Глава 19 методы идентификации микроорганизмов рода neisseria и кокковых видов рода мoraxella

114. Род Neisseria объединяет группу грамотрицательных аэробных и факультативно-анаэробных кокков и коккобацилл, наиболее часто располагающихся парами и короткими цепочками, напоминающие «кофейные зерна». Это неподвижные, не образующих спор, оксидазапозитивные и каталазопозитивные микроорганизмы.

В род Neisseria включены сдедующие виды, которые выделяются от человека: патогенные виды - N. meningitidis, N. gonorrhaeae, и так называемые, непатогенные нейссерии - N. mucosa, N. sicca, N. subflava, N. flavescens, N.lactamica, N.elongata и другие.

115. N. meningitidis - является возбудителем эпидемического цереброспинального менингита, менингококкцемии, менингоэнцефа-лита и назофарингита. Значительно реже менингококк является причиной пневмоний, эндокардитов, полиартрита и иридоциклитов. N.gonorrhoeae - возбудитель венерического заболевания гонореи. Гонококки могут быть причиной артритов, эндокардитов, конъюнктивитов, тонзиллитов.

Патогенные виды нейссерий мало жизнеспособны во внешней среде. Пересевы способствуют утрате специфических антигенов, что мешает правильной идетификации культур. Поэтому все дифференциально-диагностические признаки нейссерий желательно изучать одномоментно, у свежевыделенной или претерпевшей 1-2 пересева культуры. Менингококки требовательны к условиям культивирования. При росте требуют повышенной влажности и 5-10% содержания СО₂. Посев лучше производить на свежеприготовленные среды, после предварительного подогрева их в термостате.

116. M. catarrhalis выделяется из респираторного тракта 1,5-5,4% здоровых взрослых, более часто – из респираторного тракта здоровых детей (50,8%) и пожилых людей (26,5%). Инфекции респираторного тракта, вызванные M.сatarrhalis включают средний отит, синусит, бронхит и пневмонию. Отит и синусит, вызванные M. сatarrhalis, наиболее часто встречаются у детей, тогда как пневмония не встречается в этом возрасте. Инфекции нижних дыхательных путей, вызванные M. сatarrhalis преимущественно встречаются у пожилых и иммунокомпрометированных пациентов, особенно у лиц с хронической обструктивной легочной болезнью, бронхоэктатзами, сердечной недостаточностью. M. сatarrhalis также может быть изолирована от пациентов с первичной бактериемией, эндокардитами, менингита, инфекциями глаз, урогенитальными инфекциями, раневыми инфекциями, сепсисом, артритами, нозокомиальными инфекциями респираторного тракта, перитонитами.

117. Бактериоскопический метод.

Мазки из исследуемого клинического материала окрашивают по Граму. Отношение к окраске у нейссерий выражено недостаточно четко. Обнаружение в мазках грамотрицательных диплококков, расположенных внутри лейкоцитов, позволяет заподозрить патогенные виды нейссерий (менингококк или гонококк). Наличие в мазках из патологического материала грамотрицательных кокков или мелких овоидных палочек, расположенных парами или короткими цепочками, характерно для других представителей рода Neisseria и кокковых видов рода Моraxella.

118. Культуральный метод.

Патогенные нейссерии на кровяном и шоколадном агарах растут в виде непрозрачных, беловато - серых, крупных колоний, с блестящей поверхностью и ровными краями, маслянистой консистенции. Менингококки не лизируют эритроциты. Непатогенные нейссерии и моракселлы растут на поверхности кровяного и шоколадного агаров в виде круглых гладких серовато-белых колоний с ровными краями, блестящей поверхностью или шероховатых колоний неправильной формы с неровными краями с причудливо изрезанной поверхностью, некоторые имеют желтый пигмент.

На менингококкагаре и сывороточном агаре колонии менингококков бесцветные круглые с ровным краем, опалесцирующие, выпуклые имеют маслянтстую консистенцию, легко снимаются петлей со среды.

В мазках при окраске по Граму из гладких колоний, подозрительных на представителей рода Neisseria и кокковые виды рода Моraxella, микробы имеют вид грамотрицательных бобовидных, округлых кокков, расположенных парами и довольно равномерно распределяющихся в поле зрения; в мазках из шероховатых колоний - грамотрицательные кокки располагаются в виде скоплений; клетки микробной популяции имеют однородное окрашивание у нейссерий, полиморфно окрашены у менингококков; у гонококков, вследствие лизиса части клеток, всегда имеются более светлоокрашенные особи.

Следующим этапом в изучении колоний является определение их каталазной и оксидазной активности. Микробы рода Neisseria и кокковых видов рода Моraxella обладают ферментом каталазой (за исключением N.elongata subspecies elongate и nitroreducens) и оксидазой.

Идентификация микроорганизмов рода Neisseria и кокковых видов рода Моraxella, основанная на комплексе морфологических, тинкториальных и биохимических признаков, проводится в соответствии с Инструкцией о методах микробиологической диагностики менингококковой инфекции и бактериальных менингитов, утвержденной Приказом Министерства здравоохранения Республики Беларусь 13.02.2006 №81.

Исследования на гонорею необходимо проводить в соответствии с инструкцией по лабораторной диагностике этой нозологической формы.

119. Идентификацию возможно осуществлять на коммерческих тест-системах с визуальным учетом или с использованием автоматических и полуавтоматических микробиологических анализаторов.