- •1. Область применения
- •2. Общие положения
- •3. Общие требования к сбору проб биологического материала
- •4. Общие требования к доставке проб биоматериала
- •5. Пробы различных видов биоматериала и среды,
- •6. Правила и техника получения
- •6.1. Пробы крови
- •6.2. Пробы при инфекционно-воспалительных процессах
- •6.3. Пробы при инфекционно-воспалительных процессах глаз
- •6.4. Пробы при инфекционно-воспалительных процессах уха
- •6.5. Пробы при инфекционно-воспалительных процессах
- •6.6. Пробы при инфекционно-воспалительных процессах
- •6.7. Пробы диализата у больных, находящихся на постоянном
- •6.8. Пробы при инфекционно-воспалительных процессах
- •6.9. Пробы у пациентов, получающих в качестве медицинской
- •6.10. Пробы стерильных жидкостей тела (кроме крови,
- •6.11. Пробы при инфекциях кожи и подкожной клетчатки
- •6.12. Пробы из инфицированных глубоких ран, абсцессов,
- •6.13. Пробы при инфекциях в стоматологии (десны,
- •6.14. Пробы при инфекционно-воспалительных процессах костей
- •6.15. Пробы для определения обсемененности сосудистого
- •6.16. Пробы материала при аутопсии
- •7. Пробы биоматериалов для определения наличия анаэробов,
- •7.1. Пробы биоматериала для определения наличия анаэробов
- •7.2. Пробы биоматериала для определения наличия вирусов
- •7.3. Пробы биоматериала для определения наличия простейших
- •8. Пробы биоматериала
- •8.1. Общие положения
- •8.2. Иммуносерологическое обследование
- •8.3. Методы исследования, применяемые в иммуносерологии
- •8.4. Сбор и хранение образцов для пцр-диагностики
- •8.5. Сбор проб для диагностики сифилиса
- •9. Библиографические данные
6.2. Пробы при инфекционно-воспалительных процессах
центральной нервной системы (ЦНС)
6.2.1. Ликвор. В микробиологическую лабораторию на исследование отправляют 4,0 - 5,5 мл ликвора, полученного при люмбальной пункции из субарахноидального пространства между позвонками L3 - L4, L4 - L5 или L5 - S1, а также при пунктировании боковых желудочков мозга.
Сбор проб проводят медленным заполнением трех пробирок тремя порциями материала для исследования в лабораториях. Используют стерильные пробирки с плотно закрывающимися крышками (одноразовые с пробкой или стеклянные со стерильной резиновой пробкой).
Из трех пробирок с материалом, полученным при люмбальной пункции, всегда отправляют пробирку с самым мутным содержимым, как правило, это вторая пробирка в процессе сбора пробы.
При получении материала пункцией боковых желудочков мозга, свежевзятый ликвор из шприца, предварительно сняв иглу, вносят в стерильную пробирку над пламенем спиртовки, обжигают горлышко пробирки и пробку в пламени спиртовки (при работе со стеклянной пробиркой, заделанной ватно-марлевой или резиновой пробками), закрывают пробирку пробкой.
Во всех случаях подозрительных на менингит, помимо спинно-мозговой жидкости собирают материал из предполагаемых очагов инфекции: мазки из носоглотки, среднего уха, пробы крови, и вместе с ликвором отправляют в лабораторию. Хорошим способом длительного (до 48 ч) сохранения менингококка является взятие материала мазком зондом-тампоном и помещение его в пробирку с транспортировочной средой с активированным углем или без него.
Ликвор для микробиологического исследования немедленно отправляют в лабораторию на грелке для сохранения температуры 35 - 37 °С. При отсутствии такой возможности ликвор собирают в емкость с транспортировочной средой и оставляют в холодильнике (при температуре 4 - 8 °С) до утра, а затем доставляют в лабораторию.
При необходимости проведения вирусологических исследований пробы ликвора помещают в холодильник при температуре 2 - 8 °С или замораживают, или сохраняют их при комнатной температуре с использованием емкостей со специальной жидкой средой.
