- •Питання для самостійної підготовки
- •Самостійна аудиторна робота
- •1. Провести ізолювання лікарських сполук з біологічного матеріалу настоюванням з водою підкисленою кислотою оксалатною (за методом Васильєвої о. О. За наступною методикою).
- •2. Ознайомитись з іншими методиками ізолювання «лікарських» отрут.
- •3. Скласти 5 тестових завдань за методами ізолювання «лікарських отрут». Самостійна робота студента
- •2. За результатами аналізу заповнити таблицю.
- •3. Скласти 5 тестових завдань за темою заняття. Питання до самостійної підготовки студента
- •Заняття №3 тема: Дослідження «кислих» хлороформних витяжок фізико-хімічними методами на наявність і вміст лікарських речовин
- •Питання для самостійної підготовки
- •Самостійна аудиторна робота.
- •1. Провести тшх-"скринінг" (один з варіантів) речовин, що потрапляють в "кислий" хлороформний витяг.
- •2.Замалюйте хроматограму попереднього тшх-скринингу. На хроматограмі вказати:
- •3. Розв’яжіть ситуаційну задачу.
- •Питання до самостійної роботи студента
- •Заняття №4
- •Питання для самостійної підготовки
- •Самостійна аудиторна робота.
- •2. За результатами аналізу заповнити таблицю.
- •3. Скласти 5 тестових завдань за темою заняття. Питання до самостійної підготовки
- •Питання для самостійної підготовки.
- •Самостійна аудиторна робота.
- •2. За результатами аналізу заповнити таблицю.
- •3. Скласти 5 тестових завдань за темою заняття.
- •Самостійна аудиторна робота
- •1. Виконати тшх-"скринінг" (один з варіантів) речовин, що потрапляють в "лужний" хлороформний витяг
- •2.Замалюйте хроматограму попереднього тшх-скринингу. На хроматограмі вказати:
- •3. Скласти 5 тестових завдань за темою заняття. Питання до самостійної роботи
- •Заняття №7
- •Питання до самостійної підготовки
- •Самостійна аудиторна робота
- •1. Провести виділення отрут грибів з біологічного матеріалу за однією з наведеними методиками.
- •2. Ознайомитись з таблицею результатів реакцій токсинів різних грибів з відповідними реактивами і індексами токсичності.
- •3. Ознайомитись з методикою проведення тшх-аналізу отрут похідних холіну і мускарину блідої поганки і мухомору.
- •Результати тшх аналізу токсинів отруйних грибів
- •Питання до самостійної роботи
- •Заняття №8
- •Питання до самостійної підготовки
- •Самостійна аудиторна робота
- •1. Провести експрес-аналіз похідних барбітурової кислоти. Заповнити таблицю.
- •1. Провести експрес-аналіз похідних 1,4-бенздіазепіну. Заповнити таблицю.
- •3. Скласти 3 тестові завдання за темою заняття.
- •1. Провести попередню пробу на аміназин у сечі потерпілого. Заповнити таблицю.
- •2. Розв’язати ситуаційні задачі
- •Питання до самостійної роботи
- •Заняття №11
- •Тема: Експрес-аналіз гострих інтоксикацій опіатами та канабіноїдами.
- •Питання до самостійної підготовки
- •Самостійна аудиторна робота
- •1. Виконати реакції експрес-аналізу гострих інтоксикацій кодеїном. Заповнити таблицю.
- •2.Озгайомитись з методикою виділення та виявлення опіатів та опіоїдів у сечі та крові.
- •3. Ознайомитись з проведенням тшх-скрінінгу опіатів та опіоїдів.
- •4. Ознайомитись з методикою проведення імуноферментного аналізу на опіати. Імуноферментний метод аналізу на опіати
- •Облік результатів аналізу
- •Форма запису даних для побудови градуювального графіку при іфа
- •5. Ознайомитись з методами експрес-аналізу канабіоїдів
- •6. Розвязати ситуаційні задачі
Самостійна аудиторна робота.
