- •1. Область применения
- •2. Общие положения
- •3. Общие требования к сбору проб биологического материала
- •4. Общие требования к доставке проб биоматериала
- •5. Пробы различных видов биоматериала и среды,
- •6. Правила и техника получения
- •6.1. Пробы крови
- •6.2. Пробы при инфекционно-воспалительных процессах
- •6.3. Пробы при инфекционно-воспалительных процессах глаз
- •6.4. Пробы при инфекционно-воспалительных процессах уха
- •6.5. Пробы при инфекционно-воспалительных процессах
- •6.6. Пробы при инфекционно-воспалительных процессах
- •6.7. Пробы диализата у больных, находящихся на постоянном
- •6.8. Пробы при инфекционно-воспалительных процессах
- •6.9. Пробы у пациентов, получающих в качестве медицинской
- •6.10. Пробы стерильных жидкостей тела (кроме крови,
- •6.11. Пробы при инфекциях кожи и подкожной клетчатки
- •6.12. Пробы из инфицированных глубоких ран, абсцессов,
- •6.13. Пробы при инфекциях в стоматологии (десны,
- •6.14. Пробы при инфекционно-воспалительных процессах костей
- •6.15. Пробы для определения обсемененности сосудистого
- •6.16. Пробы материала при аутопсии
- •7. Пробы биоматериалов для определения наличия анаэробов,
- •7.1. Пробы биоматериала для определения наличия анаэробов
- •7.2. Пробы биоматериала для определения наличия вирусов
- •7.3. Пробы биоматериала для определения наличия простейших
- •8. Пробы биоматериала
- •8.1. Общие положения
- •8.2. Иммуносерологическое обследование
- •8.3. Методы исследования, применяемые в иммуносерологии
- •8.4. Сбор и хранение образцов для пцр-диагностики
- •8.5. Сбор проб для диагностики сифилиса
- •9. Библиографические данные
6.15. Пробы для определения обсемененности сосудистого
катетера при подозрении на катетер-ассоциированную инфекцию
Материал собирают следующим образом:
- очищают кожу вокруг катетера стерильной марлевой салфеткой, смоченной 70%-м этиловым спиртом;
- с соблюдением правил асептики удаляют катетер;
- стерильными ножницами отрезают около 5 см от дистального конца катетера;
- помещают отрезанный кусок в сухие стерильные одноразовую пробирку с пробкой или стеклянную пробирку, или стерильный одноразовый контейнер с завинчивающейся крышкой (для сбора мокроты);
- немедленно передают материал в лабораторию, для предохранения от высыхания можно добавить несколько капель стерильного физиологического раствора.
6.16. Пробы материала при аутопсии
Основным условием для получения достоверных результатов и их правильной интерпретации является взятие материала не позднее 12 ч после смерти больного, даже при хранении трупа при пониженной температуре.
6.16.1. Пробы крови получают из левого желудочка сердца стерильным шприцем. Пункцию проводят после обработки выбранного участка стерильной салфеткой, смоченной 3%-м раствором перекиси водорода, и последующим удалением антисептика стерильной салфеткой, смоченной стерильным физиологическим раствором.
Дезинфекцию выбранного для пункции участка сердца можно выполнить методом прижигания ткани шпателем. Для получения пробы из левого желудочка сердца стерильным шприцем необходимо отсосать не менее 10 мл крови. Сразу после взятия материал переносят в стерильный стеклянный флакон с двойной средой, закрытый ватно-марлевой пробкой. Край флакона и пробку обжигают над пламенем спиртовки. При наличии в лечебно-профилактических организациях специальных флаконов со средами для определения наличия бактериемии или соответствующего оборудования полученные пробы вносят в 2 бутылки: для аэробного и анаэробного культивирования по 10 мл в каждую емкость.
6.16.2. Пробы (кусочки) органов и/или тканей, величиной не менее 3 - 5 куб. см (обязательны пробы из селезенки, регионарных и отдаленных лимфоузлов, очагов воспаления), помещают каждый в отдельную стерильную емкость (одноразовые стерильные контейнер с завинчивающейся крышкой или чашки Петри - d = 55 мм. Используют также специальные емкости с транспортировочными средами, разрешенными к применению для этих целей в установленном порядке. Маркируют емкости с материалом с указанием пробы органа и/или ткани.
