Определение группы крови с помощью стандартных гемагглютинирующих сывороток.

Оснащение:

1. Стандартные гемагглютинирующие сыворотки групп 0(I), А(II) и В(III) двух серий и одна серия группы АВ(IV).

2. Тарелка с маркировкой.

3. Исследуемая кровь в пробирке.

4. Четыре стеклянных палочки.(3-предметных стекла)

5. 0,9% р-р NaCl.

6. Пипетки.

7. Часы.

8. Емкость с дезинфектантом.

9. Штатив.

Предварительная подготовка:

1. Надеть медицинский халат, маску, шапочку, непромокаемый фартук, очки.

2. Помыть руки под проточной водой и вытереть.

3. Надеть две пары резиновых перчаток.

Основные этапы выполнения:

1. На тарелку с маркировкой нанести сыворотки 0(I), А(II) и В(III) групп двух серий.

2. Отдельно от них нанести каплю исследуемой крови пипеткой.

3. Отдельными концами стеклянных палочек (предметных стёкол) внести кровь в сыворотки и размешать (соотношение 1:10).

4. Подождать 5 минут, после чего к каждой капле сыворотки с кровью добавить по 1 капле 0,9% р-ра NaCl и читать результат:

• если агглютинация не произошла нигде, кровь не содержит агглютиногенов и принадлежит к 0(I) группе;

• если агглютинация произошла с сыворотками 0(I) и В(III) групп, кровь содержит агглютиноген А и принадлежит к А(II) группе;

• если агглютинация произошла с сыворотками 0(I) и А(II) групп, кровь содержит агглютиноген В и принадлежит к В(III) группе;

• если агглютинация произошла с сыворотками 0(I), А(II) и В (III) групп, кровь содержит агглютиногены А и В и принадлежит к АВ(IV) группе. 

Чтобы подтвердить, что исследуемая кровь действительно АВ(IV) группы, необходимо нанести на тарелку сыворотку АВ(IV) группы и действовать дальше согласно п. 2,3,4 данной инструкции. Если агглютинации нет, это кровь АВ(IV) группы.

5. Использованное оборудование подвергнуть предстерилизационной обработке согласно ОСТ 42-21-2-85.

6. Заполнить медицинскую документацию.

 

 

Определение группы крови с помощью моноклональных антител анти-а и анти-в (цоликлонов)

Оснащение:

1. Цоликлоны анти-А и анти-В в пробирках (флаконах) с пипетками.

2. Стеклянная палочка(предметное стекло).

3. Фарфоровая пластинка или тарелка с маркировкой.

4. Емкость с дезинфектантом.

5. Пипетки.

6. Исследуемая кровь в пробирке.

7. Штатив.

8. Часы.

Предварительная подготовка:

1. Надеть медицинский халат, маску, шапочку, непромокаемый фартук, очки.

2. Помыть руки под проточной водой и вытереть.

3. Надеть две пары резиновых перчаток.

 

Основные этапы выполнения:

1. Нанести с помощью пипетки по 1 большой капле цоликлонов анти-А и анти-В на фарфоровую пластинку под соответствующие надписи или на градуированную тарелку в гнездо А ( II ) цоликлон анти-А, а в гнездо В ( III ) - цоликлон анти В.

2. Отдельно нанести 1 каплю исследуемой крови.

3. Внести кровь разными концами стеклянной палочки(предметного стекла) в цоликлоны в соотношении 1:10, размешать.

4. В течение 2,5 минут наблюдать за ходом реакции, легко покачивая пластинку.

5. Оценка результата:

• если агглютинация не произошла ни с цоликлоном анти-А, ни с цоликлоном анти-В, значит, в эритроцитах крови нет агглютиногенов А и В и кровь принадлежит к 0(I) группе.

• если агглютинация произошла только с цоликлоном анти-А, это значит, что в эритроцитах крови находится только антиген А и кровь принадлежит к А(II) группе.

• если агглютинация произошла только с цоликлоном анти-В, это значит, что в эритроцитах крови находится только антиген В и кровь принадлежит к В(III) группе.

• если агглютинация произошла с цоликлонами анти-А и анти-В, это значит, что в эритроцитах крови находятся антигены А и В и кровь принадлежит к АВ(IV) группе.

В этом случае следует дополнительно провести контрольное исследование данной крови с 0,9% раствором натрия хлорида.

Для этого на пластинку нанести 1 большую каплю 0,9% раствора натрия хлорида и в нее концом стеклянной палочки (предметного стекла) внести исследуемую кровь и размешать.

При отсутствии агглютинации в этой контрольной капле кровь принадлежит к АВ(IV) группе.

При появлении агглютинации в этой контрольной капле рекомендуется повторное определение группы крови, используя отмытые эритроциты данного образца крови.

6. Использованное оборудование подвергнуть предстерилизационной обработке согласно ОСТ 42-21-2-85.

7. Заполнить медицинскую документацию.