5.2.3. Порядок исследования в условиях односменной работы лаборатории

При осуществлении эпиднадзора за холерой исследование материала от обследуемых контингентов может выполняться в следующих вариантах.

а) В качестве 1-й или 2-й среды накопления используют 1%-ю пептонную воду (рН 8,4 +/- 0,1) с теллуритом калия в конечной концентрации 1:100000 - 1:200000 в соответствии с результатами его контроля.

Вопрос выбора транспортной среды и порядок исследования решают в зависимости от разницы времени с момента взятия пробы до поступления ее в лабораторию. Примерная схема забора материала от больных в 1%-ю пептонную воду и порядок дальнейшего его исследования на холеру с учетом различного времени доставки в лабораторию представлены в табл. 1. В течение рабочей недели для отбора проб используют 1%-ю пептонную воду без теллурита калия в объеме 5 - 10 мл, во флаконах или пробирках (транспортная среда).X

Пробы до отправки в лабораторию сохраняют при комнатной температуре (24,0 +/- 1,0) °С в биксах, ящике, шкафу и т.д. в специально выделенной комнате, закрывающейся на замок. Продолжительность сохранения проб в указанных условиях - до 24 ч.

В случаях, когда температура в помещении превышает 25 °С, материал следует брать в 1%-ю пептонную воду с теллуритом калия.

В лаборатории в пробы во флаконах доливают соответствующую среду накопления до 50 мл, а из пробирок все 5 - 10 мл транспортной среды с материалом переносят пипеткой в 50 мл среды накопления.

На период выходного дня лаборатории в порядке исключения допускается следующий вариант: забор материала в 50 мл 1%-й пептонной воды с теллуритом калия (транспортная среда); допускаемое время сохранения проб до начала исследования при температуре (20,0 +/- 1,0) °С - 60 ч, (27,0 +/- 3,0) °С - 48 ч. В лаборатории 5 - 10 мл поверхностного слоя среды с материалом переносят в 50 мл 1%-й пептонной воды без теллурита калия (1 среда накопления) и делают высев на чашку щелочного агара с дальнейшим исследованием по изложенной схеме.

б) Пептонную воду повышенной щелочности в качестве накопительной среды рекомендуется использовать только на первом этапе исследования с удлинением срока инкубации ее до 18 - 24 ч. Основной раствор пептона и 1%-ю пептонную воду с рН 9,5 +/- 0,5 можно готовить впрок по общепринятой методике с подщелачиванием до необходимого уровня и последующей стерилизацией при температуре 120 °С - 20 мин.

Для подщелачивания пептонной воды используют 10 - 20% NaOH.

Таблица 1

ПОРЯДОК ИССЛЕДОВАНИЯ МАТЕРИАЛА В ЗАВИСИМОСТИ

ОТ ВРЕМЕНИ ОТБОРА И ДОСТАВКИ ЕГО В ЛАБОРАТОРИЮ В 1% ПВ

N вари- антов	Время взятия материала	Время доставки в лабораторию	Среда для взятия проб	Назначение среды	1-я среда накопления	2-я среда накопле- ния. Высев с 1-й среды накопления	Высев со 2-й среды накопления
1	6.00 - 10.00	До 10.00	а) 1% ПВ 50 мл б) 1% ПВ 5 - 10 мл	а) Среда накопления б) Транс- портная среда	а) Среда с доставленным материалом б) посев в 50 мл 1% ПВ	Через 6 ч инкуба- ции пересев в 1% ПВ с ТК и высев на щелочной агар и (или) ЭС	В начале следующего рабочего дня
2	10.00 - до конца рабо- чего дня лаборатории	После 10.00 в течение рабочего дня лабора- тории	1% ПВ 5 - 10 мл	Транс- портная среда	Посев 5 - 10 мл среды с материалом в 50 мл 1% ПВ с ТК	9.00 следующего дня пересев в 1% ПВ, высев на щелочной агар и (или) ЭС	Через 6 ч инкубации
3	По окончании рабочего дня лаборатории	До 10.00 следующего дня	1% ПВ 5 - 10 мл	Транс- портная среда	Посев 5 - 10 мл среды с материалом в 50 мл 1% ПВ	Через 6 ч инкуба- ции пересев в 1% ПВ с ТК, высев на щелочной агар и (или) ЭС	В начале следующего рабочего дня
4	Выходные дни лаборатории	До 10.00 рабочего дня	1% ПВ с ТК 50 мл	Транс- портная среда	Посев 5 - 10 мл среды с материалом в 50 мл 1% ПВ	Через 6 ч инкуба- ции пересев в 1% ПВ с ТК, высев на щелочной агар и (или) ЭС	В начале следующего рабочего дня
Обозначения: ТК - теллурит калия; ПВ - пептонная вода; ЭС - элективная среда для выделения холерного вибриона.