2.Методы определения белков.

Цветные реакции на белки-белки в тканях или биологических жидкостях можно обнаружить с помощью цветных реакций на отдельные аминокислоты, входящие в состав белка :

-реакция на тирозин Миллона,

-ксантопротеиновая реакция,

-реакция на аргинин Сакагучи,

-реакция на гистидин и тирозин Паули,

-реакция на триптофан Эрлиха,

-реакция на цистеин Фоля-Чиокалтеу и др.).

Обнаружить белки можно с помощью нингидриновой реакции, позволяющей обнаружить все альфа-аминокислоты из которых построены природные белки.

Поскольку белковые молекулы построены из полипептидных цепей, обнаружить белки можно с помощью биуретовой реакции, качественной реакцией на пептидные связи.

Для количественного определения белков чаще всего используются

1 - реакция с нингидрином

2- биуретовая реакция.

В настоящее время в качестве метода количественного определения белка используется спектрофотометрический метод. Количество белка можно определять и путем регистрации степени проявления биологических свойств белка. Этим способом определяют количество иммуноглобулинов, ферментов и прочих белков.

3.Механизмы действия и особенности ферметативного катализа.

Ферменты обладают очень высокой специфичностью. Эмиль Фишер в 1890 г. высказал предположение, что эта специфичность обусловливается особой формой молекулы фермента, точно соответствующей форме молекулы субстрата (или субстратов). Эту гипотезу часто называют гипотезой «ключа и замка»: субстрат сравнивается в ней с «ключом», который точно подходит по форме к «замку», т. е. к ферменту. Часть молекулы фермента, вступающую в контакт с субстратом, называют активным центром фермента, и именно активный центр фермента имеет особую форму.

Весь процесс ферментативного катализа можно условно поделить на три этапа:

1)специфическое присоединение моле-кулы субстрата к ферменту (образование фермент-субстратного комплекса);

2)преобразование первичного промежуточного соединения в один или несколько последовательных (переходных) комплексов;

3 )отделение конечных продуктов реакции от фермента, протекающее в одну или несколько стадий.

Особенности ферментативного катализа

1.Ферменты намного активнее чем неорганические катализаторы.

Так химотрипсин в 1 млн. раз превосходит щелочной и кислотный гидролиз белка. Одна молекула каталазы может за 1 минуту разрушить 18 млн. молекул Н2О2.

2.Ферментативная реакция идет более "чисто", т.к. фермент катализирует только одну реакцию не влияя на другие. Это свойство ферментов связано с их специфичностью.

Специфичность бывает абсолютная и относительная.Абсолютная специфичность - фермент катализирует превращение только одного субстрата. Например, уреаза катализирует гидролиз только мочевины. Наиболее выражена абсолютная специфичность в виде стереохимической субстратной специфичности - фермент катализирует превращение только одного из всех возможных стереоизомеров одного субстрата. Например, фумараза действует только на фумаровую кислоту и не действует на ее стереоизомер малеиновую кислоту.

3.мягкие условия протекания ферментативных реакций: температура 370С, нормальное атмосферное давление, рН, близкое к нейтральному;

4.способность к регуляции.

4.Незаменимые аминокилоты.

Незамени́мые пищевы́е вещества́ — это такие вещества, которые пища должна обязательно включать для того, чтобы обеспечить нормальное функционирование организма человека либо животного. Организм совершенно не синтезирует незаменимые вещества

Незаменимые жирные кислоты

α-линоленовая кислота (омега-3 жирная кислота с кратчайшей цепочкой),

линолевая кислота (омега-6 жирная кислота с кратчайшей цепочкой).

Незаменимые аминокислоты для взрослых людей

изолейцин,

лизин,

лейцин,

метионин,

фенилаланин,

треонин,

триптофан,

валин.

Незаменимые аминокислоты для детей, но не для взрослых

гистидин,

аргинин.

