Ход работы

Определение группы крови производят при температуре 15-20^◦С.

1. На чистые предметные стекла в обозначенные участки наносят по капле сыворотки Ι, IΙ, IΙI групп двух серий (всего шесть капель).

2. В каждую каплю сыворотки с помощью стеклянных палочек или разных углов чистых предметных стекол вносят небольшое количество крови и размешивают. Соотношение объемов крови и сыворотки должно составлять примерно 1:10.

3. Покачивают стекла в течение пяти минут.

4. По мере наступления агглютинации, но не раньше, чем через три минуты, в каждую смесь добавляют по капле изотонического раствора хлористого натрия для предупреждения образования «монетных столбиков» из эритроцитов.

5. Определяют наличие агглютинации в каждой капле. При отсутствии агглютинации во всех каплях кровь относят к Ι группе. При отсутствии агглютинации в сыворотке IΙ группы и наличии ее в сыворотках I и ΙII групп кровь относят ко ΙI группе. При отсутствии агглютинации в сыворотке IΙI группы и наличии ее в сыворотках I и II групп кровь относится к III группе. При наличии агглютинации во всех сыворотках кровь можно отнести к IV группе. В этом случае для исключения неспецифической агглютинабельности исследуемых эритроцитов необходимо провести дополнительное исследование со стандартной сывороткой труппы АВ (IV). Отсутствие агглютинации в этой капле позволит считать реакцию специфической и отнести исследуемую кровь к IV группе.

Возможные ошибки при проведении работы

1. Оценка реакции как отрицательной при фактическом наличии агглютинации. Это может быть обусловлено:

а) поздней или слабо выраженной агглютинацией в связи с малой активностью стандартных сывороток;

б) нарушением соотношения 1:10 при взятии большого количества крови;

в) наличием температуры воздуха, большей, чем 25^◦С, в таких условиях исследование проводят при охлаждении стекла.

2. Оценка реакции как положительной при фактическом отсутствии специфической агглютинации. Это может быть обусловлено:

а) образованием «монетных столбиков»;

б) наличием панагглютинации, которая развивается при температуре 15^◦С; для ее исключения следует повторить определение при более высокой температуре;

в) подсыханием сыворотки и образованием по краям капель «зернистости», принимаемой за агглютинацию; это может быть в случаях, когда чтение результатов производят более, чем через пять минут.

В заключении в протокол следует записать, к какой группе относится исследуемая кровь, и тщательно обосновать полученный результат. Для этого необходимо последовательно сделать выводы об отсутствии или наличии агглютиногенов А и В в исследуемой крови по развитию или отсутствию агглютинации в каждой капле сыворотки, а затем подвести общий итог и сделать заключение о группе исследуемой крови, исходя из её антигенного состава. Следует указать, в каких случаях исследуемая кровь может быть использована в качестве донорской.

Рекомендуемая дополнительная литература

1. Атлас по нормальной физиологии: Пособие для студентов медицинских и биологических спецециальностей вузов / Под ред. Н.А.Агаджаняна. – М.: Высшая школа, 1987.

2. Воробьев А.И. Руководство по гематологии в 3-х томах. – М., 2003.

3. Гольдберг Е.Д. и др. Динамическая теория кроветворения. // Бюлл.эксп.биол.мед. 1999. № 5. С. 484-494.

4. Физиологические системы организма человека, основные показатели (справочное пособие) / Под ред. Г.И. Козинца – Триада-Х, 2000.

5. Физиология человека. Под ред. Р.Шмидта, Г.Тевса. – В 3-х томах. Издание 2-е. – М.: Мир, 1996. Том II, Гл. 18.

6. Фундаментальная и клиническая физиология. Перев. с англ. и нем. Под ред. А.Камкина и А.Каменского. М.: Академия, 2004. Гл IХ.

7. Хаитов Р.М. Физиология иммунной системы. // Рос. физиол. журн. 2000. № 3. С. 252-267.