1. Выполните тестовые задания

1. Какие культуры используют большинство микробиологических производств ?Е. Аэробные 2. Какой аппарат является основным из всех подготовленных отделений?В. Ферментер-аппарат полного смещения по жидкой фазе 3. На какую стадию перекачивается осветленный раствор после отстойника?В. На стадию ферментации 4. В процессе высаливания наиболее дешевым и хорошо растворимым является реагент. Назовите его?В. Сульфат аммония 5. Какое время составляет выращивание дрожжей?С. 8-8,5ч 6. Сколько % составляет зола в кормовых дрожжах?Е. 7-11% 7. Что обеспечивает получение низкозастывающего дизельного топлива?А. н-алканы 8. Сколько составляет выход жиров у Dsp. Terreus на углеводных средах?С. 51% 9. Сколько % жидкой фазы отделяют при сепарации?С. 60-75% 10. Какого процесс является типично технологическим для подогрева среды и субстрата?С. Стерилизация

11. Основу питательных сред для культивирования составляют?С. Источники азота 12. Сколько килограмм кормовых дрожжей получают при переработке 1 т сухой хвойной древесины?А. 50-75 кг 13. В каком режиме осуществляется процесс культивирования дрожжей?С. В цилиндрическом 14. Сырой протеин кормовой бактериальной массы полученный на метане составляет?E. До 20 % 15. Чистота окисляющего этилена составляет?D. 88-90 % 16. Температура испарения уксусной кислоты: А. 130-1400 0С 17. При недостаточном перемешивании наблюдается локальное перещелачивание гидрализата , что вызывает ...?С. Выпадение в осадок моносахаридов 18. Сколько групп соединений включают спирты, присутствующие в липидах?А. 3гр 19. На какую стадию производства поступают технологические потоки из всех подготовительных отделений?С. На стадию ферментации 20. Какие 2 большие массы соединений содержат в себе сложные липиды?С. Фосфолипиды и гликолипиды

2. Особенности культивирования микроорганизмов на очищенных н- парафинах. . Очищенные жидкие н-парафины с температу­рами кипения в пределах 200—340°С и длиной углеродной цепи C10—С20, позволяют использовать в качестве продуцентов как бактериальные, так и дрожжевые культуры, однако в насто­ящее время получили распространение почти исключительно дрожжи рода Candida: С. guilliermondii, С. maltosa, С. sake, среди которых имеются и термотолерантные штаммы. Эти микро­организмы при оптимальных условиях культивирования (рН, t°) способны обеспечить высокий экономический коэффициент усво­ения субстрата (н-алканов) — до 110%, накапливают большое количество белка (свыше 60%) при достаточно высокой скорости протока (до 0,22 ч^-1) на оптимально составленной питательной среде.При использовании н-парафинов вопрос состава питательной среды становится особенно актуальным ввиду практически пол­ного отсутствия макро- и микроэлементов в самом сырье. Кроме того, очень заметное влияние на количество накапливаемого клетками дрожжей белка оказывают количество и соотношение вносимых в среду источников азота и фосфора, а также природа соединений добавляемых элементов. По общепринятой схеме в раствор макроэлементов вносят следующие соли: сульфат ам­мония (-0,4 кг/м³); суперфосфат или аммофос (-1,5 кг/м³) и хлорид калия (~0,9 кг/л). Раствор микроэлементов готовится отдельно и состоит из ряда сульфатов, являющихся источниками таких веществ, как магний, марганец, железо, цинк, медь, натрий. Кроме того, для поддержания постоянным значения рН, снижающегося в процессе культивирования, в ферментер по­дается аммиачная вода, служащая одновременно дополнитель­ным источником азота. Условия культивирования дрожжей во многом определены наличием в данном случае четырехфазной системы (газ — вода — жидкие парафины — клетки дрожжей).Изучение распределения клеток в жидких фазах показало, что ~¹/з клеток растет в водной фазе, потребляя капли пара­фина диаметром менее 3 мкм, а ~²/з клеток адсорбируются на поверхности парафиновых капель диаметром от 3 до 5 мкм. Адсорбция на каплях большего диаметра незначительна, поэтому диспергирование н-парафинов в водной фазе играет важную роль в процессе культивирования. Кроме перемешивания на эф­фективность диспергирования влияет поверхностное натяжение, поэтому введение ПАВ снижает поверхностное натяжение и по­вышает удельную скорость роста дрожжей.

