6. Методы культивирования вирусов. Методы их типирования.

Вирусы размножаются только в живых клетках. Культивирование вируса происходит на уровне орг-ма подопытного животного и на уровне культуры клеток (то есть вне орг-ма). Вирусы имеют тканевую и типовую специфичность. Поэтому при выделении неизвестного вируса одномоментно заражают 3-4 культуры клеток. Чаще используют эмбриональные ткани (куриный эмбрион). Вирусы оспы хорошо размножаются в хорион-аллантоисной оболочке, вирус паротита – в амнионе, вирус гриппа – в амнионе и аллантоисе, вирус бешенства – в желточном мешке. Берут 12-дневные эмбрионы.

При невозможности выделить и идентифицировать вирус стандартными методами (на культуре клеток и куриных эмбрионах) инфекционный материал вводят лабораторным животным (мыши, кролики, обезьяны), после развития инфекционного процесса проводят повторное заражение чувствительных клеточных культур.

Методы типирования вирусов:

1. микроскопические – вирусоскопия, обнаружение внутриклеточных включений;

2. иммуновирусологические – метод иммунной электронной микроскопии, метод иммунофлюоресценции, метод гемагглютинации, метод гемадсорбции.

Идентификация вирусов – иммуновирусологические методы, включают следующие реакции – торможение гемагглютинации, задержки гемадсорбции, связывания комплемента, нейтрализации, преципитации в геле агара.

7. Аденовирусы, аденовирусная инфекция.

Аденовирусы впервые выделены в 1953 г из тканей миндалин и аденоидов у детей, в связи с чем и получили название. Содержат 2 нити ДНК, не имеют суперкапсида. Имеют 80 антигенных типов. Вирионы диаметром ~ 70-90 нм. Капсиды состоят из 252 капсомеров. Не чувствительны к д-ю эфира. Нуклеокапсид организован по типу кубической симметрии.

Клиника: инкубационный период 6-9 суток. Лихорадка, симптомы поражения дыхательных путей (ринит, тонзиллит, фарингит, пневмония), глаз (конъюнктивит), жкт (диарея).

8. Вирусы – возбудители орз?

Самые распространённые инфекционные болезни человека. Широкому распространению способствуют: воздушно-капельный путь заражения, большое разнообразие возбудителей, отсутствие стойкого иммунитета. Различают:

1. Вирусы гриппа (ортомиксовирусы) – А, В, С. Наиболее опасен вирус гриппа А. Клиника: t°, насморк, кашель, головные и мышечные боли.

2. Вирусы парагриппа (парамиксовирусы) – выделены 5 типов, поражает верхние отделы дыхательных путей.

3. Вирусы эпидемического паротита (парамиксовирус) – поражает околоушные слюнные железы.

4. Вирус кори (парамиксовирус) – интоксикация, сыпь, поражение дыхательных путей.

5. Респираторно-синцитиальный вирус (парамиксовирус) – поражает дыхательные пути у новорождённых.

6. Респираторные коронавирусы – поражают дыхательные пути и жкт.

7. Аденовирусы – клиника, как у гриппа.

8. Вирус краснухи (тогавирусы) – лихорадка, сыпь, увеличение лимфоузлов, поражение плода у беременных (уродства).

9. Риновирусы – клиника гриппа.

9. По каким признакам судят о размножении вирусов в культуре клеток?

Индикатором наличия вирусов в заражённой культуре клеток служат:

1. Развитие специфической дегенерации клеток – смотрят под микроскопом: образование многоядерных гигантских клеток, округление клеток, очаги клеточной пролиферации.

2. Обнаружение внутриклеточных включений – в цитоплазме или ядре (окрашивают и смотрят под микроскопом).

3. Обнаружение специфического Аг методом иммунофлюоресценции.

4. Положительная реакция гемадсорбции.

5. Положительная реакция гемагглютинации.

6. Образование бляшек – появляются обесцвеченные участки в культуре, состоящие из погибших клеток – это колонии вируса. Окрашивают красным красителем – бляшки круглые, светлые.