- •Санітарно-показові мікроорганізми
- •Питання для самоконтролю
- •Розділ 8. Мікробіологія харчових продуктів
- •Мікробіологія молока та молочних продуктів
- •Мікрофлора сирого молока
- •Види мікробного псування молока
- •Мікрофлора питного молока
- •Мікробіологічні показники пастеризованого молока (за дсту 2661-94)
- •Мікрофлора кисломолочних продуктів
- •Мікрофлора сирів
- •Мікрофлора масла
- •Мікрофлора морозива
- •Мікробіологія м’яса та м’ясних продуктів
- •Мікробіологія яєць та яєчних продуктів
- •Мікробіологія риби та рибііих продуктів
- •Мікробіологія плодоовочевих товарів
- •Хвороби фруктів
- •Хвороби овочів
- •Мікробіологія квашених та солоних фруктів, овочів
- •Мікробіологія зерноборошняних товарів
- •Зміна мікрофлори зерна пшениці різної вологості після зо днів зберігання при температурі 20°с
- •Мікробіологія смакових товарів
- •Мікробіологія жирових продуктів
- •Мікробіологія крохмалю, цукру та кондитерських виробів
- •Забруднення цукру мікроорганізмами (у перерахунку на 10 г) за д. Бронштейном
- •Мікробіологічні показники якості борошняних кондитерських
- •Мікробіологія консервів
- •Тривалість відмирання спор при нагріванні до різних температур, у хв
- •Розділ 9. Мікробіологія непродовольчих товарів
- •Мікробіологія шкіри та шкіряних виробів
- •Мікробіологія гумових виробів
- •Мікробіологія текстильних товарів
- •Вплив обробки на стійкість бавовняних тканин до дії гриба і бактерій Cytophaga
- •Мікробіологія парфумерно-косметичних виробів
- •Мікробіологія паперу та паперових виробів
- •Мікробіологія деревини і виробів з дерева
- •- Шнур, який складається з 2-х типів гіф (а - тонкостінних; б - товстостінних); 2 - базидіоспори
- •- Базидіоспора
- •Мікробіологічна корозія заліза та сталі
- •Біодеградація синтетичних матеріалів
- •Біодеградація малярського покриття
- •Біодеградація асфальту, палива та мастильних матеріалів
- •Біодеградація асфальту
- •Мікроорганізми в паливі та мастильних матеріалах
- •Біодеградація фармацевтичних виробів
- •Які зміни якості непродовольчих товарів та матеріалів спричинюють мікроорганізми?
- •Мікробіологія шкіри та шкіряних виробів. Дефекти шкіри, спричинені мікроорганізмами.
- •Процес мікробіологічного розкладу волокон рослинного та тваринного походження.
- •Шляхи підвищення біостійкості текстильних виробів.
- •Мікробіологічні показники безпеки парфумерно-косметичних виробів.
- •Мікробіологія паперу та паперових виробів.
- •Які мікроорганізми спричинюють руйнування деревини і виробів з дерева?
- •Біодеградація асфальту, палива та мастильних матеріалів.
- •Біодеградація малярського покриття.
- •Біодеградація синтетичних полімерних матеріалів та виробів з них.
- •Додатки
- •Оптичний мікроскоп і робота з ним
- •Виготовлення та мікроскопування препаратів
- •Виготовлення препаратів методом роздавленої краплі
- •Фарбування бактерій за методом грама
- •Визначення санітарного стану торговельних підприємств за загальною кількістю мафам (мезофільних аеробних та факультативно анаеробних мікроорганізмів)
- •Визначення загальної кількості мікроорганізмів на поверхні обладнання, інвентарю, посуду, рук, спецодягу
- •Визначення наявності бактерій групи кишкових паличок (бгкп) у молоці
- •Розрахунок і визначення колі-тигру молока за бродильною пробою (гост 9225)
- •Визначення якості кисломолочних продуктів за складом їх мікрофлори (гост 9225)
- •Орієнтовний склад мікрофлори кисломолочних продуктів (гост 9225)
- •Санітарно-бактеріологічне дослідження кондитерських виробів з кремом на наявність золотистого стафілококу
- •Мікроскопічний аналіз свіжості м’яса (гост 2392)
- •Санітарно-бактеріологічне дослідження якості ковбасних виробів Визначення загальної кількості за показником мафам
- •Дослідження ковбасних виробів на наявність бактерій групи кишкових паличок (бгкп) і бактерій роду Сальмонела
- •Роду Протей
- •Міжнародна класифікація бактерій
Додаток
2
Для
того, щоб вивчати мікроорганізми за
допомогою мікроскопа, необхідно
виготовити препарати. Під мікроскопом
можна вивчати як живі, так і неживі
мікроорганізми.
