Задача «Методы клинических исследований»

В лабораторию доставлена моча грудного младенца на общий анализ в количестве 30 мл. Молодая неопытная лаборантка провела все исследования за исключением относительной плотности.

Задания:

1. Назовите способ определения относительной плотности мочи, когда мочи мало.

2. Перечислите случаи, когда вносятся поправки в значение относительной плотности мочи.

3. Назовите термины, обозначающие повышение и понижение относительной плот­ности мочи.

4. Перечислите правила хранения урометра в лаборатории.

Эталон к задаче:

1. Если мочи мало, то ее разводят в 2-3 раза дистиллированной водой, а потом полученную цифру относительной плотности умножают на степень разведения.

2. Урометры откалиброваны для температуры окружающей среды равной 15°С. При повышении температуры на каждые 3°С прибавляют 0,001, а при понижении – вычитают 0,001.

Если в моче имеется белок в количестве, превышающем 6-7 г/л, то вносят поправку: вычитают из относительной плотности мочи 0,00026 на каждый 1 г/л белка.

При наличии глюкозы – вычитают 0,004 на каждый 1% глюкозы.

3. Повышение относительной плотности выше 1,030 – гиперстенурия; понижение ниже 1,010 – гипостенурия.

4. Закончив определение относительной плотности, урометр опускают в стаканчик с дезинфицирующим раствором, дно которого выложено ватой или бинтом. Вне работы урометры хранятся в специальных картонных футлярах цилиндрической формы.

Задача

«Микробиология с основами эпидемиологии и методами исследования»

В роддоме зарегистрировано несколько случаев гнойничковых заболеваний кожи у новорожденных.

Задания:

1. Расскажите, какой контингент подлежит обследованию, и какой биоматериал необходимо взять для исследования.

2. Объясните, на какие питательные среды необходимо сделать первичный посев.

3. Перечислите признаки патогенности стафилококка на использованных средах. Как установить источник инфекции.

4. Перечислите правила и способы обеззараживания отработанного материала.

Эталон к задаче:

1. В роддоме обследуют детей, обслуживающий персонал, рожениц. Берутсмывы с пеленальных столов, исследуют, перевязочный материал, белье. У новорожденных берут гнойное отделяемое из пораженного места стерильным тампоном. У обслуживающего персонала и рожениц отделяемое слизистых оболочек носа и зева берут также стерильным тампоном.

2. Первичный посев делают на ЖСА, кровяной агар и среду Эндо.

3. На ЖСА определяют лецитовителазную активность (по наличию «радужного венчика» и вокруг колонии) и гемолитическую активность на кровяном агаре по наличию а и в – гемолиза. Источник инфекции устанавливается по фаготипированию.

4. Отработанный материал (тампоны, посевы и др.) заливают 3% раствором аламинола или «Мистраль» на 60 минут с последующим автоклавированием.

Эталон ответов к билету № 27

Задача

«Основы биохимии и методами клинико-биохимических исследований»

Для определения общего кальция лаборант использовал многоразовые стеклянные пробирки общего назначения, предварительно замоченные в моющем растворе и промытые проточной водой из крана. После добавления реагентов все пробы интенсивно окрасились, в том числе, контрольная. Экстинкция опытной пробы была с отрицательным результатом, экстинкция стандартной пробы - очень маленькая.

Задания:

1. Дайте общую характеристику кальция и назовите пути его использования в организме.

2. Расскажите принцип определения общего кальция.

3. Расскажите правила подготовки лабораторных пробирок для исследования кальция.

4. Объясните, почему экстинкция стандартной пробы была очень маленькой, а экстинкция опытной пробы была отрицательной.

Эталон ответа задачи:

1. Общий кальций состоит из ионизированного кальция, кальция связанного с гидрокарбонатом и цитратом, и кальция, связанного с белками. Кальций входит в состав костной ткани, участвует в свёртывании крови, регулирует активность многих ферментов, участвует в мышечном сокращении, выполняет роль вторичного мессенджера в действии гормонов на клетки.

2. кальций в щелочной среде образует окрашенный комплекс с о-крезолфталеин комплексоном. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации кальция в пробе.

3. Пробирки для исследования кальция моют обычным способом, затем кипятят несколько минут в слабом растворе соляной кислоты для удаления следов кальция со стенок пробирок и ополаскивают деионизированной водой. Лучше всего для определения кальция использовать одноразовые пластиковые пробирки или пробирки, которые предназначены только для определения кальция.

4. В результате неправильной обработки пробирок на них остались следы кальция, которые дали интенсивную окраску контроля. Так как контрольный раствор является раствором сравнения, то разница между стандартной пробой оказалась очень маленькой, а экстинкция опыта имела даже отрицательный результат.