Витамины

биотин (витамин B7, витамин H),

холин (витамин Bp),

фолат (фолиевая кислота, витамин B9, витамин M),

ниацин (витамин B3, витамин P, витамин PP),

пантотеновая кислота (витамин B5),

рибофлавин (витамин B2, витамин G),

тиамин (витамин B1),

витамин A (ретинол),

витамин B6 (пиридоксин, пиридоксамин или пиридоксаль),

витамин B12 (кобаламин),

витамин C (аскорбиновая кислота),

витамин D (эргокальциферол или холекальциферол),

витамин E (токоферол),

витамин K (нафтохиноны).

Лизин принимает активное участие в синтезе гормонов, антител, ферментов, восстановлении и формировании тканей и коллагена. Эта незаменимая аминокислота входит в состав практически всех белков. Лизин поддерживает необходимый уровень азота в крови, способствует усвоению кальция в организме и является неотъемлемой составляющей правильного формирования скелета у детей. Пищевые добавки, включающие в свой состав лизин, обычно принимают для восстановления организма после спортивных травм и различных операций. Лизин содержат в себе такие продукты, как мясо, рыба, орехи, пшеница и молоко.

Валин также необходим для человека. Эта аминокислота поддерживает нормальный уровень азота в организме, способствует восстановлению повреждённых тканей и, что важно для спортсменов, является источником энергии для для мышечных тканей. Валин содержится в молочных продуктах, грибах, арахисе, мясе и зерновых. Рекомендуется сочетать приём валина с приёмом таких аминокислот, как L-изолейцин и Д-лейцин.

Лейцин является источником энергии для организма, защищает мышечные ткани, способствует быстрому заживлению костей, кожных покровов и мышц, а также снижает уровень холестерина. При дефиците лейцина наблюдается уменьшение массы тела, задержка роста, возникают патологии почек и щитовидной железы. Лейцин содержится в орехах, чечевице, буром рисе, мясе, рыбе и большинстве семян. Приём лейцина в виде пищевых добавок следует применять в комплексе с изолейцином и валином.

Изолейцин обладает очень важным свойством для организма, он играет ключевую роль для синтеза гемоглобина. К тому же эта незаменимая аминокислота с разветвлёнными боковыми цепями регулирует процессы энергообеспечения и избавляет от усталости мышц при перенапряжении и сильном утомлении. Изолейцин является неотъемлемой частью питания для спортсменов, так как увеличивает выносливость и восстанавливает мышечные ткани. К пищевым источникам изолейцина относятся: куриное мясо, кешью, яйца, рыба, чечевица, мясо, рожь, миндаль, нут (турецкий горох), печень, соя.

Метионин – это незаменимая аминокислота, которая необходима для важных функций организма. Она способствует нормальному пищеварению, сохранению здоровой печени, участвует в переработке жиров и является мощным антиоксидантом. Метионин содержится в следующих пищевых продуктах: йогурт, мясо, молоко, бобовые, чеснок, лук, чечевица, семена, соевые бобы.

Треонин – незаменимая аминокислота, которая принимает участие в обмене жиров, синтезе коллагена и эластина, контролирует работу печени и способствует поддержанию нормального белкового обмена. Она необходима организму для синтеза антител и иммуноглобулинов, а также для правильной работы иммунной системы. Треонин содержится в яйцах, молочных продуктах, бобах и орехах.

Фенилаланин является нейромедиатором для нервных клеток головного мозга. В организме человека фенилаланин превращается в допамин и норадреналин, которые обеспечивают выносливость и бодрость. Фенилаланин эффективно помогает при депрессии, артрите, мигрени, ожирении. Пищевые добавки, содержащие эту аминокислоту нельзя принимать диабетикам, беременным женщинам, лицам с высоким артериальным давлением. Следует знать, что фенилаланин не усваивается организмом, которому не хватает витамина С.

Триптофан – это незаменимая кислота, используемая мозгом для производства серотонина, одного из важнейших нейромедиаторов. Триптофан способствует естественному и здоровому сну, уменьшает напряжение и беспокойство, стабилизирует настроение. Уменьшает симптомы биохимических нарушений в организме и препятствует развитию алкоголизма. Спортсмены принимают триптофан для снижения аппетита, контроля за массой тела и увеличения выброса гормонов роста. Пищевые источники триптофана – это курица, индейка, молоко, йогурт, овёс, бананы, кунжут, арахис, творог, кедровые орехи.