- •1. Область применения
- •2. Общие положения
- •3. Общие требования к сбору проб биологического материала
- •4. Общие требования к доставке проб биоматериала
- •5. Пробы различных видов биоматериала и среды,
- •6. Правила и техника получения
- •6.1. Пробы крови
- •6.2. Пробы при инфекционно-воспалительных процессах
- •6.3. Пробы при инфекционно-воспалительных процессах глаз
- •6.4. Пробы при инфекционно-воспалительных процессах уха
- •6.5. Пробы при инфекционно-воспалительных процессах
- •6.6. Пробы при инфекционно-воспалительных процессах
- •6.7. Пробы диализата у больных, находящихся на постоянном
- •6.8. Пробы при инфекционно-воспалительных процессах
- •6.9. Пробы у пациентов, получающих в качестве медицинской
- •6.10. Пробы стерильных жидкостей тела (кроме крови,
- •6.11. Пробы при инфекциях кожи и подкожной клетчатки
- •6.12. Пробы из инфицированных глубоких ран, абсцессов,
- •6.13. Пробы при инфекциях в стоматологии (десны,
- •6.14. Пробы при инфекционно-воспалительных процессах костей
- •6.15. Пробы для определения обсемененности сосудистого
- •6.16. Пробы материала при аутопсии
- •7. Пробы биоматериалов для определения наличия анаэробов,
- •7.1. Пробы биоматериала для определения наличия анаэробов
- •7.2. Пробы биоматериала для определения наличия вирусов
- •7.3. Пробы биоматериала для определения наличия простейших
- •8. Пробы биоматериала
- •8.1. Общие положения
- •8.2. Иммуносерологическое обследование
- •8.3. Методы исследования, применяемые в иммуносерологии
- •8.4. Сбор и хранение образцов для пцр-диагностики
- •8.5. Сбор проб для диагностики сифилиса
- •9. Библиографические данные
7.2. Пробы биоматериала для определения наличия вирусов
По мере появления новых клинических симптомов заболевания, а также развития и совершенствования методов лабораторной диагностики перечень возбудителей и биоматериал могут претерпевать изменения.
Сбор проб необходимо производить как можно раньше, после появления клинической симптоматики: вероятность обнаружения вируса максимальна в течение первых трех суток и резко снижается по прошествии пяти суток. Сбор материала при аутопсии производят по возможности в самые ранние сроки после смерти пациента. Все пробы получают с соблюдением асептических условий; каждый образец помещают в отдельный стерильный одноразовый контейнер; собирают анамнез больного, обращая внимание на контакты и поездки в страны (регионы), эндемичные по определенным заболеваниям. Пробы отправляют в лабораторию в емкости с транспортировочной жидкой средой для сохранения вирусов немедленно; при невозможности выполнить это, пробы хранят в холодильнике или на подтаявшем льду.
Пробы собирают в стерильные контейнеры с завинчивающейся крышкой, можно использовать стерильные конические центрифужные пробирки (15 - 50 мл) с плотно закрывающимися пробками, а также маленькие (4 мл), в которые можно внести 1 - 2 мл вирусной транспортировочной среды.
Для сбора пробы зондом-тампоном используют стерильные тампоны (из вискозы или дакроновые) на пластиковом или алюминиевом основании, пригодны также маленькие тампоны на легком алюминиевом основании (уретральные зонды-тампоны).
Не допускается применять тампоны с алгинатом кальция и с деревянной осью.
Для аспирации жидкости везикул используют туберкулиновые шприцы. В каждую емкость с зондом-тампоном при сборе пробы вносят по 3 - 4 стерильные стеклянные бусинки (d = 5 мм) для снятия материала с тампона.
Кровь собирают в стерильные одноразовые или стеклянные пробирки с антикоагулянтом (гепарин, ЭДТА, цитрат натрия).