6.16.3. Гной из вскрытых полостей, спинно-мозговую и другие жидкости отсасывают стерильным шприцем в объеме не менее 7 - 10 мл и помещают в стерильные одноразовые пробирки или оставляют в шприцах, закрытых стерильными резиновыми пробками, или в транспортировочных емкостях. Маркируют пробы.
6.16.4. Материал от трупа больного с гнойно-воспалительной патологией доставляют в лабораторию в течение 1 ч после взятия.
В сопроводительном документе (направлении) дополнительно указывают дату и время смерти, а также отделение, в котором умер больной, дату и время вскрытия.
7. Пробы биоматериалов для определения наличия анаэробов,
вирусов, простейших
7.1. Пробы биоматериала для определения наличия анаэробов
Клинические признаки анаэробной инфекции:
- неприятный гнилостный запах отделяемого;
- гнилостный характер очага воспаления: некроз тканей, формирование глубоких абсцессов;
- близость очага воспаления к органам естественного обитания анаэробов: пищеварительный тракт, половые органы, дыхательные пути;
- развитие инфекции на фоне лечения больного антибиотиками из группы аминогликозидов;
- наличие газа в тканях или клинической картины газовой гангрены;
- черное окрашивание экссудата;
- наличие септического тромбофлебита.
Таблица 2
ВОЗМОЖНАЯ ЛОКАЛИЗАЦИЯ АНАЭРОБНОЙ ИНФЕКЦИИ И БИОМАТЕРИАЛЫ,
ПОСЫЛАЕМЫЕ НА ИССЛЕДОВАНИЕ
┌───────────────────────┬────────────────────────────────────────┐
│ Возможная локализация │ Пробы биоматериала │
│ инфекции │ │
├───────────────────────┼────────────────────────────────────────┤
│ 1 │ 2 │
├───────────────────────┼────────────────────────────────────────┤
│Голова и шея │Аспираты абсцессов, полученные шприцем │
│ │с иглой после деконтаминации поверхнос- │
│ │ти; биоптат, полученный при операции; │
│ │мазки, полученные во время операции, │
│ │при невозможности получения биоптата │
├───────────────────────┼────────────────────────────────────────┤
│Легкие │Транстрахеальный аспират; материал, по- │
│ │лученный из легкого при чрескожной пунк-│
│ │ции; биоптаты, полученные во время опе- │
│ │рации; пробы при проведении бронхоско- │
│ │пии, полученные защищенной щеткой; про- │
│ │бы, полученные при проведении торакото- │
│ │мии; мазки, полученные во время опера- │
│ │ции, при невозможности получения биоп- │
│ │тата │
├───────────────────────┼────────────────────────────────────────┤
│Центральная нервная │Аспираты абсцессов, полученные шприцем │
│система │с иглой; биоптаты, полученные во время │
│ │операции; мазки, полученные во время │
│ │операции, при невозможности получения │
│ │биоптата │
├───────────────────────┼────────────────────────────────────────┤
│Брюшная полость │Перитонеальная жидкость, полученная │
│ │шприцем с иглой; аспираты абсцессов, по-│
│ │лученные шприцем с иглой; желчь, полу- │
│ │ченная шприцем с иглой при чрескожной │
│ │аспирации, а также полученная во время │
│ │операции; биоптаты, полученные во время │
│ │операции; мазки, полученные во время │
│ │операции, при невозможности получения │
│ │биоптата │
├───────────────────────┼────────────────────────────────────────┤
│Урогенитальный тракт: │ │
│моча │Проба, полученная надлобковой аспирацией│
│ │ │
│женские половые органы │Пробы, полученные кульдоскопом; аспираты│
│ │эндометрия, полученные отсосом или спе- │
│ │циальным защищенным медицинским инстру- │
│ │ментом; аспираты абсцессов, полученные │
│ │шприцем с иглой; биоптат, полученный │
│ │шприцем с иглой; мазки, полученные во │
│ │время операции, при невозможности полу- │
│ │чения биоптата │
│ │ │
│мужские половые органы │Аспират придатков яичка; биоптат аденомы│
│ │предстательной железы, полученный при │
│ │проведении трансуретральной резекции │
