- •Симферополь – 2015 г.
- •Вопросы для обсуждения:
- •Практические задания:
- •Подпись преподавателя _________________ Дата__________________ Занятие №2
- •Вопросы для обсуждения:
- •Практические задания:
- •Подпись преподавателя _________________ Дата__________________ Занятие №3
- •Вопросы для обсуждения:
- •Классификация ферментов
- •Подпись преподавателя ________________ Дата__________________ Занятие №4
- •Вопросы для обсуждения:
- •Практические задания:
- •Протокол бактериологического исследования аэробных бактерий
- •Занятие №5
- •Вопросы для обсуждения:
- •Протокол бактериологического исследования аэробных бактерий
- •Занятие №6
- •Вопросы для обсуждения:
- •Практические задания:
- •Характеристика некоторых свойств Escherichia сoli
- •Протокол бактериологического исследования аэробных бактерий
- •Дифференциально-диагностические свойства некоторых видов клостридий
- •Занятие №7
- •Практические задания:
- •Подпись преподавателя ________________
- •Занятие №8
- •Вопросы для обсуждения:
- •Практические задания:
- •Лунки полистиролового планшета
- •1:10 1:20 1:40 1:80 1:160 Контроль
- •Занятие №9 Контрольное занятие №1. Тема: «Морфология, структура и культивирование микроорганизмов».
- •Дата__________________ Занятие №10
- •Вопросы для обсуждения:
- •Практические задания:
- •Дата__________________ Занятие №11
- •Практические задания:
- •Занятие №12
- •Вопросы для обсуждения:
- •Практические задания:
- •Дата__________________ Занятие №13
- •Вопросы для обсуждения:
- •Практические задания:
- •Дата__________________ Занятие №14
- •Вопросы для обсуждения:
- •Практические задания:
- •Сравнительная характеристика экзо- и эндотоксинов
- •Подпись преподавателя ________________
- •I. Тестовый контроль знаний.
- •III. Вопросы для устного опроса
- •Дата__________________ Занятие №16
- •Занятие №17
- •Вопросы для обсуждения:
- •Практические задания:
- •Занятие №18 Зачет
Дата__________________ Занятие №11
Тема: Генетические методы исследования в диагностике инфекционных болезней. Полимеразная цепная реакция. Гибридизация нуклеиновых кислот. Основы генной инженерии и биотехнологии.
Вопросы для обсуждения:
Какие свойства нуклеиновых кислот положены в основу молекулярно-генетических методов исследования?
Чем обусловлена геноидентификация видов организмов?
Сущность метода молекулярной гибридизации (МГ) нуклеиновых кислот.
«Молекулярный зонд», его назначение.
Варианты постановки МГ нуклеиновых кислот и результатов ее учета.
Отличия полимеразной цепной реакции (ПЦР) от метода МГ нуклеиновых кислот.
Ингредиенты, необходимые для постановки ПЦР.
Функция «праймеров».
Этапы цикла ПЦР.
Методы регистрации ПЦР.
Рестрикционный анализ (сиквенс-анализ), его применение.
Риботипирование, его практическое использование.
Основы генной инженерии и биотехнологии.
Практические задания:
Изучить схемы постановки:
а) метода молекулярной гибридизации нуклеиновых кислот;
б) полимеразной цепной реакции.
Учесть результаты ПЦР на агарозном геле после разделения продуктов амплификации ДНК микроорганизмов методом электрофореза и окрашивания этидием бромида. Выявить геномные фрагменты и сопоставить их с контрольным образцом.
Дорисовать схему постановки метода молекулярной гибридизации.
|
Двуцепочечная ДНК-мишень,
|
|
|
|
Денатурация ДНК
|
|
Присоединение ДНК-зонда (возможные метки: изотоп, ФИТЦ, фермент) |
|
Разделение одно- и двуцепочечных фрагментов ДНК |
|
Детекция двуцепочечных ДНК |
Рис. 1. Схема постановки метода молекулярной гибридизации.
Дорисовать схему постановки метода молекулярной ПЦР.
Ингредиенты для постановки ПЦР: праймеры, азотистые основания, термостабильная ДНК-полимераза.
|
Двуцепочная ДНК-мишень |
|
Праймеры, комплементарные консервативным последовательностям нуклеиновых кислот |
1-й цикл |
|
|
1-й этап. Денатурация ДНК при 90-950С |
|
2-й этап. Отжиг праймеров при 50-650С |
|
3-й этап. Достраивание комплементарнй цепи ДНК при участии ДНК-полимеразы при 720С
|
Повторные циклы приводят к накоплению последовательности ДНК, ограниченной праймерами.
Детекция двуцепочечных ДНК.
Рис. 2. Схема постановки полимеразной цепной реакции (ПЦР)
Подпись преподавателя ________________
Дата__________________