Таблица 3
СБОР ПРОБ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ВИРУСОВ
Проба |
Способ получения |
Вирусы-возбудители |
1 |
2 |
3 |
Кровь |
Собирают 8 - 10 мл в емкость с антикоагулянтом |
Арбо-, адено-, цито-, мегало-, герпес симплекс-, иммунодефицита человека тип 1 и другие ретровирусы (персистирующие и диссеми- нированные инфекции у им- мунокомпрометированных ин- дивидуумов и новорожденных) |
Костный мозг |
Собирают не менее 2 мл в емкость с антикоагулянтом |
Цитомегаловирус |
Жидкости: |
||
ликвор |
Собирают 2 - 5 мл в стерильный контейнер |
Энтеровирусы (коксаки А, В; эхо-, энтеровирусы); гер- пес, лимфоцитарного хорио- менингита, эпидемического паротита, бешенства (может быть полезным для некоторых арбовирусных инфекций) |
перикар- диальная |
Собирают не менее 2 мл в стерильный контейнер |
Коксаки-вирус |
слюна |
Собирают слюну на 1 или 2 тампона изо рта; помещают тампоны в емкости с тран- спортировочной средой для вирусов |
Вирус бешенства, цитомега- ловирус, вирус эпидемичес- кого паротита |
моча |
Собирают 10 - 12 мл сред- ней порции свободно ис- текающей мочи в стериль- ный одноразовый контейнер с завинчивающейся крышкой |
Адено-, цитомегало-герпес-, паротита-, полио-, краснухи (2 или 3 порции увеличивают вероятность обнаружения цитомегаловируса - ЦМВ) |
Желудочно-кишечный тракт: |
||
ректальный мазок |
Вводят тампон на глубину 4 - 6 см per rectum и вращают вокруг оси; из- влекают и помещают тампон в емкость с транспортиро- вочной средой для вирусов |
Адено-, энтеро-, (коксаки А, В; эхо-, энтеровирусы), герпес (полезны при диаг- ностике проктитов) |
фекалии |
Собирают 2 - 4 г (пример- но 3 ложечки) в специаль- ный одноразовый стериль- ный контейнер; если сразу нет возможности передать в лабораторию, добавляют 8 - 10 мл транспортиро- вочной среды для вирусов с целью предотвращения пробы от высыхания. Пригодна проба, собранная в забуференный физиологи- ческий раствор с глицери- ном (как на "дизгруппу") |
Адено-, энтеро-, (коксаки А, В; эхо-, энтеро-, полио- вирусы); реовирус |
Мочеполовая система: |
||
цервикаль- ный тампон |
Удаляют тампоном экзоцер- викальную слизь; вводят новый тампон не менее чем на 1 см в цервикальный канал, и вращают вокруг оси в течение 10 с; из- влекают тампон и помещают его в емкость с транспор- тировочной средой для сохранения вирусов |
Герпес-, цитомегаловирусы |
мазок из уретры |
Удаляют любой экссудат; вводят легкий, подвижный тампон (уретральный) на 2 - 3 см в уретру; осто- рожно 2 - 3 движениями вращают тампон вокруг оси и осторожно извлекают. Пациент до процедуры не должен мочиться в течение 1 ч |
|
сперма |
Собирают в стерильный одноразовый контейнер с завинчивающейся крышкой |
|
Кожные поражения: |
||
мазок на зонде- тампоне |
Обрабатывают везикулу фи- зиологическим раствором; разрушают везикулу и собирают жидкость зондом- тампоном; тем же самым зондом-тампоном собирают клетки основания везику- лы. При отсутствии вези- кул собирают клетки с основания очага, исполь- зуя тампон, предваритель- но смоченный стерильным физиологическим раство- ром. Помещают зонды-там- поны в емкость с транс- портировочной средой для сохранения вирусов |
Коксаки А вирус, эхо-, герпес-, покс-, герпес зостер-вирусы |
аспираты из везикул |
Обрабатывают очаг сте- рильным физиологическим раствором; аспирируют жидкость из везикулы иглой 26 - 27, присоеди- ненной к туберкулиновому шприцу, и немедленно про- мывают шприц 1 - 2 мл транспортировочной среды для сохранения вирусов |
Предпочтительно для вируса герпес зостер |
Поражения слизистых оболочек: |
