- •1. Тема: Обмен простых белков. Переваривание, всасывание и гниение белков в кишечнике.
- •4. Основные вопросы темы:
- •6. Литература
- •На казахском языке
- •На английском языке
- •7. Контроль (вопросы, тесты, задачи и пр.) Упражнения для самоконтроля.
- •Реакция с парадиметиламиназобензолом
- •Определение кислотности желудочного сока в одной пробе.
- •Ситуационные задачи
- •Бензидиновая проба.
- •Реакция с бумагой конго-красный.
- •Реакция Уффельмана
- •1. Органические составные части нормального желудочного сока.
- •2. Всасывание белков.
- •2. Виды кислотности желудочного сока, единицы их измерения, нормальные величины.
- •1. Тема: Судьба аминокислот в тканях. Синтез креатина и креатинина. Определение метаболитов и ферментов азотистого обмена в крови.
- •2. Цель занятия:
- •4. Основные вопросы темы:
- •На казахском языке
- •На английском языке
- •Упражнения для самоконтроля.
- •Расчеты:
- •Тестовые вопросы
- •1. Тема: Пути образования и обезвреживания аммиака, синтез мочевины. Методы определения мочевины.
- •4. Основные вопросы темы:
- •На казахском языке
- •На английском языке
- •Упражнения для самоконтроля.
- •Проведение анализа
- •Расчеты
- •Билет - 1
- •1. Тема: Взаимосвязь обменов. Обмен углеводов, липидов, белков.
- •4. Основные вопросы темы:
- •На казахском языке
- •На английском языке
- •Упражнения для самоподготовки
- •Ситуационные задачи.
- •Задание для выполнения в виде выборочных тестов и ответов на теоретические вопросы.
- •1. Тема: Обмен нуклеопротеидов. Особенности обмена нуклеопротеидов.
- •1. Тема: Биохимия гормонов. Гормоны. Общие свойства и механизмы действия гормонов.
- •4. Основные вопросы темы:
- •Литература:
- •На казахском языке
- •На английском языке
- •Упражнения для самоподготовки
- •Ситуационные задачи.
- •Лабораторная работа Открытие йода в щитовидной железе
- •1. Тема: Катехоламины. Общая характеристика гормонов половых желез.
- •4. Основные вопросы темы:
- •На казахском языке
- •На английском языке
- •Упражнения для самоконтроля
- •Ситуационные задачи.
- •Цветные реакции на инсулин
- •Цветные реакции на инсулин
- •1. Тема: Водно-солевой обмен. Регуляция гомеостаза. Биохимия почек и мочи. Определение нормальных и патологических компонентов мочи.
- •4. Основные вопросы темы:
- •На казахском языке
- •На английском языке
- •Упражнения для самоподготовки
- •Ситуационные задачи.
- •Исследования мочи (рН, белок, глюкозу, кетоны и кровь) с помощью диагностических полосок (pentaphan). Проведение анализа
- •Открытие белка в моче
- •Глюкоза в моче
- •Кровь и кровяные пигменты в моче.
- •Открытие крови в моче
- •Желчные пигменты и желчные кислоты в моче
- •Открытие желчных пигментов и желчных кислот в моче
- •Индикан в моче
- •1. Тема: Водно-солевой обмен. Регуляция гомеостаза. Биохимия почек и мочи. Определение нормальных и патологических компонентов мочи.
- •4. Основные вопросы темы:
- •На казахском языке
- •На английском языке
- •Упражнения для самоподготовки
- •Ситуационные задачи.
- •Исследования мочи (рН, белок, глюкозу, кетоны и кровь) с помощью диагностических полосок (pentaphan). Проведение анализа
- •Открытие белка в моче
- •Глюкоза в моче
- •Кровь и кровяные пигменты в моче.
- •Открытие крови в моче
- •Желчные пигменты и желчные кислоты в моче
- •Открытие желчных пигментов и желчных кислот в моче
- •Индикан в моче
- •1. Тема: Биохимия печени. Обмен хромопротеидов.
- •4. Основные вопросы темы:
- •На казахском языке
- •На английском языке
- •Упражнения для самоподготовки.
- •Ситуационные задачи
- •Лабораторная работа Определение содержания билирубина в сыворотке крови методом Ендрашика, Клеггорна и Грофа.
- •Метод количественного определения содержания общего и прямого билирубина в сыворотке крови
- •Принцип метода
- •Подготовка к анализу:
- •Проведение анализа Определение общего билирубина
- •Определение прямого билирубина
- •Расчеты
- •1. Тема: Биохимия крови. Органические составные части крови.
- •4. Основные вопросы темы:
- •На казахском языке
- •На английском языке
- •Упражнения для самоконтроля
- •Ситуационные задачи.
- •Лабораторная работа Методы количественного определения составных частей крови Рефрактометрический метод определения общего содержания белка в сыворотке крови.
