- •Иммунология лабораторный практикум для студентов 3 курса
- •Минск, 2014
- •Лабораторное занятие №1 Введение в иммунологические исследования: основные процедуры иммунологического исследования
- •I. Теоретическая часть
- •II. Методические указания к выполнению лабораторной работы
- •III. Содержание отчёта
- •IV. Контрольные вопросы
- •Лабораторное занятие №2 Факторы видового иммунитета: фагоцитарная реакция. Методы исследования фагоцитоза
- •I. Теоретическая часть
- •II. Методические указания к выполнению лабораторной работы
- •III. Содержание отчёта
- •IV. Контрольные вопросы
- •Лабораторное занятие № 3 Гуморальные факторы видового иммунитета: система комплемента. Методы изучения системы комплемента
- •I. Теоретическая часть
- •Проведение метода сн50
- •II. Методические указания к выполнению лабораторной работы
- •III. Содержание отчёта
- •IV. Контрольные вопросы
- •Лабораторное занятие № 4 Взаимодействие антиген-антитело и методы его регистрации: агглютинация
- •I. Теоретическая часть
- •II. Методические указания к выполнению лабораторной работы
- •III. Содержание отчёта
- •IV. Контрольные вопросы
- •Лабораторное занятие № 5 Взаимодействие антиген-антитело и методы его регистрации: преципитация, простая радиальная иммунодиффузия по Манчини
- •I. Теоретическая часть
- •Условия приготовления реагентов
- •Условия проведения реакции
- •Концентрация Ig в сыворотке крови (физиологические уровни)
- •II. Методические указания к выполнению лабораторной работы
- •III. Содержание отчёта
- •IV. Контрольные вопросы
- •Лабораторное занятие № 6 Взаимодействие антиген–антитело и методы его регистрации: реакции антиген–антитело, не дающие визуальных феноменов
- •I. Теоретическая часть
- •Определение общего IgE методом иммуноферментного анализа в сыворотке крови человека
- •II. Методические указания к выполнению лабораторной работы
- •III. Содержание отчёта
- •IV. Контрольные вопросы
- •Лабораторное занятие №7 Иммунофенотипирование лимфоцитов периферической крови
- •I. Теоретическая часть
- •Проведение реакций иммунофенотипирования лимфоцитов
- •II. Методические указания к выполнению лабораторной работы
- •III. Содержание отчёта
- •IV. Контрольные вопросы
- •Лабораторное занятие №8 Оценка функциональной активности лимфоцитов периферической крови в реакции бластной трансформации
- •I. Теоретическая часть
- •Проведение реакции
- •Показатели пролиферативной активности
- •II. Методические указания к выполнению лабораторной работы
- •III. Содержание отчёта
- •IV. Контрольные вопросы
- •Лабораторное занятие № 9 Методы диагностики аллергических заболеваний
- •I. Теоретическая часть
- •Тесты, позволяющие выявлять сенсибилизацию к аллергену
- •Провокационные аллергические тесты
- •Лабораторные методы аллергодиагностики
- •II. Методические указания к выполнению лабораторной работы
- •III. Содержание отчёта
- •IV. Контрольные вопросы
- •Лабораторное занятие № 10 Методы диагностики аутоиммунных заболеваний
- •I. Теоретическая часть
- •Определение антинукларныхаутоанител (ana) с помощью иммунофлуоресцентного метода
- •Определение ревматоидного фактора (рф)
- •Определения рф с помощью латекс-теста
- •II. Методические указания к выполнению лабораторной работы
- •III. Содержание отчёта
- •IV. Контрольные вопросы
- •Лабораторное занятие № 11 Методы диагностики иммунодефицитов
- •I. Теоретическая часть
- •Классификация первичных иммунодефицитов (пид)
- •Тесты 1 и 2 уровней
- •II. Методические указания к выполнению лабораторной работы
- •III. Содержание отчёта
- •IV. Контрольные вопросы
- •Содержание
Тесты 1 и 2 уровней
Тесты 1 уровня |
Тесты 2 уровня |
1. Определение количества лейкоцитов и лейкоцитарной формулы |
|
2. Определение субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови (CD3 для Т-лимфоцитов, CD4 – для Т-хелперов, CD8 – для Т-цитотоксических лимфоцитов.CD19 или 20 или 21 – для В-лимфоцитов CD56/16 – для NK-лимфоцитов) |
Определение маркеров функциональной активности лимфоцитов, включая адгезивные молекулы, рецепторы к цитокинам, рецептор к трансферрину и др. (в зависимости от показаний) |
|
Определение функциональной активности лимфоцитов в тестах пролиферации, циnотоксичности, продукции цитокинов и др. |
3. Определение концентрации IgG, IgA, IgM |
Определение субклассов Ig и титра антигенспецифических антител. При показаниях – определение IgE (общего и антигенспецифического) |
4. Определение фагоцитарной активности нейтрофилов с расчетом ФП и ФЧ |
Определение миелопероксидазы и др. ферментных систем фагоцитов, определение хемотаксической и адгезивной активности нейтрофилов и др. функциональных параметров |
5. Определение функциональной активности системы комплемента по СН50 |
Определение активности альтернативного пути активации системы комплемента, определение концентрации и функциональной активности отдельных компонентов |
Результаты иммунологического исследования интерпретируются, учитывая нормативные показатели иммунной системы человека (см. табл. 11.2) и делается заключение.
Таблица 11.2
Нормативные показатели состояния иммунной системы у человека
Показатели |
Физиологические значения |
1. Лейкоциты |
4,0-9,5 × 109/л |
2. Нейтрофилы |
50-77% |
3. Лимфоциты |
18-38% |
4. Моноциты |
2-10% |
5. Базофилы |
0,5-1,0% |
6. Эозинофилы |
1-4% |
7. IgM |
0,8-2,0 г/л |
8. IgG |
8-13,0 г/л |
9. IgA |
1,4-3,0 г/л |
10. IgE |
0,00025 г/л (0-200 МЕ/мл) |
11. IgD |
0,03 г/л (20 МЕ/мл) |
12. ЦИК (циркулирующие иммунные комплексы) |
до 100 усл.ед. |
13. ФЧ (фагоцитарное число) |
1,0-2,5 (Candidaalbicans) 4,0-9,0 (стафилококк) 4,0-6,0 (латекс) |
14. ФП (фагоцитарный показатель) |
50-60 (Candidaalbicans) 60-80 (стафилококк) 60-80 (латекс) |
15. Комплемент |
20-50 ед |
16. C1q |
58-72 мг/л |
17. C3 |
1,3-1,5 г/л |
18. C4 |
150-450 мг/л |
19. C5 |
51-77 мг/л |
20. C9 |
47-69 мг/л |
21. Пропердин |
0,02 г/л |
22. Т-лимфоциты, CD3+ |
65-80% |
23. Т-хелперы, CD4+ |
35-48% |
24. Т-киллеры, CD8+ |
20-30% |
25. Натуральные киллеры, CD16+ |
10-15% |
26. В-лимфоциты, CD20+ |
6-12% |
