Самостоятельная работа студентов

Для самостоятельной работы необходимы: клиническая центрифуга, торсионные весы, водяная баня, секундомер, медицинский жгут, штатив с градуированными и неградуированными пробирками, пипетки градуированные и от прибора Панченкова, шприц однократного применения, стерильные скарификаторы, стеклянные палочки, вата, фильтровальная бумага; реактивы: 0,85-0,9 % раствор NaCl, 0,277 и 0,55% растворы CaCl₂, 5% раствор цитрата натрия, суспензия тромбопластина, раствор тромбина (активность 15-18 с), касторовое или вазелиновое масло, спирт, эфир.

Работа 1. Определение времени свёртывания крови по Ли-Уайту

Время свёртывания венозной крови оценивает общую коагуляционную активность цельной крови по скорости образования в ней сгустка. Отсчёт времени производится от момента попадания первой капли в стеклянную пробирку до полного свёртывания крови. Норма  5-10 мин. Удлинение этого показателя наблюдается при глубоком дефиците факторов свёртывания крови, тромбоцитопении и тромбоцитопатии (дисфункции тромбоцитов), передозировке антикоагулянтов. Укорочение теста свидетельствует о гиперкоагулемии при ДВС-синдроме, тромбозах.

Ход работы. Работа выполняется под контролем преподавателя. Инъекционной иглой из вены производят забор крови в пробирку (5-6 мл). Секундомер включают при попадании в пробирку первых капель крови. Каждые 30 с наклоняют пробирку под углом 45 градусов до тех пор, пока кровь не перестанет растекаться. Время полного свёртывания отмечают тогда, когда пробирка может быть перевёрнута.

Рекомендации к оформлению работы. В результатах укажите время свёртывания. В анализе сравните его с нормальным показателем.

Работа 2. Получение стабилизированной плазмы для проведения коагуляционных проб (в работах 3, 4, 5, 6)

Ход работы. Забор крови производят в градуированную пробирку, предварительно заполненную определённым объёмом 5% р-ра цитрата натрия. Соотношение объемов крови и цитрата должно быть 9:1. После забора крови пробирку переворачивают на пальце в целях тщательного перемешивания крови и консерванта. Затем центрифугируют 15 мин при 1500 об/мин. Плазму с помощью пипетки перемещают в другую пробирку.

Работа 3. Определение времени рекальцификации плазмы

Время рекальцификации плазмы – это время свертывания цитратной плазмы при t 37^оС после добавления к ней хлорида кальция. Этот показатель в отличие от времени свёртывания венозной крови более тонко выявляет нарушения во "внутренней" коагуляционной системе благодаря отсутствию в плазме форменных элементов. Норма  60-120 с. Время более 120 с  показатель дефицита коагуляционных факторов (кроме XIII), тромбоцитопении, гепаринизации. Время менее 60 с отражает состояние гиперкоагуляции (тромбозы, ДВС-синдром, гипервязкость, эритроцитоз).

Ход работы. В пробирку набирают 0,1 мл 0,9% NaCl + 0,2 мл 0,277% р-ра CaCl₂. Смесь выдерживают в бане 60 с, затем добавляют 0,1 мл плазмы, одновременно включая секундомер. Производя наклон пробирки, не извлекая её из бани, каждые 5 с определяют время образования фибринового сгустка. Для точности работу выполняют не менее 3-х раз.

Рекомендации к оформлению работы. В результатах укажите полученные данные, определите средний показатель, а в анализе сравните их с нормальными величинами.