1. Выполните тестовые задания

1. Важнейшим элементом приготовления питательных сред является ?В. Соблюдение требований асептики 2. Как обычно проводится приготовление посевного материала?А. Периодически 3. Какое разделение наиболее широко используется в процессе производства белковых веществ?Е. На центробежных сепараторах 4. Где применяют конвективные сушилки ленточного, барабанного, шахтного типа?С. На заводах 5. Температура кипения жидких н-парафинов?А. 200-340 оС 6. Размер зазора между вращающимися вальцами составляет?А. 0,1-0,2мм 7. Главным источником жидких парафинов и дизельной фракции является?В. Нефть 8. На сколько видов делится пентазы?А. 2 9. Сколько белка содержат белково-жировые дрожжи полученные культивированием на очищенных н-парафинах?В. 15-18% 10. При какой t выход биомассы достигает 69кг/л?D. 30-33%

11. Вид посевного материала для грибов и актиномицетов?В. Мицелиальная вегетативная масса 12. При каком значении рН развиваются кормовые дрожжи С.scotii?В. 4,2-4,6 13. Каким способом перерабатывается безклеточная культуральная жидкость в производстве ферментных препаратов?С. Экстракция 14. Сколько длится процесс ферментации?Е. От 5 до 10 суток 15. Зола кормовой бактериальной массы , полученный на метане составляет?А. До 10 % 16. При какой температуре происходит гидролиз этил сульфата?Е. 95-100 0С 17. Побочным продуктом гидролиза является?В. Фурфурол 18. Выход дрожжей достигают от РВ?В. 60-68% 19. Источником дополнительного белка для кормопроизводства служит?А. Соя 20. Оптимальная t ферментации при выращивании C. utilis составляет?А. 30-35

2. Особенности культивирования микроорганизмов на природном газе. Природный газ - один из перспективных источников углерода в решении проблемы получения белковых продуктов из непищевого сырья. Помимо широкой распространенности и хорошей транспортабельности к его преимуществам следует от­нести невысокую стоимость метана, практически полное отсутст­вие в нем ингибирующих примесей, а также легкое и полное удаление его из среды на всех стадиях переработки.Однако при получении белковых веществ из метана возни­кает и целый ряд технологических трудностей, например мед­ленный рост микроорганизмов и их повышенная потребность в кислороде (в 5 раз выше, чем на углеводах, и в 2—2,5 раза выше, чем на н-парафинах); низкая растворимость метана в культуральной жидкости (не более 0,02 г/л при атмосферном давлении); взрывоопасность (в интервале концентраций 5—15% по объему метан образует с воздухом взрывоопасные смеси). Все эти трудности обусловливают необходимость более сложного аппаратурного оформления стадии ферментации.В качестве продуцентов на метане используются метанокисляющие бактерии, основными из которых являются Methylococcus capsulatus, относящиеся к облигатным метилотрофным микроорганизмам. Заслуживает внимания применение в процессе биосинтеза смешанных культур, одни из которых усваивают метан, а другие — продукты окисления гомологов метана, что позволяет смешанной популяции развиваться более активно, чем чистые культуры.В составе питательной среды для культивирования необходи­мо наличие источников азота, фосфора, калия, микроэлементов и других ростовых факторов. Потребность в азоте бактериаль­ные штаммы могут удовлетворять за счет нитратов, солей ам­мония, аммиака и даже молекулярного азота, однако вид ис­точника азота в большей степени определяет экономический коэффициент усвоения субстрата (У), который равен для NH₄+ формы 0,85, для нитратной формы 0,70, а удовлетворение по­требности в азоте его молекулярной формой снижает У до 0,65. В связи с культивированием олигонитрофильных бактерий концентрация азота в питательной среде должна составлять 18—30 мг/л; более высокая угнетающе действует на рост клеток. Источником фосфора для биосинтеза могут служить различные соли фосфорной кислоты. Оптимальная концентраций фосфатов в среде 1—5 г/л.

3. Сорбционная очистка при получении товарных форм ферментов. В молекуле фермента имеются функ­циональные группы, сообщающие ей при соответствующих значениях pН среды кислотные или щелочные свойства. Поэтому белки обычно способны сорбироваться по ионообменному меха­низму. Для сорбции белков чаще всего применяют иониты на основе цетлюлозы: катионит - карбоксиметилцеллюлозу (КМЦ) и aнионит — диэтиламиноэтилцеллюлозу (ДЭАЭ) В последнее время появилось множество высокоселективных ионитов, из ко­торых можно выбрать наилучший для каждого конкретного случая: термически oбpaбoтанный крахмал, сефадексы на основе декстрана, аниониты на основе поливинилового спирта, катиониты на основе полиметакриловой кислоты и т. п. После сорбции и промывки проводят десорбцию элюирующими растворами, специально подбираемыми для каждого сорбента и фермента. Варьируя их расход, можно получить раз­личную концентрацию фермента и элюате. Потери активности обычно не превышают 15%. Сорбционную очистку проводят либо непрерывно в колонках насадочного типа, либо периодически в аппаратах с мешалкой с последующим отделением твердой фазы.

4. Стерилизация питательных сред и засев при поверхностном методе культивирования продуцентов ферментов. . Это важнейшая подготови­тельная операция, осуществляемая двумя способами — отделе­нием микроорганизмов от среды или уничтожением их в среде. Перспективнее первый способ, поскольку при любом методе уничтожения микроорганизмов происходит воздействие «губи­тельного» фактора и на компоненты питательной среды. Первый способ проще всего провести с помощью полупроницаемых мем­бран в процессе микрофильтрации. Отечественная промышлен­ность уже осваивает производство стерилизующих микрофильтрационных патронов, однако их применение на практике еще крайне ограничено.Второй метод стерилизации на производстве осуществляют почти исключительно с помощью высоких температур. Отмирание микроорганизмов происходит в течение некоторого времени, которое тем короче, чем интенсивнее «губительный» фактор, т.е. чем выше температура. Кроме того, необходимая экспозиция зависит еще и от уровня обсемененности объекта, так как чем больше микроорганизмов в обрабатываемом объеме, тем больше особей выживет за данное время в выбранных условиях стерили­зации. Стерилизацию питательных сред можно проводить периоди­чески и непрерывно. В первом случае процесс ведут в самом ферментере, куда заливают питательную среду, нагревают ее до температуры стерилизации, выдерживают при этой температуре нужное время и охлаждают. Во втором случае предварительно стерилизуют аппараты и коммуникации проточным паром, затем подают в ферментер среду, которая прошла через нагреватель­ную колонку , где нагрелось острым паром до 120— 140°С, выдерживатель, где находилась нужное время под темпе­ратурой стерилизации, и холодильник, где охладилась до темпе­ратуры культивирования.Отдельно от среды периодическим способом стерилизуют пеногаситель, все корректирующие растворы. Особую проблему представляет стерилизация аммиачной воды, которую невозмож­но нагревать.

№13