||
мазок на зонде- тампоне |
Тампонируют очаг, двигая зонд-тампон назад и впе- ред по поверхности очага; помещают тампон в емкость с транспортировочной сре- дой для сохранения виру- сов |
Оральные: коксаки А, вирус герпеса. Аногенитальные: вирус герпеса |
Глаза: |
||
мазок с конъюнк- тивы |
Тампонируют нижнюю конъ- юнктиву с помощью подвиж- ного изящного тампона, предварительно смоченного стерильным физиологичес- ким раствором. Помещают зонд-тампон в пробирку с транспортировочной средой для сохранения вирусов |
Адено-, коксаки А, цитоме- гало-, энтеро(тип 70)-, герпес-, болезни Ньюкасла вирусы |
соскобы |
Помещают соскобы, полу- ченные тампоном-щеточкой, в емкость с вирусной транспортировочной средой |
|
Дыхательные пути: |
||
мазки со слизистой носа |
Вводят изящный подвижный зонд-тампон в ноздрю, вращают тампон и оставля- ют его в ноздре в покое на несколько секунд, чтобы абсорбировать |
Адено-, цитомегало-, энтеро-, герпес-, грипп-, кори-, парагрипп-, бешен- ства-, риносинсициальный-, краснухи-, герпес зостер вирусы |
|
секреты; помещают тампон в емкость с вирусной транспортировочной сре- дой. Для каждой ноздри используют разные тампо- ны. Оба тампона помещают в одну емкость со средой |
Особенно полезны для обна- ружения риновирусов |
мазки со слизистой носоглотки |
Вводят тонкий подвижный тампон через ноздрю в носоглотку и вращают его вокруг оси очень мягко несколько раз. Помещают тампон в емкость с транс- портировочной средой для вирусов |
|
мазки со слизистой ротоглотки |
Используют стерильный шпатель, чтобы прижать язык и не контаминировать зонд-тампон слюной. Соби- рают материал, поочередно обрабатывая тампоном пра- вую и левую миндалины и заднюю стенку глотки. Помещают тампон в емкость с транспортировочной сре- дой для сохранения виру- сов |
Мазки из ротоглотки исполь- зуют преимущественно для обнаружения вирусов гриппа, парагриппа, риносинсцити- ального, а также адено-, цитомегало-, энтеро-, кори-, бешенства, крас- нухи-, герпес, зостер вирусов |
Жидкости: |
||
бронхо- альвео- лярный лаваж |
Собирают 8 - 10 мл в сте- рильный одноразовый кон- тейнер с завинчивающейся крышкой |
Перечисленные выше |
носогло- точный аспират |
Используют приспособления для сбора слизи (отсосы), вводят через нос в носо- глотку катетер соответст- вующего размера; отсасы- вают материал во время удаления катетера. Разво- дят аспират 5 - 8 мл сре- ды для сохранения вирусов и переносят материал в стерильную пробирку (одноразовую или стеклян- ную) |
|
плевраль- ная |
Собирают не менее 2 мл жидкости в стерильный одноразовый контейнер или стерильную стеклянную пробирку |
Вирус косаки В |
Ткани: |
||
|
Помещают маленькие пробы (легочный биоптат, напри- мер) в емкость с вирусной транспортировочной средой для сохранения вирусов и предотвращения пробы от высыхания. Помещают боль- шие пробы (1 - 2 г, на- пример, при аутопсии) в стерильный одноразовый контейнер, в который до- бавляют 8 - 10 мл транс- портировочной среды для сохранения вирусов при высыхании пробы |
Из тканей могут быть выде- лены практически все пере- численные ранее виды пато- генных для человека вирусов |
Мозг: |
||
|
Изложено выше |
Арбовирусы, бешенства и другие вирусы, которые могут вызывать энцефалиты, включая вирус герпеса. Все вирусы, перечисленные ранее |
Другой материал: |
||
в зависи- мости от подозре- ваемого агента и патологи- ческих находок |
Изложено выше |
Для определения необходимы полные клинические данные, анамнез, оформленная исто- рия болезни, из которой можно получить необходимую информацию |