Задача

«Методы клинических исследований»

В лабораторию поступила моча пациента с запахом ацетона. Качественная проба на глюкозу оказалась положительной.

Задания:

1. Назовите дополнительное исследование мочи, которое необходимо провести, не дожидаясь назначения врача?

2. Перечислите методы определения кетоновых тел.

3. Дайте ответ, может ли быть кетонурия без глюкозурии.

4. Перечислите возможные причины кетонурии.

Эталон к задаче:

1. При наличии запаха ацетона в моче, при глюкозурии лаборант обязан провести определение кетоновых тел в моче без назначения врача. В обычных случаях это исследование относится к дополнительным пробам и выполняется по специальному назначению врача.

2. Для определения кетоновых тел в моче применяются:

а) Проба Ланге: к 4-6 мл мочи прибавляют 8-10 капель ледяной уксусной кислоты и несколько капель свежеприготовленного насыщенного раствора нитропруссида натрия. На полученную смесь осторожно наслаивают 20% раствор аммиака. Пробу считают положительной, если в течение 3 мин на границе между аммиаком и остальной смеси образуется красно-фиолетовое кольцо.

б) экспресс-метод с помощью диагностических таблеток или тест-полосок, в основе которого лежит проба Лестраде.

3. Да, кетонурия может быть и без глюкозурии.

4. Причиной кетонурии может быть сахарный диабет, заболевания щитовидной железы, черепно-мозговая травма, токсическая диспепсия, длительное голодание, безуглеводная диета, ацетонемическая рвота у детей.

Задача

«Микробиология с основами эпидемиологии и методами исследования»

В детском саду зарегистрировано несколько случаев заболеваний с признаками гастроэнтерита. Врач поставил диагноз «Пищевая токсикоинфекция» и направил детей на госпитализацию.

Задания:

1. Расскажите, какой биоматериал следует взять на исследование.

2. Поясните, какие питательные среды следует взять на первичный посев.

3. Перечислите питательные среды, используемые для выделения чистой культуры.

4. Дайте ответ, как обеззаразить отработанный материал.

Эталон к задаче:

1. Для исследования необходимо взять испражнения. По возможности рвотные массы и остатки пищи.

2. Биоматериал засевают на среду обогащения (на селенитовый бульон), на среды Эндо, Плоскирева, висмут – сульфитный агар.

3. Для выделения чистой культуры делают пересев со среды обогащения на ДДС; а кроме того изучают культуральные свойства на плотных питательных средах взятых для исследования, с последующей идентификацией возбудителя.

4. Отработанный материал (тампоны, посевы и др.) заливают 3% раствором хлорамина на 60 минут с последующим автоклавированием.

Эталон ответов к билету №28.

Задача

«Основы биохимии и методами клинико-диагностических исследований»

Пациенту с подозрением на атеросклероз провели исследования липидного спектра. Показатели были следующие: Общий холестерин – 5,9 ммоль/л, β-липопротеины определить не удалось, так как сыворотка оказалась хилёзной, триглицериды – 6,2 ммол/л, ХС-ЛПВП – 0,9 ммоль/л.

Задания:

1. Расскажите правила взятия биоматериала для исследования липидного спектра.

2. Объясните принцип энзиматического метода определения триглицеридов.

3. Оцените результаты исследований, применяя терминологию.

4. Сделайте вывод, можно ли рассчитать ХС-ЛПНП, исходя из данных, или надо проводить электрофорез липопротеинов, чтобы оценить картину липидного спектра.

Эталон ответа задачи:

1. Кровь для исследования берут утром, натощак, после 12 – 14 часового голодания. До исследования пациент в течение 2-х недель должен придерживаться своей обычной диеты. Пробы крови берут в одном положении пациента (лучше сидя). Работать желательно с одним видом биоматериала (либо сывороткой, либо плазмой). В качестве антикоагулянта лучше использовать ЭДТА. Хранить пробы в холодильнике (при + 4⁰ С) можно не более 5 суток. На уровень показателей влияет приём алкоголя, диета, гепарин. Измерению мешает гемолиз и эктеричность сыворотки (плазмы). Однократное измерение непоказательно в виду значительных индивидуальных колебаний.

2. а). Триглицериды под действием липазы гидролизуются до глицерина и жирных кислот. б) Глицерин взаимодействует с АТФ при каталитическом участии глицерокиназы с образованием глицерил-3-фосфата и АДФ. в) Глицерил-3-фосфат окисляется кислородом воздуха при участии глюицерофосфатоксидазы с образованием диоксиацетонфосфата и перекиси водорода. г). Перекись водорода окисляет аминосодержащий краситель в присутствии фенольного реагента при участии пероксидазы с образованием окрашенного продукта - хинонимина. Концентрация хинонимина в пробе прямо пропорциональна концентрации триглицеридов.