1. Провести тшх-"скринінг" (один з варіантів) речовин, що потрапляють в "кислий" хлороформний витяг.
І етап (у спільних системах розчинників)
На хроматографічну пластинку із закріпленим шаром силікагелю наносять в три точки, що розміщені одна від одної на відстані 2 см, 0,1-0,2 мл екстракту, еквівалентного витягу з 1-2 г органу. Пластину з пробами поміщають в камеру, на дні якої знаходиться система розчинників ацетон-хлороформ (1:9). Після розвитку хроматограми і висушування пластини проводять прояв окремих хроматографічних смуг (проб після розділення речовин). Закривши 2 і 3 смуги, першу смугу обробляють послідовно 5% розчином сульфату ртуті і потім 0,1 % розчином дифенілкарбазону в хлороформі. За наявності барбітуратів з'являються плями, забарвлені в синьо-фіолетовий або червоно-фіолетовий колір. Потім закривають 1 і 3 смуги, а другу обробляють 10% розчином хлориду феруму (Ш). За наявності похідних піразолону з'являються забарвлені плями: блакитні, сині, синьо-фіолетові, червоно-фіолетові; саліцилової кислоти - синьо-фіолетові. Після цього закривають смуги 1 і 2, а третю обробляють реактивом Драгендорфа, а потім 10% розчином сірчаної кислоти. За наявності речовин слабоосновного характеру (кофеїн, амідопірин, антипірин, діазепам, нітразепам) утворюються оранжеві, оранжево-коричневі жевто-оранжеві плями. Оцінка результатів аналізу. За відсутності вищезгаданих кольорових плям дослідження «кислого» хлороформного витяги закінчують, при позитивному результаті – продовжують аналіз.
Залежно від передбачуваних сполук в пробі екстракту далі виконують підтверджувальний етап ТШХ-«скринінгу» в окремих системах розчинників зі свідком.
ІІ етап (у окремих системах розчинників)
Умови ТШХ-«скринінгу» барбітуратів:
Система: хлороформ-н-бутанол-25% розчин гідроксиду амонію (70:40:5); сорбент: силікагель КСК, забуферований 0,033 М розчином борної кислоти; свідок: циклобарбітал; число проб, що наносяться: дві (одна для прояву друга - для елюювання).
Умови ТШХ-«скринінгу» кофеїну і похідних піразолону:
Система: ацетон-циклогексан (5:1); сорбент: основний оксид алюмінію; свідок: залежно від забарвлення на хроматограмах з розчином хлориду феруму (Ш) - при стійкому червоному – антипірин; при фіолетовому зникаючому – амідопірин; при рожевому – 4-монометиламіноантипірин (продукт метаболізму анальгіну). При утворенні забарвлених плям лише з одним модифікованим реактивом Драгендорфа як свідок використовують кофеїн.
2.Замалюйте хроматограму попереднього тшх-скринингу. На хроматограмі вказати:
-лінії старту та фінішу;
-вказати місця нанесення проб;
-вказати плями на хроматограмі та їх колір після хроматографування у системі розчинників і оприскуваня відповідними реактивами;
-розрахувати значення Rf для кожної з плям на хроматограмі.
3. Розв’яжіть ситуаційну задачу.
При проведенні ТШХ-скринінгу «кислої» хлороформної витяжки в загальній системі розчинників ацетон—хлороформ (1 : 9),
проявник — 10 %-вий розчин феруму (ІІІ) хлориду, з’явились червоно-фіолетові плями. Розрахуйте значення Rf та RS для досліджуваної речовини за умови, що відстань від лінії старту до верхнього краю плями речовини 1,52 см, а циклобарбіталу (речовина-стандарт) — 3,28 см. Фронт розчинника за той же час піднімається на 8 см. Наявність якої групи речовин можна припустити?