- •Изучение и проведение противоэпидемических мероприятний санэпидрежима при проведении гем. Исследований. Подготовка рабочего места для забора капиллярной крови. Забор капиллярной крови
- •Взятие капиллярной крови
- •Взятие капиллярной крови самотеком:
- •Надеть перчатки и протереть их стерильным тампоном, смоченным 70% этанолом.
- •Подсчет количества эритроцитов в счетной камере
- •Определение количества лейкоцитов
- •Нормы лейкоцитов в периферической крови. Клинико-диагностическое значение.
- •Индексы красной крови. Цветовой показатель (цп) и содержание гемоглобина в одном эритроците (сге). Расчет. Нормы. Диагностическое значение изменения цп и сге.
- •Техника приготовления мазка крови для подсчета лейкоцитарной формулы
- •Фиксация мазков
- •Обработка предметных стекол для приготовления мазка крови
- •Окраска по Романовскому-Гимзе
- •Подсчет лейкоцитарной формулы
- •Принцип морфологической дифференциации клеток крови в окрашенных препаратах
- •Подсчет количества тромбоцитов
- •Определение количества тромбоцитов крови в камере Горяева
- •Определение количества тромбоцитов крови по Фонио
- •Клиническое значение
- •Определение длительности кровотечения по методу Дуке
- •Определение времени свертываемости крови по способу Бюркера
- •Определение ретракции кровяного сгустка (метод Макферлейна)
- •Причины увеличения и уменьшения времени свертывания крови и длительности кровотечения
- •Окраска ретикулоцитов краской бриллианткрезилблау
- •Техника подсчета количества ретикулоцитов
- •Малярия
- •Лабораторная диагностики малярии. Исследование тонкого мазка крови
- •Исследование толстой капли крови
- •Плазмодии малярии в мазке крови
- •Серологическая диагностика малярии
- •Задача №1
- •Определение резус-фактора с помощью Цоликлона анти-d
- •Характеристика и основные свойства Цоликлона анти-d супер
- •Ошибки пр определении группы крови
Определение резус-фактора с помощью Цоликлона анти-d
Цоликлон анти-D предназначен для выявления D антигена системы резус в эритроцитах человека и применяется в серологических тестах взамен или параллельно с изоиммунной анти-D сывороткой.
Известно, что IgM антитела не вызывают агглютинации некоторых образцов эритроцитов со слабо выраженным D антигеном (Du). Поэтому образцы, которые при исследовании моноклональным анти-D реагентом были определены как D-отрицательные, необходимо дополнительно тестировать в желатиновом тесте или непрямой реакции Кумбса с помощью анти-D реагентов, содержащих IgG антитела (поликлональной сывороткой или моноклональным анти-D IgG реагентом).
Характеристика и основные свойства Цоликлона анти-d супер
Действующим началом Цоликлона анти-D являются моноклональные человеческие анти-D антитела, которые продуцируются гетерогибридомой, полученной в результате слияния человеческой лимфобластоидной линии с миеломной клеточной линией мыши. Моноклональные антитела принадлежат к одному классу иммуноглобулинов, полностью идентичны по структуре и биологической активности.
Поскольку линия клеток человека, использованная для слияния с мышиной миеломой, была получена из лимфоцитов здорового донора, исключена контаминация реагента патогенными вирусами (гепатит, СПИД и др.). Однако с исследуемыми образцами крови следует работать в перчатках во избежание заражения патогенными вирусами, передающимися через кровь.
Анти-D антитела, принадлежащие к иммуноглобулинам класса М, вызывают прямую агглютинацию эритроцитов, содержащих D антиген. Анти-D IgM моноклональные антитела могут быть использованы для выявления D-антигена в любых модификациях прямой реакции агглютинации: на плоскости, в пробирках, в микропрепарате. Результаты испытаний показали надежность и специфичность моноклональных анти-D антител в определении D-антигена системы резус.
Определение D-антигена системы резус
Определение D-антигена производится в нативной крови, стабилизированной с помощью применяемых консервантов; в крови, взятой без консерванта; в крови взятой из пальца. Наиболее четкая реакция агглютинации наблюдается при использовании высокой концентрации эритроцитов. Заключение о присутствии D-антигена в исследуемых эритроцитах делают по наличию положительной реакции агглютинации.
Реакция агглютинации на плоскости
На пластинку со смачиваемой поверхностью наносят большую каплю (0,1 мл) реагента. Рядом помещают маленькую каплю (0,01-0,05 мл) исследуемой крови и смешивают кровь с реагентом стеклянной палочкой. Реакция агглютинации начинает развиваться через 10-15 секунд, четко выраженная агглютинация наступает через 30-60 секунд. Результаты агглютинации следует учитывать через 3 минуты, поскольку с эритроцитами, несущими слабый D-антиген, реакция происходит медленнее. Пластинку после смешивания реагента с кровью рекомендуется покачивать не сразу, а через 20-30 секунд, что позволяет за это время развиться более полной, крупнолепестковой реакции агглютинации.