│ │(ТУР) или во время полостной операции; │
│ │биоптат новообразований; эякулят; аспи- │
│ │рат яичка, полученный шприцем с иглой; │
│ │мазки, полученные во время операции, при│
│ │невозможности получения биоптата │
├───────────────────────┼────────────────────────────────────────┤
│Кости и суставы │Гной, полученный прямой аспирацией во │
│ │время операции; грануляционная ткань или│
│ │гной из инфицированной кости; биоптат, │
│ │полученный во время операции; секвестры,│
│ │полученные во время операции; аспираты, │
│ │полученные шприцем с иглой; мазки, полу-│
│ │ченные во время операции, при невозмож- │
│ │ности получения биоптата │
├───────────────────────┼────────────────────────────────────────┤
│Мягкие ткани │Аспираты, полученные шприцем и иглой; │
│ │биоптаты, полученные во время операции; │
│ │аспират из синусов любой локализации, │
│ │полученный иглой и малым одноразовым │
│ │катетером; глубокие аспираты краев от- │
│ │крытой раны, полученные чрескожной аспи-│
│ │рацией предварительно очищенной кожи; │
│ │глубокие аспираты поверхностных изъяв- │
│ │лений, полученные чрескожной аспирацией │
│ │предварительно очищенной кожи │
├───────────────────────┼────────────────────────────────────────┤
│Желудок, 12-перстная │Биоптаты желудка и 12-перстной кишки │
│кишка, тонкий кишечник │или из тела и antrum желудка для опре- │
│ │деления Helicobacter pylori; биоптаты │
│ │изо всех полостей только при наличии │
│ │проблем петли слепой кишки или синдроме │
│ │мальабсорбции │
├───────────────────────┼────────────────────────────────────────┤
│Толстая кишка │Только для культивирования и определения│
│ │наличия токсина при подозрении на Cl. │
│ │difficile или Cl. botulinum, Anaerobio- │
│ │spirillum succiniciproduceus и другие │
│ │этиологические агенты │
└───────────────────────┴────────────────────────────────────────┘
Для доставки проб в лабораторию используют следующие транспортировочные емкости:
- флаконы или пробирки с анаэробной атмосферой и агаровой основой с индикатором для ее контроля, в которых доставляют аспирационный материал;
- специальные мешки или система пробирок, из которых удаляется молекулярный кислород, в которых доставляют ткани, биопсийный материал, пробы, полученные при выскабливании кюреткой;
- емкости с транспортировочной агаризованной средой для анаэробов, разрешенные к применению в установленном порядке, со стерильным зондом-тампоном для сбора материала;
- для доставки материала, собранного тампоном, используют пробирки с анаэробной атмосферой и агаровой основой с индикатором для ее контроля; пробирки с катализатором, генерирующим анаэробную атмосферу после введения тампона в пробирку, пробирки с анаэробной атмосферой и редуцированной средой.
При наличии специальных емкостей и сред с реагентами аспираты доставляют в лабораторию во флаконах или пробирках с анаэробной атмосферой и агаровой основой, в которую добавляют индикатор анаэробиоза; кусочки ткани, биопсийный или собранный кюреткой материал - в мешке или системе пробирок, действие которых состоит в удалении молекулярного кислорода; пробы, собранные тампоном - в пробирке с анаэробной атмосферой и агаровой основой с индикатором анаэробиоза; в пробирке с каталитической системой для генерации анаэробной атмосферы после того, как в нее помещают тампон; в пробирке с анаэробной атмосферой и редуцированной транспортной специальной средой.
В отсутствии специальных емкостей и сред с реагентами допустимо использование пробирки и другой емкости с редуцированными тиогликолевой средой, с тиоловым бульоном, а также со средами с добавлением гемина и менадиола. Пробирку со средой плотно закрывают стерильной резиновой пробкой.
