Дата__________________ Занятие №10

Тема: Генетика микроорганизмов. Структура генетического аппарата у бактерий и вирусов. Модификации. Мутации. Генетические рекомбинации. Генетика вирусов. Особенности изменчивости у вирусов.

Вопросы для обсуждения:

1. Организация генетического материала бактерий и вирусов. Генотип и фенотип.

2. Внехромосомные факторы наследственности бактерий: IS-последовательности, транспозоны, плазмиды, вирусы.

3. F – плазмида, её функция. Конъюгативные и неконъюгативные плазмиды.

4. R – плазмида, её значение. Методы выявления чувствительности бактерий к антибиотикам.

5. Плазмиды бактериоциногенности. Определение бактериоциновара и бактериоциногеновара.

6. Плазмиды, кодирующие признаки патогенности.

7. Сущность модификационной изменчивости.

8. Мутации. Молекулярный механизм мутаций. Репарации.

9. Генетические рекомбинации: трансформация, трансдукция, коньюгация.

10. Основы генетической инженерии и биотехнологии.

Практические задания:

1. Выявить изменчивость морфологических свойств бактерий под воздействием:

а) фенола (микроскопировать мазки из колоний Proteus vulgaris, образованных на обычном МПА и на 0,1% феноловом МПА, окрашенных фуксином Пфейффера).

Рис. 1. Proteus vulgaris в препарате Рис. 2. Proteus vulgaris в препарате

из колонии на МПА из колонии на 0,1% феноловом МПА

б) пенициллина (микроскопировать мазки из колоний Bacillus аnthracis, образованных на МПА с пенициллином, окрашенных метиленовым синим - «жемчужное ожерелье»).

Рис. 3. B. anthracis в препарате Рис. 4. B. anthracis в препарате из

из колоний на МПА колоний на МПА с пенициллином

(«жемчужное ожерелье»)

2. Изучить изменчивость культуральных свойств: S- и R- формы колоний эшерихий.

3. Определить фенотипические проявления R-плазмиды бактерий (множественная устойчивость к антибиотикам) методом стандартных дисков.

4. Ознакомиться с фенотипическими проявлениями Col-плазмиды с помощью методов колицинотипирования и колициногенотипирования.

Рис. 5. Метод колицинотипирования Рис. 6. Метод колициногенотипирования

Вывод: культура E. сoli чувствительна к колицинам__________________

Вывод: культура E. сoli продуцирует колицины: ______________________

5. Ознакомиться с фенотипическими проявлениями Hly-плазмиды (продукция гемолизина) у E. coli на кровяном агаре.

Рис. 7. Продукция гемолизина Е.coli

6. Выявить и изучить ауксотрофные мутанты эшерихий, полученные под воздействием ультрафиолетовых лучей:

а) сравнить результаты посева методом реплик облученной УФ-лучами культуры на полноценной (МПА) и минимальной средах;

Рис. 8. Рост культуры на полноценной среде

Рис. 9. Рост культуры на минимальной среде

б) установить потребности выделенных ауксотрофных мутантов в метаболите на селективной среде, содержащей аминокислоты.

	Лизин	Лейцин		Гистидин	Метионин		Триптофан

Вывод: ______________________________________________________

7. Учесть результаты опыта конъюгации между E. coli F⁺, прототроф, Str^s и E. coli F^-, ауксотроф по метионину, Str^r. Определить признак, приобретенный рекомбинантом, образующим колонии на минимальной плотной среде, содержащей стрептомицин 1000 мкг/мл.

Записать результаты опыта конъюгации.

Донор E. coli F⁺, Str^s х Реципиент E. coli F^-, Met ^-, Str^r

Селективная среда: минимальная плотная среда, содержащая стрептомицин 1000мкг/мл.

Выявлены колонии рекомбинантов на селективной среде в результате постановки опыта конъюгации.

Донор ____________________________________________________________

Реципиент ________________________________________________________

Рекомбинант ______________________________________________________

Вывод: ___________________________________________________________

Подпись преподавателя ________________