- •Микробиологические методы исследования биологического материала
- •Раздел I
- •Глава 1 область применения
- •Глава 2 общие правила забора биологического материала для микробиологического исследования
- •Раздел II методы исследования биологического материала
- •Глава 3
- •Методы исследования крови
- •Глава 4 методы исследования спинномозговой жидкости
- •Глава 5 методы исследование материалов из стерильных локусов
- •Глава 6 методы исследования желчи
- •Глава 7 методы исследования мочи
- •Глава 8 методы исследования отделяемого из верхних дыхательных путей
- •Глава 9 методы исследования отделяемого из нижних отделов дыхательных путей
- •Глава 10 методы исследования инфицированных ран
- •Глава 11 методы исследования отделяемого глаз
- •Глава 12 методы исследования отделяемого ушей
- •Глава 13 методы исследования отделяемого из урогенитального тракта
- •Глава 14 методы исследования материалов при аутопсии
- •Глава 15 методы исследования грудного молока
- •Раздел III методы идентификации микроорганизмов
- •Глава 16
- •Методы идентификации микроорганизмов рода staphylococcus
- •Глава 17 методы идентификации микроорганизмов рода streptococcus
- •Глава 18 методы идентификации микробов рода enterococcus
- •Глава 19 методы идентификации микроорганизмов рода neisseria и кокковых видов рода мoraxella
- •Глава 20
- •Глава 21 методы идентификации микроорганизмов рода corynebacterium
- •Глава 22 методы идентификации микроорганизмов семейства enterobacteriaceae
- •Глава 23 методы идентификации неферментирующих грамотрицательных бактерий (нгоб)
- •Глава 24 методы идентификации микроорганизмов рода listeria
- •Глава 25 методы идентификации дрожжевых и дрожжеподобных грибов
- •Раздел IV общие методы исследования
- •Глава 26
- •Микроскопические методы (окраска препаратов)
- •Глава 26 питательные среды
- •Глава 28 биохимические методы, создание условий культивирования
- •Оглавление
Глава 11 методы исследования отделяемого глаз
62. Микробиологическое исследование проводится при заболеваниях конъюнктивы, век, слезных мешков, роговицы. В норме только с конъюнктивы и в небольшом количестве выделяются S.epidermidis, C.xerosis, C.pseudodiphteriticum, непатогенные микроорганизмы семейства Neisseriaceae, Sarcina. У отдельных лиц временно могут выделяться S.aureus, микроорганизмы семейства Streptococcaceae (S.pneumoniae, S.viridans), E.faecalis, представители семейства Enterobacteriaceae, рода Haemophilus, микоплазмы.
При бактериальных конъюнктивитах чаще обнаруживаются: стафилококки (S.aureus - при остром процессе, S.epidermidis при хроническом), N.gonorrhoeae, M.catarrhalis, Branhamella spp., C.diphteriae, S.pyogenes, S.viridans, E.faecalis, Haemophilus spp., P. aeruginosa, микроорганизмы семейств Enterobacteriaceae, родов Proteus, Klebsiella, Escherichia, Serratia spp., L.monocytogenes, грибы рода Candida, Aspergillus.
63. Взятие материала.
Накануне, за 5-8 часов отменяют все лекарственные препараты и процедуры. Материал забирают с пораженных мест в разгар воспалительного процесса с соблюдением правил асептики. Сразу после взятия материал помещается в соответствующую транспортную среду или доставляется в лабораторию не позднее 2-х часов от момента взятия, избегая охлаждения. Допускается хранение материала в транспортной среде при комнатной температуре в течение 24-х часов.
64. Отделяемое с конъюнктивы. Отводят нижнее веко и стерильным тампоном или платиновой петлей проводят по поверхности конъюнктивы нижнего века по направлению к внутреннему углу глаза. Исследование из каждого глаза проводят отдельным тампоном. При поражении одного глаза следует производить забор материала паралелльно и из здорового глаза в качестве контроля.
65. Край век. Корочки гноя удаляют пинцетом. Берут материл из язвочки у основания ресниц.
66. Роговица. Материал на исследование, после обезболивания, можно взять платиновой петлей или другим подходящим инструментом. Если пациент применяет контактные линзы, необходимо исследовать их внутреннюю поверхность.
При необходимости, врач-офтальмолог готовит мазки для микроскопического исследования. Взятый дополнительным влажным тампоном (смоченным физиологическим раствором) материал наносят на поверхность предметного стекла. Мазки высушивают, стекло маркируют, на его обратной стороне обводят границы мазка. Каждое стекло с образцом маркируется и помещается в контейнер для транспортировки в сопровождении направления (направление к препаратам помещается в полиэтиленовый пакет).
67. Микроскопия исследуемого материала.
Мазки фиксируют над пламенем и окрашивают по Граму или метиленовым синим, при подозрении на туберкулез - по Циль-Нильсену, при необходимости – другими методами. Результаты бактериоскопии немедленно сообщают лечащему врачу в виде предварительного ответа. В соответствии с результатами микроскопии могут быть внесены коррективы в ход бактериологического исследования.
68. Посев исследуемого материала.
Питательные среды: шоколадный агар, кровяной агар, 0,1% полужидкий сывороточный агар или ТСБ или тиогликолевый бульон, при подозрении на грибы – агар Сабуро.
Культивирование: на шоколадном агаре при 35-370 С, 5-10% СО2, в течение 24-48 часов, на кровяном агаре при 35-370 С, 5-10% СО2, в течение 24-48 часов; Сабуро агар - при 25-300 С в аэробных условиях в течение 72 часов; 0,1% полужидкий сывороточный агар или триптиказо-соевый бульон или тиогликолевый бульон - при 35-370 С в аэробных условиях в течение 48 часов. Чашки с биологическим материалом просматривают ежедневно. При наличии роста в жидких средах, производят высев на кровяной агар.
Посев материала. Схема посева биологического материала собранного с помощью микробиологического тампона представлена в приложении 7 к настоящей Инструкции. Поворачивая тампон вокруг оси равномерно распределить материал на 1/4 поверхности чашки Петри. Используя одну бактериологическую петлю, произвести рассев биологического материала на сектора II – IV. После посева на твердые питательные среды поместить тампон в 0,1% полужидкий сывороточный агар или ТСБ или тиогликолевый бульон.
При появлении роста на плотных средах проводят учет колоний различной морфологии, учитывая их рост на секторах: рост колоний микроорганизмов на только I секторе - скудный рост; на I-II секторах - умеренный рост; на III- IV секторах – массивное количество. При наличии роста в жидких средах, производят высев на кровяной агар.
Проводят видовую идентификацию микроорганизмов. Отрицательный результат исследования выдается при отсутствии роста на всех питательных средах в течение 3-5 суток.
69. Оценка результатов.
При интерпретации результатов микробиологического исследования глаз необходимо учитывать контингент обследованных больных, анамнез, клинические проявления болезни; сравнивать видовой состав микроорганизмов, выделенных из пораженного и здорового глаза.
Выделение бактерий только на средах обогащения свидетельствует о высокой вероятности контаминации материала на любом из диагностических этапов (отбор, хранение, транспортировка и посев биологического образца на питательные среды).