Работа 4. Определение протромбинового времени

Протромбиновое время по Квику  тест, характеризующий внешний механизм свёртывания крови. В основе этого теста лежит определение времени рекальцификации цитратной плазмы в присутствии избытка тканевого тромбопластина, то есть воспроизводится внешний путь свёртывания, и, таким образом, исключается влияние факторов XII, XI, IX и VIII на скорость образования фибрина. Этот тест характеризует суммарную активность факторов II, V, VII, X и в меньшей степени фибриногена. Норма  15-20 с. Протромбиновое время удлиняется при лечении больных гепарином и кумаринами (в последнем случае за счёт снижения синтеза К-витамин-зависимых факторов II, VII, X). Укорочение этого показателя характерно для тромбинемии при ДВС-синдроме.

Ход работы. В пробирку набирают 0,1 мл плазмы, добавляют 0,1 мл суспензии тромбопластина (с активностью 15-20 с) и 0,1 мл 0,9% раствора NaCl,инкубируют в бане при t=36,7-37^оС 60 с и добавляют 0,2 мл 0,277% р-ра СаСl₂, включая секундомер. Фиксируют время образования сгустка. Определение проводят 3 раза.

Рекомендации к оформлению работы. В результате укажите полученные данные и среднюю величину, а в анализе сравните их с нормальными показателями.

Работа 5. Определение тромбинового времени

Тромбиновое время  это время свёртывания цитратной плазмы после добавления к ней раствора тромбина слабой концентрации. Оно позволяет оценить конечную фазу свёртывания крови. Норма  15-18 с. В основном оно зависит от концентрации фибриногена и антикоагулятной активности плазмы. Поэтому оно удлиняется при повышении антикоагулятной активности плазмы и уровня продуктов деградации фибриногена. Укорочение этого времени свидетельствует о гиперфибриногенемии, парапротеинемии.

Ход работы. В пробирку набирают 0,1 мл плазмы и 0,1 мл 0,9% р-ра NaCl, инкубируют 60 с. Затем добавляют тромбин (активность 15-18 с) и включают секундомер. Фиксируют время образования сгустка. Определение проводят 3 раза.

Рекомендации к оформлению работы. В результатах укажите полученные данные и средний показатель, в анализе сравните их с нормальными показателями.

Работа 6. Определение уровня фибриногена по Рутберг

Его можно определить путём взвешивания: цитратная плазма рекальцифицируется, полученный сгусток высушивается с помощью фильтровальной бумаги и взвешивается. Норма  2-4 г/л. Повышение содержания фибриногена отмечается при различных состояниях, сопровождающихся гиперкоагулемией (инфекционно-воспалительном, иммуннокомплексном васкулите, тканевом распаде, опухолях, травмах). Снижение уровня фибриногена чаще всего отражает комплексное нарушение гемостаза, врождённый его дефицит.

Ход работы. В пробирку наливают 1 мл плазмы и добавляют 1 мл 0,555% р-ра CaCl₂. Ставят в баню на 30 мин. Сгусток переносят на фильтровальную бумагу и подсушивают другим фильтром до воздухоносного состояния, т. е. до тех пор, пока на фильтре не останется влажного пятна. Затем сухой фибрин взвешивают на торсионных весах и вес сгустка умножают на экспериментально установленный коэффициент 22,2.

Рекомендации к оформлению работы. В результате укажите полученные данные, а в анализе сравните, соответствуют ли они нормальным показателям.