Обработка предметных стекол для приготовления мазка крови

Стекла, бывшие в употреблении замачивают в 2% растворе хозяйственного мыла или стирального порошка (20 г порошка растворяют в 975 мл воды и добавляют 20 мл пергидроля) в эмалированной посуде на 8-10 ч. Старый мазок удаляют ватным тампоном и кипятят стекла в этом же растворе 5-10 минут. Кипячение более 10 минут и использование алюминиевой посуды приводят к помутнению стекол. Затем стекла промывают в проточной воде, насухо вытирают и выборочно проверяют полноту отмывки от щелочных добавок, моющих средств с помощью спиртового раствора фенолфталеина (1 г/л) путем нанесения 2-3 капель на стекло (розовое окрашивание не должно появляться). Отмытые стекла помещают на 30-60 минут в смесь Никифорова (этиловый спирт 96% и диэтиловый эфир в соотношении 1:1), по мере необходимости стекла извлекают пинцетом и протирают тряпочкой (шелковым трикотажем) насухо.

Новые стекла промывают проточной водой, затем на 2-3 дня помещают в банку со смесью Никифорова.

Техника приготовления мазка крови для подсчета лейкоцитарной формулы

Мазки крови приготовляют на чистых обезжиренных стеклах, пользуясь шлифованными предметными или покровными стеклами. Край этих стекол должен быть уже поверхности предметного стекла, на котором готовят мазки.

1. Взяв предметное стекло, с находящейся на расстоянии 1-1,5 с от края стекла каплей крови (1), в левую руку, располагают его между I пальцем с одной стороны и II и III пальцами — с другой так, чтобы капля крови оказалась сверху и справа.

2. Шлифованное предметное или покровное стекло располагают слева от капли под углом 45 градусов, держа его I и II пальцами правой руки так, чтобы кончики пальцев касались его длинных ребер.

3. Продвигают стекло вправо до соприкосновения с каплей крови и тем самым способствуют распределению крови между стеклами.

4. Когда вся кровь распределится между стеклами, достаточно быстро, спокойно и не надавливая продвигают стекло влево до тех пор, пока капля крови не будет исчерпана. Правильно сделанный мазок имеет равномерную толщину, желтоватый цвет, просвечивает и на конце заканчивается «метелочкой». Он занимает не более ¾ и не менее ½ длины предметного стекла. Это достигается распределением капли крови, размер которой в диаметре 2-3 мм.

5. Приготовленный мазок подсушивают на воздухе.

6. После высыхания на поверхности мазка, ближе к началу, углом предметного стекла или простым карандашом надписывают фамилию больного или его регистрационный номер и дату.

7. Из крови каждого больного готовят не менее двух мазков.

Фиксация мазков

Фиксация мазков предохраняет форменные элементы крови от воздействия содержащейся в красках воды, под влиянием которой в нефиксированных препаратах происходит гемолиз эритроцитов и изменяется морфология лейкоцитов. Фиксатор также вызывает коагуляцию белков и закрепляет мазок на стекле.

Наилучшими фиксаторами является раствор эозинметиленового синего по Маю-Грюнвальду. При его отсутствии используют этиловый спирт 96% (время фиксации 30 минут), смесь Никифорова (20 минут).

Сухие мазки опускают в широкогорлую банку с фиксатором на необходимое для фиксации время. Затем извлекают пинцетом и высушивают на воздухе. При этом необходимо следить, чтобы поверхности стекол с мазками не соприкасались друг с другом. Фиксацию мазков можно проводить и в специальных контейнерах, опуская их в кювету с фиксатором.