Работа 38. Определение температурного порога коагуляции цитоплазмы (по п. А. Генкелю).

Материалы и оборудование: 1) свежие листья различных расте­ний; 2) 1М раствор сахарозы в капельнице; 3) 0, 02%-ный раствор нейтрального красного; 4) стаканы химические большие (б шт.); 5) про­бирки (5 шт); 6) большая колба; 7) электроплитка или газовая го­релка с треножником; 8) термометр; 9) лезвие бритвы; 10) препаровальная игла, 11) кисточка; 12) микроскоп; 13) предметные и покровные стекла; 14) кусочки фильтровальной бумаги; 15) карандаш по стеклу.

Клетки разных растений имеют неодинаковую жаростой­кость. Температура, при которой в течение 10 мин пол­ностью коагулируют белки цитоплазмы, считается условной границей жаростойкости растении. Гибель клеток устанав­ливается по потере ими способности плазмолизироваться.

Ход работы. Приготовить 12 срезов эпидермиса листа исследуемого растения и поместить по два среза в пробирки, в которые налито небольшое количество водопроводной воды.

Нагреть в большой колбе воду. Смешивая горячую воду холодной, приготовить в шести химических стаканах водяные бани с температурой

48, 50, 52, 54, 56 и 58 °С (сделать на стаканах надписи карандашом по стеклу). Одновременно погрузить в водяные бани пробирки со срезами, поддерживая установленною температуру путем осторожного подливания в стаканы горячей воды. Через 10 мин извлечь срезы кисточкой из пробирок и перенести на предметные стекла, снабженные соответствующими надписями. Если клетки не содержат пигментов, следует окрасить их, выдержать в растворе нейтрального красного в течение 5—10 мин, затем удалить раствор краски фильтровальной бумагой, нанести на срезы по капле 1М раствора сахарозы, закрыть покровными стеклами и через 15—20 мин рассмотреть в микроскоп.

Растение	Температура. °С
	48	50	52	64	56	58

Записать результаты в таблицу, обозначая знаком “ + “ плазмолиз и знаком «—» отсутствие плазмолиза. Каждый студент исследует один объект, а затем данные, полученные всей группой, записывают в таблицу.

Сделать выводы, сопоставляя температурный порог коагуляции белков цитоплазмы разных растений.

Литература

Баславская С.С., Бородулина Ф.З., Гавриленко В.Ф. и др. Малый практикум по физиологии растений. - М., 1973, 84 с.

Викторов Д.П. Малый практикум по физиологии растений. - М. : Высшая школа, 1983, 135 с.

Гродзинский А.М., Гродзинский Д.М. Краткий справочник по физиологии растений. – Киев : Навуковая думка, 1973.

Еремин В.М. Методические указания к выполнению лабораторных работ по физиологии растений. – Воронеж : изд-во ВГУ, 1984, 41 с.

Полевой В.В. Физиология растений. – М. : Высшая школа, 1989.

Якушкина Н.И. Физиология растений. – М. : Просвещение, 1993.