Для
вивчення живих бактерій готують препарат
методом роздавленої краплі, неживих
бактерій - фіксований препарат.
На
предметне скло наносять краплю води з
промивалки. Обпаленою над полум’ям
пальника петлею вносять в краплю води
невелику кількість (на кінчику петлі)
мали мікробів, які підлягають вивченню,
і ретельно перемішують до одержання
опалесценції.
Якщо
досліджують рідкі матеріали або мікроби,
що знаходяться у рідкому середовищі,
то вода на предметне скло не наноситься,
а наноситься досліджувана суміш
мікроорганізмів із середовищем. Потім
краплю суспензії, яка знаходиться на
предметному склі, накривають покривним
скельцем, слідкуючи за тим, щоб під
нього не потрапило повітря (це ускладнить
мікроскопування). Для цього покривне
скельце спочатку ставлять на ребро,
обережно опускають та притискають
скляною паличкою (крапля рідини при
цьому роздавлюється). Крапля має бути
середнього розміру і заповнювати весь
простір між предметним і покривним
склом. Якщо вона занадто велика і рідина
виступає за край покривного скельця,
надлишок води необхідно усунути за
допомогою фільтрувального паперу.
Препарати,
виготовлені методом роздавленої краплі
(з живих мікробів), розглядають при
напівзакритій діафрагмі. Частіше при
цьому користуються об’єктивом, який
дає збільшення у 40 разів. Робоча відстань
цього об’єктива від препарату знаходиться
у проміжку від 1 до 2 мм (що відповідає
фокусній відстані об’єктива). У цьому
проміжку і слід знаходити зображення.
Виготовлення
офарбованих препаратів.
Бактерії
дуже часто розглядають у фарбованих
препаратах. Так можна краще вивчити
будову клітини, включення у ній,
спороутворення, наявність джгутиків
тощо.
Спочатку
роблять мазок. Для цього краплю
бактеріальної суспензії, розмазують
петлею по поверхні предметного скла і
висушують на повітрі. Щоб прискорити
процес висушування, препарат можна
направити під струмінь теплого повітря
над
378Виготовлення та мікроскопування препаратів
Виготовлення препаратів методом роздавленої краплі
полум’ям
пальника (ні в якому разі не вносити у
полум’я). Потім необхідно зафіксувати
мазок. Мертві клітини краще зафарбовуються
і добре закріплюються на поверхні скла,
не змиваються при наступних операціях.
Препарат фіксують, проводячи повільно
три рази через полум’я пальника мазком
доверху.
Фіксований
мазок фарбують. Для цього на поверхню
мазка наносять 1-2 краплі фарби з
крапельниці й витримують упродовж 2-3
хв. Як барвник використовують водний
розчин фуксину, розчин метиленової
синьки, ген ціан-віолету або іншої
фарби. Після фарбування фарбу змивають
водою з промивалки і препарат ретельно
висушують фільтрувальним папером.
Офарбовані
препарати необхідно розглядати при
відкритій діафрагмі з об’єктивом 90х.
Об’єктив 90х - це об’єктив, що дає
максимальне збільшення, однак лінза
його невелика і через неї проходить
незначна кількість світлових променів.
Через шар повітря розглядати препарат
з об’єктивом 90х неможливо через
те, що світлові промені, переходячи з
одного середовища в інше (із скла в
повітря), заломлюються і в об’єктив
потрапляє занадто мало світла, в
результаті чого зникає видимість
препарату. Щоб виключити заломлення
світлових променів, на препарат наносять
краплю кедрової (імерсійної) олії й
об’єктив занурюють в олію. Розглядають
препарат через шар олії (а не повітря).
Кедрова олія має показник заломлення
такий, як і скло, завдяки чому повністю
виключається розсіювання світлових
променів і препарат добре видно. Робоча
відстань об’єктива 90х від
препарату знаходиться у проміжку від
5
до 1,0 мм, тому зображення слід шукати
на цій відстані, не виходячи з краплі
олії.
379