- •Определение белковых фракций в сыворотке крови методом электрофореза на бумаге, по а.Е.Гурвичу
- •Определение содержания общего белка в сыворотке крови биуретовым методом
- •Количественное определение белковых фракций
- •Колориметрическое определение остаточного азота крови
- •1. Тема: Биохимия крови. Неорганические составные части крови.
- •4. Основные вопросы темы:
- •На казахском языке
- •На английском языке
- •Упражнения для самоконтроля.
- •Ситуационные задачи
- •Лабораторные работы. Определение содержания кальция в сыворотке крови комплексонометрическим методом.
- •Определение содержания неорганического фосфора в сыворотке крови.
- •Метод определения уровня железа набором реактивов – биола тест
- •Тестовые вопросы
- •1. Тема: Биохимия крови. Особенности метаболизма в эритроцитах и лейкоцитах. Определение биохимических показателей крови.
- •4. Основные вопросы темы:
- •На казахском языке
- •На английском языке
- •1. Тема: Биохимия соединительной, костной и ткани зуба.
- •4. Основные вопросы темы:
- •На казахском языке
- •На английском языке
- •1. Тема: Биохимия нервной ткани и мышечной ткани.
- •4. Основные вопросы темы:
- •На казахском языке
- •На английском языке
- •Упражнения для самоконтроля
- •Диоксифенилаланин
- •Ситуационные задачи.
- •1. Тема: Биологические функции печени. Роль печени в обмене углеводов, липидов, аминокислот. Биохимические методы диагностики нарушений печени (канцерогенез).
- •4. Основные вопросы темы:
- •На казахском языке
- •На английском языке
Метод количественного определения содержания общего и прямого билирубина в сыворотке крови
Билирубин «ДДС»
Принцип метода
Прямой (конъюгированный) билирубин взаимодействует с диазотированной сульфаниловой кислотой с образованием окрашенного азосоединения, интенсивность окраски которого измеряется фотометрически при длине волны 546 нм.
Общий билирубин (прямой и неконъюгированный) в присутствии диазотированного дихлоранилина вступает в реакцию азосочетания и образует окрашенный в красный цвет комплекс азокрасителя в кислом растворе, интенсивность окраски которого прямо пропорциональна содержанию билирубина в пробе и измеряется фотометрически при длине волны 546 нм.
Подготовка к анализу:
а) Приготовление рабочего реагента для определения общего билирубина. Смешать в колбе конической вместимостью 200 мл необходимые объемы реагентов 1 и 2 в соотношении 100:1, полученный реагент выдержать в темном месте при температуре +18-25қС не менее 15 мин. Тщательно закрыть флаконы с реагентами 1 и 2 непосредственно после каждого использования.
Рабочий реагент можно хранить при температуре +2-8ºС не более трех недель или при комнатной температуре – не более 10 суток.
б) Приготовление калибратора. Во флакон с реагентом 4 внести точно 1,0 мл дистиллированной воды. Содержимое флакона растворить при осторожном перемешивании при комнатной температуре (+18-25ºС). Полученный калибратор содержит «а» мкмоль/л билирубина. Концентрация билирубина «а» мкмоль/л в калибраторе указана на этикетке флакона реагента.
Калибратор можно хранить в темном месте при температуре +2-8ºС не более 1 суток.
Реагенты 2 и 3 для определения прямого билирубина готовы к использованию.
Проведение анализа Определение общего билирубина
Компоненты реакционной смеси отбирать в количествах, указанных в таблице 1.
Отмерить (мл) |
Опытная проба |
Контрольная (холостая) проба |
Калибровочная проба |
Калибровочная (холостая) проба |
Рабочий реагент Реагент 1 Сыворотка крови Калибратор |
1,0 - 0,1 - |
- 1,0 0,1 - |
1,0 - - 0,1 |
- 1,0 - 0,1 |
Пробы перемешать и инкубировать при комнатной температуре в течение 10 минут. Измерить оптическую плотность опытной пробы против контрольной (холостой) пробы и оптическую плотность калибровочной пробы против калибровочной (холостой) пробы в кювете с длиной оптического пути 10 мм при длине волны 546 нм. Окраска стабильна в течение 30 мин.
Определить по калибратору билирубина фактор пересчета (F) оптической плотности в мкмоль/л по формуле:
F= «а»
Екал
где: Екал – оптическая плотность калибровочной пробы, ед. опт плотн.;
«а» - концентрация билирубина в калибраторе, мкмоль/л.
Определение прямого билирубина
Отмерить (мл) Опытная проба Контрольная (холостая) проба
Реагент 3 1,00 1,00
Реагент 2 0,02 -
Вода дистиллированная - 0,02
Сыворотка крови 0,10 0,10
Пробы перемешать и инкубировать при комнатной температуре в течение 3 минут (точно). Измерить оптическую плотность опытной пробы в кювете 10 мм при длине волны 546 нм против контрольной (холостой) пробы.
