Работа 36. Влияние высокой температуры на проницаемость цитоплазмы.

Материалы и оборудование: I) корнеплод красной свеклы; 2) скаль­пель; 3) пинцет; 4) термометр; 5) фотоэлектроколориметр; 6) электро­плитка; 7) песочные часы на 1 мин; 8) штатив с пробирками (7 шт.); 9) фарфоровая чашка; 10) стаканы химические (2 шт.); 11) колба с ди­стиллированной водой; 12) пипетка на 10 мл; 13) карандаш по стеклу;

13) салфетка.

При нагревании растений до температур выше опти­мальной в клетках нарушается обмен веществ: происходит разобщение дыхания и фосфорилирования, прекращается синтез белков и усиливается их распад, накапливаются ядовитые вещества. При более высоких температурах резко повышается проницаемость цитоплазматических мембран, а затем наступает коагуляция белков и отмирание клеток.

Ход работы. Вырезать из очищенного корнеплода красной свеклы 7 прямоугольных кусочков размером 3 х 10 х 40 мм, поместить их в фарфоровую чашку, многократно промыть водопроводной водой до полного обесцвечивания промывных вод и оставить в чашке под слоем воды.

Нагреть в стакане воду до 75 С, захватить пинцетом один кусочек свеклы и погрузить его ровно на 1 мин в на­гретую воду, а затем перенести в пробирку с 10 мл холод­ной дистиллированной воды, сделав на ней надпись каран­дашом по стеклу. Добавлением холодной, воды охлаждать содержимое стакана до 70—65—60—55—50 и 45 °С и при каждой температуре проделывать то же, что описано выше: выдержать очередной кусочек в стакане в течение 1 мин и перенести в пробирку с 10 мл дистиллированной воды.

Встряхивать пробирки в течение 15 мин и определить интенсивность окраски жидкости на ФЭКе при зеленом светофильтре (против дистиллированной воды). Результаты записать в таблицу.

Номер пробирки	Температура,	Оптическая плотность
1	75
2	70
3	65
4	60
5	55
6	50
7	45

Вычертить кривую выделения антоциана из клетки, откладывая по оси абсцисс температуру, а по оси ординат - оптическую плотность. Найти летальную температуру - наименьшую температуру, вызывающую наибольший выход пигмента из клеток.

Работа 37. Определение жаростойкости растений (по ф. Ф. Мацкову).

Материалы и оборудование: I) свежие листья каких-либо растений;

2) 0, 2 н. HCl; 3) водяная баня; 4) термометр; 5) пинцет; 6) чашки Петри (5 шт.); 7) стакан с водой; 8) карандаш по стеклу.

Если подвергнуть лист действию высокой температуры, а затем погрузить в слабый раствор соляной кислоты, то поврежденные и мертвые клетки побуреют вследствие сво­бодного проникновения в них кислоты, которая вызовет превращение хлорофилла в феофитин, тогда как неповреж­денные клетки останутся зелеными. У растений с кислым клеточным соком феофитинизация может произойти и без обработки соляной кислотой, так как при нарушении полу-проницаемости тонопласта органические кислоты проникают из клеточного сока в цитоплазму и вытесняют магний из молекулы хлорофилла.

Ход работы. Нагреть водяную баню до 40 °С, погрузить в нее по 5 листьев исследуемых растений и выдержать листья в воде в течение 30 мин, поддерживая температуру. на уровне 40 °С. Затем взять первую пробу: вынуть по од-ному листу каждого вида растений и поместить их в чашку Петри с холодной водой (на чашке необходимо сделать соответствующую надпись). Поднять температуру в водяной бане до 50 °С и через 10 мин после этого извлечь из бани, еще по одному листу и перенести их в

новую чашку с холод­ной водой. Постепенно довести температуру до 80 'С, беря пробы через каждые 10 мин при повышении температуры на 10 °С.

Заменить воду в чашках 0, 2 н. соляной кислотой и через 20 мин учесть степень повреждения листа по количеству появившихся бурых пятен. Результаты записать в таблицу, обозначив отсутствие побурения знаком "—", слабое побурение—«+», побурение более 50% площади листа— «++» и сплошное побурение — «+++»

Объект	Степень повреждения листьев при t, С
	40	50	60	70	80

Сделать выводы о степени жаростойкости исследованных растений.