеточную ДНК при участии 2-х вирионных ферментов: эндонуклеазы (разрезает нити ДНК) и полинуклеотидлигазы (сшивает нити ДНК). При этом транскрипция интегрированного в хромосому генома вируса может вызвать злокачественную трансформацию ткани.

47. Как онкогенные вирусы вызывают злокачественную трансформацию клеток? Протоонкоген и онкоген.

Смотри 46.

Мутация гена в одной из 2-х клеточных копий называется онкоген, а его нормальный аллель – протоонкоген. Мутации протоонкогена в онкоген или его чрезмерная активация могут дать начало опухолевому росту.

48. Мех-м РТГА.

Определяют видовую принадлежность вирусов. Основана на способности антисыворотки подавлять вирусную гемагглютинацию, так как нейтрализованный вирус не агглютинирует эритроциты.

49. Мех-м формирования вириона гриппа в клетке.

-РНК-вирусы гриппа проникают в клетку путём виропексиса. Для эффективной репродукции вируса -РНК должна преобразоваться в +РНК – аналог клеточной м-РНК. Мех-м: проникновение вируса в клетку происходит после его адсорбции и слияния с клеточной оболочкой. После высвобождения вирусной -РНК синтезируется +РНК под д-ем вирионной полимеразы. Образуются полные и короткие нити. Короткие +РНК-нити участвуют в синтезе белков и ферментов для дочерних популяций. Белок М и гликопротеины оболочки встраиваются в клеточную стенку перед отпочкованием. Полная цепь +РНК служит матрицей для синтеза молекул -РНК дочерних популяций.

Вирионы дочерних популяций собираются на участке клеточной мембраны, изменённым белком М, и высвобождаются почкованием. При этом захватывают фрагмент клеточной мембраны, кот-й служит в дальнейшем суперкапсидом.