Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
часть3.docx
Скачиваний:
2
Добавлен:
01.07.2025
Размер:
2 Мб
Скачать
☆

Додаток 2

Виготовлення та мікроскопування препаратів

Для того, щоб вивчати мікроорганізми за допомогою мікроскопа, необхідно виготовити препарати. Під мікроскопом можна вивчати як живі, так і неживі мікроорганізми.

Для вивчення живих бактерій готують препарат методом роздавленої краплі, неживих бактерій - фіксований препарат.

Виготовлення препаратів методом роздавленої краплі

На предметне скло наносять краплю води з промивалки. Обпаленою над полум’ям пальника петлею вносять в краплю води невелику кількість (на кінчику петлі) мали мікробів, які підлягають вивченню, і ретельно перемішують до одержання опалесценції.

Якщо досліджують рідкі матеріали або мікроби, що знаходяться у рідкому середовищі, то вода на предметне скло не наноситься, а наноситься досліджувана суміш мікроорганізмів із середовищем. Потім краплю суспензії, яка знаходиться на предметному склі, накривають покривним скельцем, слідкуючи за тим, щоб під нього не потрапило повітря (це ускладнить мікроскопування). Для цього покривне скельце спочатку ставлять на ребро, обережно опускають та притискають скляною паличкою (крапля рідини при цьому роздавлюється). Крапля має бути середнього розміру і заповнювати весь простір між предметним і покривним склом. Якщо вона занадто велика і рідина виступає за край покривного скельця, надлишок води необхідно усунути за допомогою фільтрувального паперу.

Препарати, виготовлені методом роздавленої краплі (з живих мікробів), розглядають при напівзакритій діафрагмі. Частіше при цьому користуються об’єктивом, який дає збільшення у 40 разів. Робоча відстань цього об’єктива від препарату знаходиться у проміжку від 1 до 2 мм (що відповідає фокусній відстані об’єктива). У цьому проміжку і слід знаходити зображення.

Виготовлення офарбованих препаратів.

Бактерії дуже часто розглядають у фарбованих препаратах. Так можна краще вивчити будову клітини, включення у ній, спороутворення, наявність джгутиків тощо.

Спочатку роблять мазок. Для цього краплю бактеріальної суспензії, розмазують петлею по поверхні предметного скла і висушують на повітрі. Щоб прискорити процес висушування, препарат можна направити під струмінь теплого повітря над

378

полум’ям пальника (ні в якому разі не вносити у полум’я). Потім необхідно зафіксувати мазок. Мертві клітини краще зафарбовуються і добре закріплюються на поверхні скла, не змиваються при наступних операціях. Препарат фіксують, проводячи повільно три рази через полум’я пальника мазком доверху.

Фіксований мазок фарбують. Для цього на поверхню мазка наносять 1-2 краплі фарби з крапельниці й витримують упродовж 2-3 хв. Як барвник використовують водний розчин фуксину, розчин метиленової синьки, ген ціан-віолету або іншої фарби. Після фарбування фарбу змивають водою з промивалки і препарат ретельно висушують фільтрувальним папером.

Офарбовані препарати необхідно розглядати при відкритій діафрагмі з об’єктивом 90х. Об’єктив 90х - це об’єктив, що дає максимальне збільшення, однак лінза його невелика і через неї проходить незначна кількість світлових променів. Через шар повітря розглядати препарат з об’єктивом 90х неможливо через те, що світлові промені, переходячи з одного середовища в інше (із скла в повітря), заломлюються і в об’єктив потрапляє занадто мало світла, в результаті чого зникає видимість препарату. Щоб виключити заломлення світлових променів, на препарат наносять краплю кедрової (імерсійної) олії й об’єктив занурюють в олію. Розглядають препарат через шар олії (а не повітря). Кедрова олія має показник заломлення такий, як і скло, завдяки чому повністю виключається розсіювання світлових променів і препарат добре видно. Робоча відстань об’єктива 90х від препарату знаходиться у проміжку від

  1. 5 до 1,0 мм, тому зображення слід шукати на цій відстані, не виходячи з краплі олії.

379