6.2.2. Материал из абсцессов мозга. Учитывая, что в 90% случаев в пробе растут анаэробы, аспирируют материал из очага и отправляют в лабораторию в емкости с анаэробной средой, разрешенной к применению для этих целей в Российской Федерации в установленном порядке, или в шприце, которым собирали пробу, предварительно сняв иглу и закрыв шприц стерильной резиновой пробкой.
Пробу доставляют немедленно после получения.
6.2.3. Биопсийный материал. Получают пробы во время операции, помещают в емкость с анаэробной средой или в стерильную пробирку с тиогликолевой средой, закрытую стерильной резиновой пробкой.
Материал отправляют в лабораторию немедленно.
6.3. Пробы при инфекционно-воспалительных процессах глаз
Большинство проб, получаемых из глаза, собирает врач-офтальмолог. Эти пробы следует сеять на питательные среды у постели больного или в процедурном кабинете, или в кабинете врача во время приема, и засеянный материал передавать в лабораторию для культивирования, выделения, идентификации и определения антибиотикочувствительности возбудителей. Пробы, взятые при использовании инвазивных и других агрессивных методов, собирают параллельно с мазком с конъюнктивы, который в таких случаях служит контролем.
Накануне, за 6 - 8 ч (ночь), отменяют все медикаменты и процедуры.
При наличии специфических клинических проявлений инфекционно-воспалительного процесса или подозрений, имеющихся у врача, обязательно до анестезии готовят мазки для определения хламидий и вирусов, и отправляют препараты в лабораторию. Для сохранения хламидий и вирусов собирают материал в емкости с транспортировочными средами.
Отделяемое собирают стерильной стеклянной палочкой или стерильным зондом-тампоном: двумя-тремя движениями проводят по слизистой оболочке нижней переходной складки, с края век; при язве - с роговицы (после обезболивания), при "уголковом конъюнктивите" - с уголков век.
Секрет из слезного мешка собирают стерильным зондом-тампоном после осторожного массажа.
Материал, взятый палочкой и/или зондом-тампоном, помещают в емкость с транспортировочной средой или в стерильную стеклянную пробирку с жидкой средой и доставляют в лабораторию, внимательно следя за тем, чтобы не замочить целлюлозную или ватно-марлевую пробку пробирки.
При использовании зондов-тампонов предпочтительнее пользоваться одноразовыми емкостями с транспортировочной средой или стерильными стеклянными пробирками с ватно-марлевыми пробками, наполненными стерильной средой.
Наиболее корректную информацию о возбудителе воспалительного процесса можно получить при микробиологическом анализе соскобов.
6.3.1. Конъюнктивит и блефароконъюнктивит. Накануне, за 6 - 8 ч (ночь), у больных в стационаре отменяют все медикаменты и процедуры.
Пробы с конъюнктивы собирают с помощью стерильного, предварительно увлажненного вискозного или из алгината кальция зонд-тампона, находящегося в одноразовом стерильном тубсере или стеклянной пробирке. Пробы из каждого глаза собирают отдельными тампонами двумя-тремя круговыми движениями по слизистой.
Тубсеры с мазками из каждого глаза маркируют соответственно "правый" и "левый" и немедленно отправляют в лабораторию.
Перед получением соскоба вводят 1 - 2 капли анестетика, например, пропаракаина гидрохлорида или другого, имеющегося и разрешенного к применению для этих целей в установленном порядке.
Двумя-тремя короткими резкими движениями в одном направлении с помощью специального стерильного шпателя собирают соскобы с конъюнктивы. При проведении манипуляции глаз должен быть открыт.
Внимательно следят за тем, чтобы при сборе пробы не касаться ресниц.
Готовят, по меньшей мере, по 2 мазка из каждого глаза, нанося материал на чистое обезжиренное предметное стекло круговыми движениями на площадь диаметром 1 см.
Фиксируют мазки в течение 5 мин. в 95%-м метиловом спирте, находящимся в специальной, плотно закрывающейся емкости.
