Самостійна аудиторна робота

1. Виконати реакції експрес-аналізу гострих інтоксикацій кодеїном. Заповнити таблицю.

Речовина та методика проведення аналізу	Спостереження	Хімізм реакцій	Хіміко-токсикологічна оцінка
Кодеїн До ділильної воронки вносять 5 мл сечі, підлужнюють розчином аміаку до рН = 10, додають 5 мл хлороформу і збовтують протягом 5 хв. Хлороформний витяг відокремлюють від водної фази і фільтрую через безводий сульфат натрію і випаровують насухо на водяній бані. Сухий залишок використовують для виявлення кодеїну за допомогою реакції з реактивом Маркі. Краплю свіжоприготованого реактиву Маркі (1 крапля формаліну в 1 мл концентрованої кислоти сульфатної) додають до отриманого сухого залишку.

2.Озгайомитись з методикою виділення та виявлення опіатів та опіоїдів у сечі та крові.

Опіати екстрагують з сечі та крові сумішшю хлороформ-ізопропанол (9:1) pH = 9-10 за схемою 1, кров попередньо центрифугують і досліджують плазму або сироватку. Для попереднього виявлення опіатів використовують осадові реакції, барвні та мікрокристалоскопічні (табл..1)

Схема 1 Табл.1

Зразок (5-20мл)

+ HCL до рН 2-3

екстракція ефіром

Водна фаза

Органічна фаза

центрифугування

фільтрування крізь підлужування розчином

б/в сульфат натрію аміаку до рН 9-10

упарювання екстракція хлороформом

центрифугування

Водна фаза речовини кислого та нейтрального характеру

Органічна фаза речовини кислого та нейтрального характеру

Залишок 1 – речовини кислого та нейтрального характеру

фільрування крізь б/в

сульфат натрію

Залишок 2 – речовини основного та слабо основного характеру

центрифугування упарювання

3. Ознайомитись з проведенням тшх-скрінінгу опіатів та опіоїдів.

Для проведення ТШХ скрінінгу опіатів використовують загальні системи розчинників і приватні

Загальні

ТА: метанол - 25% раствор аммиака (100:1,5)

ТВ: циклогексан - толуол - диэтиламин (75:15:10)

ТС: хлороформ — метанол (9:1)

ТЕ; этилаиетат - этанол - 25% раствор аммиака (85-10 5)

TL: ацетон

ТАЕ: метанол

ТАК: метанол -бутанол (60:40)

TAJ: хлороформ - этанол (90:10)

У таблицях наведені Rf деяких опіатів та опіоїдів у різних системах розчинників.

4. Ознайомитись з методикою проведення імуноферментного аналізу на опіати. Імуноферментний метод аналізу на опіати

№ п/п	Етапи імуноферментного аналізу	Схема перетворення
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.	Адсорбція модифікованого МБ (пов'язаного з білком) на планшеті Промивання планшету Внесення досліджуваних зразків сечі, які містять морфін (М) Внесення антитіл мічених пероксидазою хрону (АТП) та інкубація Промивання планшету Внесення субстрату (Н2О2 + о-фенілендіамін) Визначення оптичної густини забарвленого розчину	МБ + М + АТП МБАТП + МАТП Відмивання кон΄югату МАТП МБАТП + Н2О2 + о-фенілендіамін Забарвлення, інтенсивність якого зменшується із збільшенням вмісту морфіну в сечі