54. Механизм терминации трансляции у про- и эукриот. Терминирующие

кодоны, белковые факторы терминации (RF1, RF2, RF3), гидролиз пептидил-

тРНК. Фактор RRF и диссоциация трансляционного комплекса.

Синтез белка терминируется тремя стоп-кодонами:

1. УАА – охра

2. УАГ – амбер-кодон (=янтарный)

3. УГА – опал.

У бактерий чаще используется УАА.

Терминирующие кодоны узнаются белковыми факторами - Релизинг факторами (RF) – бывают 1 и 2ого класса.

Стоп- кодоны распознаются белковыми факторами:

Последовательность событий при терминации трансляции:

Релиз фактор (RF) у бак больше чем у эукариот.

Схема терминации

1. Собственно терминация – снятие полипептидной цепочки с последней тРнк.

- Осуществляется RF1 или RF2 или же еRF1.RF узнает стоп-кодон, отсоединяет полипептид .

- присоед RRF и поступает в А-сайт (гидролиз ГТФдо ГДФ)

- ЕF-G- обеспечивает транслокацию рибосомы и вытеснение последней тРНК

2.Отсоединение RF-факторов (RF3 или еRF3).

3. Пост-терминация – отделение тРНК от мРНК и диссоциация рибосомы. У эукариот все это проделывает RF.

Сканируя цепь мРНК по триплетам и соответственно удлиняя полипептидную цепь, транслирующая рибосома доходит до конца кодирующей последовательности и встречается с одним из трех триплетов, не кодирующих аминокислоты и обозначаемых как стоп-кодоны, – UAG, UAA или UGA .

В Результате завершающей транслокации полипептидил-тРНК оказывается связанной с последним значащим триплетом в Р-участке рибосоме, а в А-участке устанавливается кодон терминации.

В клетке нет аминоацил-тРНК, способных комплементарно связываться с терминирующим кодоном, и потому А-участок не заполняется обычным акцепторным субстратом, каковым является аминоацил-тРНК. вступают специальные белки, называемые факторами терминации RF.

RF1 (или RF2), взаимодействует с кодоном терминации в А-участке, а другой, RF3, при содействии первого и с участием ГТФ – с большой субчастицей рибосомы и непосредственно с пептидилтрансферазным центром.

Результатом наведение гидролазной активности в рибосоме: пептидилтрансферазный центр рибосомы катализирует реакцию взаимодействия полипептидил-тРНК как донорного субстрата с молекулой воды как акцепторным субстратом. связь между синтезированным полипептидом (его С-концом) и тРНК гидролизуется и полипептид уже не удерживается в рибосоме и освобождается в раствор в виде готового белка.

Заключительным актом терминации : выход деацилированной тРНК из Р-участка и диссоциация рибосомы на субчастицы. Диссоциация спонтанна вследствие ослабления связи между двумя рибосомными субчастицами в отсутствие лигандов (пептидил-тРНК и аминоацил-тРНК.

После диссоциации терминировавшей рибосомы на субчастицы малая субчастица может задержаться и в случае полицистронных мРНК у прокариот проскользнуть по цепи мРНК до начала следующей кодирующей последовательности и инициировать новую трансляцию (реинициация). Так как малая субчастица до инициации слабо удерживается на мРНК, то, если ей нечего реинициировать на этой же цепи мРНК, она скоро соскочит с нее и окажется среди пула свободных субчастиц цитоплазмы, готовых к инициации трансляции других мРНК.