Немедленно передают в лабораторию пробирки с зондами-тампонами и стекла с мазками.
6.3.2. Бактериальный кератит. Накануне, за 6 - 8 ч (ночь), у больных в стационаре отменяют все медикаменты и процедуры.
Получают 2 пробы с конъюнктивы, как описано в п. 6.3.1, т.к. результаты их посева могут быть полезны для определения источника контаминации роговицы (одну пробу используют при подозрении на наличие грибковой инфекции).
При подозрении на наличие вирусной инфекции конъюнктивальный экссудат и материал, полученный соскобом, помещают в специальную транспортировочную среду для вирусов.
Проводят обезболивание, как указано в п. 6.3.1.
Собирают 3 - 5 соскобов методом, описанным в п. 6.3.1.
Помещают собранный материал в маленькую (5 мл) стерильную одноразовую пробирку с завинчивающейся пробкой или стерильную стеклянную с резиновой пробкой, наполненную средой.
Готовят 2 - 3 мазка на предметном стекле, и после высыхания фиксируют их, как описано в п. 6.3.1.
Немедленно передают весь материал в лабораторию.
6.3.3. Бактериальный эндоофтальмит. Пробу жидкости стекловидного тела (1 - 2 мл) собирают путем тонкоигольной аспирации и получают образец при проведении витректомии.
Далее выполняют следующее:
- из шприца, удалив иглу, содержимое помещают в одноразовый стерильный контейнер с завинчивающейся крышкой или пробирку, плотно закрытую резиновой пробкой;
- пробу материала можно оставить в шприце, убрав воздух и удалив иглу, закрывают шприц стерильной резиновой пробкой;
- собирают пробу с конъюнктивы, как описано в п. 6.3.1;
- весь материал немедленно отправляют в лабораторию.
6.3.4. Пресептальный целлюлит. Обрабатывают кожу 70%-м этиловым спиртом и 1 - 2%-м раствором йода или йодоформом или другим имеющимся дезинфектантом, разрешенным к применению в установленном порядке.
При отсутствии открытой раны для сбора материала прокалывают верхнее или нижнее веко.
При наличии открытой раны собирают пробу гнойного материала шприцем с иглой.
Готовят мазки на предметном стекле, как описано в п. 6.3.1.
Переносят собранный материал в транспортировочную емкость со средами для анаэробов или, оставив в шприце, который, удалив из него воздух и сняв иглу, закрывают пробкой.
Собранный материал и мазки немедленно отправляют в лабораторию.
6.3.5. Орбитальный целлюлит. Собирают аспират из зоны по методике, изложенной ранее в п. 6.3.2.
Собирают пробу с конъюнктивы и готовят мазки на предметном стекле, как в п. 6.3.1.
Для доставки в лабораторию используют материалы, описанные в п. 6.3.3.
Собирают у пациента пробы крови по методике, изложенной в п. 6.1. Пробы крови, весь собранный материал передают в лабораторию.
6.3.6. Воспаление слезной железы (дакриоаденит).
Собирают гнойное содержимое, используя зонд-тампон, как в п. 6.3.1.
Не пользуются методом аспирации иглой, чтобы не нарушить целость слезной железы.
Зонд-тампон и предметные стекла с мазками передают в лабораторию.
6.3.7. Воспаление слезного мешка (дакриоцистит). Получают пробу с конъюнктивы, как в п. 6.3.1.
Массируют и надавливают на слезный мешок, чтобы получить пробу экссудата для посева и приготовления мазков или, используя другой метод, собирают экссудат шприцем с иглой.
Помещают собранную пробу экссудата в транспортировочные емкости, как это описано ранее, и доставляют в лабораторию.
6.3.8. Каналикулит. Прижимают внутреннюю часть века, чтобы получить гной.
Далее проводят работу по методикам, изложенным ранее в этом разделе.
При наличии в лечебно-профилактической организации специализированного отделения (клиники) все посевы производят у постели больного на питательные среды, полученные в лаборатории. Засеянный материал вместе с приготовленными мазками передают в лабораторию.
