- •1. Определение предмета медицинской микробиологии. Целевое назначение микробиологических лабораторий.
- •4. Виды микроскопии.Приготовление фиксированных препаратов мазков. Этапы и механизмы окраски по Граму.
- •5.Строение бактериальной клетки.Особенности строения клеточной стенки бактерий.
- •7. Капсулы бактерий, их важнейшие свойства, способы их обнаружения при микроскопировании.
- •8. Жгутики, донорные ворсинки, фимбрии, или реснички – их химическая структура, биологическое значение для бактериальной клетки.
- •9. Приготовление препаратов для изучения микроорганизмов в нативном виде: методы "висячей", "раздавленной" капли и витальная (прижизненная) окраска.
- •10. Порядок Spirochaetalis, их морфологические особенности. Внутривидовая дифференциация по морфологическим особенностям.
- •11. Морфологические особенности риккетсий, хламидий, микоплазм их систематика, классификация. Морфология вегетативной и покоящейся стадий.
- •12.Основные свойства вирусов. Молекулярно-генетическая организация вирусов, основа их таксономии
- •14. Питание бактерий.Классификация бактерий по типу питания, источникам энергии.Основные механизмы питания бактерий.
- •15. Классификация бактерий по типу дыхания.Рост и размножение бактерий.Фазы размножения популяции бактерий в жидкой питательной среде
- •2. Фаза логарифмического роста;
- •3. Фаза стационарного роста, или максимальной концентрации бактерий;
- •4. Фаза гибели бактерий.
- •16. Основные группы ферментов бактерий и их классификация.Факторы роста
- •17 . Первый этап выделения чистой культуры бактерий.Дайте определение специфическим микробиологическим терминам: "вид", "штамм", "клон", "колония", "чистая культура".
- •19. Методы стерилизации питательных сред.
- •20. Способы культивирования бактерий. Второй этап выделения чистой культуры.
- •21. Третий этап выделения чистой культуры.Методы выделения чистой культуры аэробных бактерий.Методы выделения чистой культуры анаэробных бактерий.
- •2. Для предупреждения проникненя кислорода в среду его заливают слоем стерильного вазелинового масла или парафином.
- •22 )Определение культуральных свойств бактерий в лабораторных условиях с целью их идентификации или диагностики
- •23. Определение сахаролитических ферментов бактерий в лабораторных условиях с целью их идентификации или диагностики.
- •24. Определение протеолитических ферментов бактерий в лабораторных условиях с целью их идентификации или диагностики.
23. Определение сахаролитических ферментов бактерий в лабораторных условиях с целью их идентификации или диагностики.
Сахаролитические свойства фитопатогенных бактерий можно выявить при изучении способности у них разлагать крахмал. Крахмал – полисахарид, находящийся в растительных клетках, разлагается сравнительно небольшим количеством бактерий. Такие бактерии обладают обычно мощным комплексом ферментов, под действием которых происходит гидролиз крахмала на декстрин и мальтозу, а затем – глюкозу. Эти свойства наблюдаются и у некоторых фитопатогенных бактерий. Для выявления способности у бактерий гидролизировать крахмал их высевают штрихами на твердую питательную среду, содержащую растворимый крахмал и выдерживают в термостате семь дней. В результате гидролиза крахмала вокруг таких штрихов образуется светлая зона (ореол), хорошо заметная, если чашки залить раствором йода или Люголя, окрашивающим среду в синий цвет. Если гидролиз крахмала дошел до стадии образования декстринов, то ореолы окрашиваются в красновато-бурый цвет, если же крахмал перешел в сахар, то они остаются бесцветными. Рецепт применяемой среды: к 1 л расплавленного горячего мясопептонного агара прибавляют 0,5 г растворимого крахмала, предварительно размешанного в небольшом количестве воды, и хорошо перемешивают. После этого агар разливают в пробирки или сотки и стерилизуют в течение 30 мин под давлением 1 атм. О сахаролитических свойствах бактерий можно судить также и по их поведению на молоке. Под влиянием фитопатогенных бактерий в молоке могут происходить следующие изменения – свертывание, пептонизация, свертывание + пептонизация, либо молоко может оставаться без изменения. Кроме того, на молоке может наблюдаться образование пигмента. Для обнаружения у бактерий способности свертывать молоко его необходимо слегка подогреть на пламени горелки. Изменения, происходящие в молоке под влиянием фитопатогенных бактерий, следует регистрировать периодически. Первый раз записывают изменения на 1–2-й день, затем на 4, 10 и 21-й день. Свертывание молока может быть вызвано действием фермента бактерий, сбраживающего лактозу (молочный сахар), с образованием молочной кислоты, под влиянием которой белок молока (казеин) свертывается, образуя творожистую массу. Сгусток в дальнейшем не изменяется. Свертывание молока под влиянием протеолитического фермента может происходить с дальнейшей его пептонизацией. Отмечают начало и конец этого процесса. Пептонизация может происходить и без предварительного свертывания. При исследовании изменений молока отмечают его консистенцию – вязкую, тягучую, без изменений и цвет – бурый, синий, зеленый и др.
24. Определение протеолитических ферментов бактерий в лабораторных условиях с целью их идентификации или диагностики.
Для определения протеолитических ферментов производят посев культуры бактерий уколом в столбик 10—20% желатина, пептонную воду. Посевы в желатине инкубируют при 20—22°С в течение нескольких дней. При наличии протеолитических ферментов бактерии разжижают желатин, причем в этом месте образуется фигура, напоминающая воронку или елочку.
Протеолитические ферменты бактерий определяются также по выделению индола, сероводорода, расщеплению некоторых аминокислот, например, фенилаланина, лизина, цистина. Протеолитические ферменты способны изменять (разжижать) желатину, причем, разные виды бактерий по разному изменяют «столбик» желатины в пробирке с посевом микроорганизма.