3. Осаждение органическими растворителями при получении товарных форм ферментов.Установлено, что после добавления в культуральную жидкость 6 % NaCl в элюате было 2 3 % NaCl, и в водно-спиртовой растворе ( после осаждения ферментов) - 1 7 % хлористого натрия. Добавление электролитов не только способствует улучшению структуры ферментных осадков, но и дает возможность сократить объем спирта ( за исключением изопропилового), расходуемого на осаждение ферментов, что объясняется агрегированием белковых молекул. Для получения технических препаратов протеазы Streptomy-ces griseus, применяемых в тех случаях, когда не требуется высокой очистки, чрезвычайно удобным оказался разработанный нами простой способ осаждения фермента из культуральнои жидкости изопропиловым спиртом. Такой препарат содержит примесь стрептомицина, поэтому его удобно применять в отраслях легкой промышленности и сельском хозяйстве. Технология производства его проста, удается извлечь до 80 % имеющегося фермента, препарат очень дешев. Этапы его получения следующие: а) отделение из культуральнои жидкости мицеллия ( центрифугированием, фильтрованием или иным способом без осветления фосфатом кальция); б) осаждение фермента 2 5 объемами изопропилового спирта; в) центрифугирование осадка; г) высушивание его любым способом при комнатной температуре. Действие на ферментные системы в большей мере свойственно четырехвалентному урану, который образует более прочные комплексы с белками, так как, по-видимому, в противоположность слабо или совсем нереагирующему с сульфгид-рильными группами шестивалентному металлу четырехвалентный уран имеет большое сродство к этой функциональной группе белков, что подтверждается осаждением сульфгид-рильных ферментов в модельных опытах. 

4. Приготовление посевного материала при поверхностном методе культивирования продуцентов ферментов. поверхностный способ применяемый для культивирования микроскопических грибов, характеризуется развитием мицелия на поверхности твердого или жидкого субстрата. На жидком субстрате образуется пленка мицелия, продуцирующего не только амилолитические ферменты, но и органические кислоты, инактивирующие их, поэтому используют твердые субстраты с развитой поверхностью – пшеничные отруби, дробину барды, картофельную мезгу и др.Максимальная активность ферментов достигается при культивировании грибов на пшеничных отрубях. При поверхностном культивировании пшеничные отруби должны быть увлажнены и простерилизованы. В стерильных условиях готовят посевную культуру, но выращивают грибы в нестерильных условиях в кюветах, устанавливаемых в негерметичных камерах. Теплоту, выделяющуюся в процессе роста грибов, удаляют продуванием через растильную камеру стерильного кондиционированного воздуха.Поверхностный способ выращивания микроскопических грибов имеет ряд преимуществ. Так как во время роста гриба отруби не перемешиваются, посторонние микроорганизмы не распространяются по всей их массе и вызывают лишь незначительное местное инфицирование, которое, как правило, не влияет на активность ферментов. Однако все же необходимо стерилизовать воздух, среды и оборудование.Недостаток поверхностного способа – необходимость устанавливать множество кювет, работу с которыми трудно механизировать. Себестоимость культуры гриба-продуцента высока, причем в основном из-за затраты большого количества ручного труда. Механизация процесса выращивания возможна путем создания непрерывнодействующих установок, или бескюветных аппаратов с вертикальным толстым слоем питательной среды и интенсивным продуванием воздуха через этот слой.

№ 11