3. Незначительная гиперхолестеринемия, гипертриглицеридемия, гипохолестеринемия- ЛПВП.

4. Нельзя, так как формула расчёта ХС-ЛПВП годится только лишь, если триглицериды не превышают 4,5 ммоль/л. Пациенту надо проделать электрофорез липопротеинов, выделить каждую фракцию отдельно и в каждой фракции определить ХС.

Задача

«Методы клинических исследований»

В лабораторию из отделения терапии доставлено 8 банок с мочой на исследование по Зимницкому. При анализе обнаружено резкое снижение показателей относительной плотности в дневных порциях, сочетающееся с полиурией. При расспросе пациента врач выяснил, что он в течение дня ел в большом количестве арбуз.

Задания:

1. Дайте оценку результату.

2. Расскажите, о чем необходимо было предупредить пациента накануне сбора мочи по Зимницкому.

3. Назовите соотношение дневного и ночного диуреза в норме.

4. Назовите термин, которым называется превышение ночного диуреза над дневным.

Эталон к задаче:

1. Данный результат не поддается оценке, так как моча была собрана неправильно.

2. Накануне сбора мочи по Зимницкому пациента необходимо предупредить, что он должен соблюдать обычный питьевой режим, не превышающий 1,5 л жидкости в день и обычный пищевой режим.

3. В норме дневной диурез в 2-3 раза превышает ночной.

4. Превышение ночного диуреза называется никтурией. Никтурия может являться следствием снижения концентрационной способности почек, т.е. развития хронической почечной недостаточности, а также следствием сердечной недостаточности.

Задача

«Микробиология с основами эпидемиологии и методами исследования»

Из испражнений больного выделена чистая культура микроорганизма со следующими свойствами: на среде Эндо – бесцветные колонии, на среде висмут-сульфит агаре – колонии черные.

Задания:

1. Поясните, можно ли на основании изучения культуральных свойств судить о предполагаемом возбудителе и обоснуйте свой ответ.

2. Расскажите, какие питательные среды используются для определения биохимических свойств выделенных культур.

3. Объясните, как провести идентификацию выделенной культуры микроорганизма.

4. Дайте ответ, как обеззаразить отработанный материал.

Эталон к задаче:

1. На основании культуральных свойств судить о возбудителе нельзя, так как бесцветные колонии на среде Эндо могут быть сальмонеллами, иерсиниями или шигеллами.

2. Для определения биохимических свойств выделенной чистой культуры необходимо сделать пересев на среду Рессель или «пестрый» ряд Гисса. Если на среде Рессель лактоза не расщепилась, а глюкоза расщепилась до кислоты и газа, это предположительно говорит о сальмонеллезной природе заболевания.

3. Идентификацию выделенной культуры нужно провести путем постановки серологической реакции с поливалентными и типовыми сыворотками. Вид микроорганизма определяют по таблице Кауфмана-Уайта.

4. Отработанный материал (тампоны, посевы и др.) заливают 3% раствором аламинола или «Мистраль» на 60 минут с последующим автоклавированием.

Эталон ответов к билету № 29

Задача

«Основы биохимии и методами клинико-биохимических исследований»

В лабораторию была доставлена моча новорождённого с предположительным диагнозом фенилкетонурия. Методом распределительной радиальной хроматографии на бумаге в моче была выявлена аминокислота, наличие которой подтверждает предполагаемый диагноз.

Задания:

1. Назовите аминокислоту, которая появляется в моче при фенилкетонурии.

2. Объясните принцип распределительной радиальной хроматографии на бумаге.

3. Расскажите, как проводилась идентификация аминокислоты методом хроматографии.

4. Поясните, что такое коэффициент распределения.

Эталон ответа:

1. При фенилкетонурии в моче накапливается аминокислота фенилаланин.

2. При распределительной хроматографии разделение происходит вследствие различной растворимости определяемых веществ в двух несмешивающихся фазах. Для этого необходима система, состоящая из неподвижной фазы (носителя) и подвижной фазы (растворителя). На неподвижную фазу наносится смесь веществ, и через неё пропускается ток растворителя. Чем лучше данное вещество растворимо в подвижной фазе, тем дальше оно продвинется по направлению тока растворителя.

3. В контрольный сектор хроматографической полоски наносят аминокислоту - фенилаланин, а в опытный - мочу больного ребёнка. Проводят хроматографию, Хроматограммы фиксируют, окрашивают, затем рассчитывают коэффициенты распределения аминокислот в контрольном и опытном секторах. Если коэффициенты распределения одинаковые, то в опытном секторе находится та же аминокислота, что и в контрольном.

4. Коэффициент распределения (Rf) – это отношение пути, пройденного аминокислотой к пути, пройденному растворителем. Каждая аминокислота имеет свой коэффициент распределения в данном растворителе