Кольцевая бруцеллезная проба

Молоко, полученное от коров, больных бруцеллезом, представляет опасность. Молоко из бруцеллезных хозяйств может послужить средством передачи инфекции от животных, больных бруцеллезом, человеку. Поэтому молоко, получаемое на молочнотоварных фермах, где имеются коровы, больные бруцеллезом, разрешается к реализации только после термической обработки (пастеризации или кипячения).

Для обнаружения в молоке бруцеллезных антител предложено много методов; более специфической и доступной для широкого применения счи­тают кольцевую бруцеллезную пробу, предложенную Ленинградским на­учно-исследовательским ветеринарным институтом.

Ход анализа. 1 мл свежего молока, не обезжиренного, наливают в про­бирку диаметром 0,5-0,8 см, туда же добавляют одну каплю (0,05-0,06 мл) антигена; пробирку встряхивают до появления равномерного голубого от­тенка и ставят в термостат при температуре 37°С на 30-40 мин, после чего производят учет результатов.

Положительная реакция на бруцеллез характеризуется появлением в слое сливок кольца синего цвета, молоко под слоем сливок имеет белый (первоначальный) цвет. При отрицательной пробе молоко остается равно­мерно окрашенным в голубоватый цвет, а слой сливок - в белый.

Определение микробной загрязненности молока

Проба на редуктазу.

Эта проба является косвенным показателем бакте­риальной обсемененности неп?стеризованного молока и сливок.

Чем больше в молоке содержится микроорганизмов, тем больше его редук-тазная активность, так как редуктаза - фермент, выделяемый микроорганиз­мами. Редуктаза обесцвечивает метиленовый синий. На скорости обесцве­чивания метиленового синего редуктазой, содержащейся в молоке, и осно­вана эта проба.

Для проведения анализа в пробирку наливают 20мл молока и 1 мл рас­твора метиленового синего, закрывают пробкой, перемешивают и помещают в баню или термостат при температуре 37-40°С. Изменение окраски отме­чают до 20 мин, через 20 мин, через 2 и 5,5 ч. Оценка результатов приведена в табл. 4.

Ускоренная проба на редуктазу.

В пробирку берут 10 мл молока и 1 мл разбавленного в 10 раз дистиллированной водой раствора метиленового синего (разбавленный раствор готовят в день анализа). Далее поступают так же, как указано выше. Результаты начинают отмечать до 10 мин, через 10 мин, 1 и 3 ч.

Проба с резазурином.

В 5 пробирок наливают по 10 мл молока и добав­ляют по 1 мл резазурина, пробирки закрывают резиновыми пробками (про­бирки и пробки должны быть стерильными) и медленно переворачивают 3 раза, не допуская встряхивания. Пробирки помещают в водяную баню с температурой воды 37-38°С. Изменение окраски отмечают через 20 мин и 1 ч. В свежем молоке резазурин дает синее окрашивание, при загрязнении мо­лока микробами цвет изменяется от фиолетового до розового, а в дальней­шем розовая окраска исчезает. Результаты оценки качества молока приведе­ны в табл. 5.

Таблица 4

Оценка результатов редуктазной пробы

Скорость обес-	Приблизитель-	Оценка	Класс
цвечивания ме-	ное количество	Качества
тиленового си-	микробов в 1 мл	Молока	молока
него	молока
До 20 мин	20 млн. и выше	Очень плохое	IV
От 20 мин до 2 ч	От 4 до 20 млн.	Плохое	III
От 2 до 5,5 ч	От 500 тыс. до	Удовлетвори-	II
	4 млн.	тельное
5,5 ч и более	Менее 500 тыс.	Хорошее	I

Таблица 5

Оценка качества молока но резазуриновой пробе

Продолжитель	Окрашивание	Приблизитель-	Оценка качества молока	Класс
Ность	молока	ное количество
наблюдения		микробов в 1 мл
До 20 мин	Белое	20 млн. и выше	Очень плохое	IV
Через 1 час	Розовое до Белого	От 4 до 20 млн.	Плохое	III
« »	Сине-	От 500 тыс. до	Удовлетвори-	И
	фиолетовое	4 млн.	тельное
« »	Сине-	Менее 500 тыс.	Хорошее	I
	стальное
	(без измене-
	ний)