- •Микробиологические методы исследования биологического материала
- •Раздел I
- •Глава 1 область применения
- •Глава 2 общие правила забора биологического материала для микробиологического исследования
- •Раздел II методы исследования биологического материала
- •Глава 3
- •Методы исследования крови
- •Глава 4 методы исследования спинномозговой жидкости
- •Глава 5 методы исследование материалов из стерильных локусов
- •Глава 6 методы исследования желчи
- •Глава 7 методы исследования мочи
- •Глава 8 методы исследования отделяемого из верхних дыхательных путей
- •Глава 9 методы исследования отделяемого из нижних отделов дыхательных путей
- •Глава 10 методы исследования инфицированных ран
- •Глава 11 методы исследования отделяемого глаз
- •Глава 12 методы исследования отделяемого ушей
- •Глава 13 методы исследования отделяемого из урогенитального тракта
- •Глава 14 методы исследования материалов при аутопсии
- •Глава 15 методы исследования грудного молока
- •Раздел III методы идентификации микроорганизмов
- •Глава 16
- •Методы идентификации микроорганизмов рода staphylococcus
- •Глава 17 методы идентификации микроорганизмов рода streptococcus
- •Глава 18 методы идентификации микробов рода enterococcus
- •Глава 19 методы идентификации микроорганизмов рода neisseria и кокковых видов рода мoraxella
- •Глава 20
- •Глава 21 методы идентификации микроорганизмов рода corynebacterium
- •Глава 22 методы идентификации микроорганизмов семейства enterobacteriaceae
- •Глава 23 методы идентификации неферментирующих грамотрицательных бактерий (нгоб)
- •Глава 24 методы идентификации микроорганизмов рода listeria
- •Глава 25 методы идентификации дрожжевых и дрожжеподобных грибов
- •Раздел IV общие методы исследования
- •Глава 26
- •Микроскопические методы (окраска препаратов)
- •Глава 26 питательные среды
- •Глава 28 биохимические методы, создание условий культивирования
- •Оглавление
Глава 13 методы исследования отделяемого из урогенитального тракта
75. Содержимое цервикального канала в норме стерильно. У наружного зева в слизистой пробке в небольшом количестве могут быть обнаружены преимущественно молочнокислые бактерии как результат обсеменения микрофлорой верхней трети влагалища. Полость и придатки матки в норме стерильны.
Нарушение количественного соотношения и видового состава микрофлоры влагалища приводит к инфекционным заболеваниям – вагиниту, сопровождающемуся воспалительной реакцией тканей и бактериальному вагинозу – инфекционному невоспалительному синдрому, связанному с дисбиозом влагалищного биотопа.
Возбудителями неспецифических воспалительных заболеваний женских половых органов являются в основном представители нормальной микрофлоры, которые могут вызывать заболевание при определенных условиях - это микоплазмы, уреаплазмы, энтерококки, представители семейства энтеробактерий, псевдомонады, стафилококки, стрептококки, гарднереллы, дрожжеподобные грибы, анаэробные бактерии и другие. Условно-патогенные микроорганизмы могут вызывать внутриутробную патологию плода и новорожденного и септические аборты.
Неспецифические инфекции урогенитального тракта у мужчин связаны с условно-патогенными микроорганизмами: кишечные палочки, протеи, клебсиеллы, псевдомонады, энтерококки, стафилококки, стрептококки, грибы и другие.
76. Взятие, транспортировка и хранение клинического материала при инфекцииях урогенитального тракта в соответствии с приложением 10 к настоящей Инструкции.
77. Микроскопия исследуемого материала.
Мазки фиксируют на пламени и окрашивают по Граму или метиленовым синим, по Романовскому-Гимзе, при необходимости – другими методами. В соответствии с результатами микроскопии могут быть внесены коррективы в ход бактериологического исследования.
78. Посев исследуемого материала.
Питательные среды: кровяной агар, среду Эндо агар (среду Мак-Конки), среду Сабуро– при подозрении на грибковое поражение. Возможно использование других дифференциально-диагностических сред для выделения представителей нормальной микрофлоры и предполагаемых инфекционных агентов, при соответствующей клинической ситуации. Допускается использование готовых хромогенных сред, а также коммерческих тест-систем. Посев биологического материала в таких случаях проводится в соответствии с инструкцией к тест-системе.
Культивирование. Кровяной агар - при 35-370 С, 5-10% СО2, в течение 24-48 часов; среда Эндо (среда Мак-Конки) – при 35-370 С в аэробных условиях, в течение 24 часов; Сабуро агар - при 25-300 С в аэробных условиях, в течение 72 часов. Чашки с биологическим материалом просматривают ежедневно.
Полуколичественный метод посева. Схема посева биологического материала собранного с помощью микробиологического тампона представлена в приложении 7 к настоящей Инструкции. Поворачивая тампон вокруг оси равномерно распределить материал на 1/4 поверхности чашки Петри. Используя одну бактериологическую петлю, произвести рассев биологического материала на сектора II – IV.
Доставленные в лабораторию жидкие пробы (гной, экссудат, содержимое тубоовариальных образований, околоплодные воды) засевают по 0,1 мл на плотные питательные среды, распределяя материал по поверхности среды шпателем или используя полуколичественный метод посева. равномерно распределяют микробиологической петлей на 1/4 поверхности чашки Петри и производят рассев биологического материала на сектора II – IV (используя одну бактериологическую петлю). Схема посева материала полуколичественным методом представлена в приложении 2 к настоящей Инструкции.
При появлении роста на плотных средах проводят учет колоний различной морфологии, учитывая их рост на секторах: рост колоний микроорганизмов на только I секторе - скудный рост; на I-II секторах - умеренный рост; на III- IV секторах – массивное количество.
Проводят видовую идентификацию микроорганизмов. Отрицательный результат исследования выдается при отсутствии роста на всех питательных средах в течение 3-5 суток.
Гнойное отделяемое, экссудат, содержимое язв, эрозий и т.п. исследуют по схемам указанным в Главе 10 настоящей инструкции. Материал из тубоовариальных образований, околоплодные воды и т.п., биопсийный материал внутренних органов и тканей исследуют согласно схем указанных в Главе 5 настоящей инструкции.
79. Оценка результатов.
При обнаружении бактерий указывается характер роста на первичных твердых питательных средах и средах обогащения. Выделение бактерий только на средах обогащения свидетельствует о высокой вероятности контаминации материала на любом из диагностических этапов (отбор, хранение, транспортировка и посев биологического образца на питательные среды).