- •Микробиологические методы исследования биологического материала
- •Раздел I
- •Глава 1 область применения
- •Глава 2 общие правила забора биологического материала для микробиологического исследования
- •Раздел II методы исследования биологического материала
- •Глава 3
- •Методы исследования крови
- •Глава 4 методы исследования спинномозговой жидкости
- •Глава 5 методы исследование материалов из стерильных локусов
- •Глава 6 методы исследования желчи
- •Глава 7 методы исследования мочи
- •Глава 8 методы исследования отделяемого из верхних дыхательных путей
- •Глава 9 методы исследования отделяемого из нижних отделов дыхательных путей
- •Глава 10 методы исследования инфицированных ран
- •Глава 11 методы исследования отделяемого глаз
- •Глава 12 методы исследования отделяемого ушей
- •Глава 13 методы исследования отделяемого из урогенитального тракта
- •Глава 14 методы исследования материалов при аутопсии
- •Глава 15 методы исследования грудного молока
- •Раздел III методы идентификации микроорганизмов
- •Глава 16
- •Методы идентификации микроорганизмов рода staphylococcus
- •Глава 17 методы идентификации микроорганизмов рода streptococcus
- •Глава 18 методы идентификации микробов рода enterococcus
- •Глава 19 методы идентификации микроорганизмов рода neisseria и кокковых видов рода мoraxella
- •Глава 20
- •Глава 21 методы идентификации микроорганизмов рода corynebacterium
- •Глава 22 методы идентификации микроорганизмов семейства enterobacteriaceae
- •Глава 23 методы идентификации неферментирующих грамотрицательных бактерий (нгоб)
- •Глава 24 методы идентификации микроорганизмов рода listeria
- •Глава 25 методы идентификации дрожжевых и дрожжеподобных грибов
- •Раздел IV общие методы исследования
- •Глава 26
- •Микроскопические методы (окраска препаратов)
- •Глава 26 питательные среды
- •Глава 28 биохимические методы, создание условий культивирования
- •Оглавление
Глава 12 методы исследования отделяемого ушей
70. В норме в наружном ухе, присутствуют условно-патогенные микроорганизмы, представленные нормальными обитателями кожи и слизистых (стафилококки, стрептококки, коринебактерии и другие). В среднем и внутреннем ухе микрофлора отсутствует. Наружный инфекционный отит чаще вызывают P. aeruginosa, E. coli, S. aureus, Proteus spp., Streptococcus spp., Aspergillus spp., Candida spp.
При остром воспалительном отите возбудителем являются S.pneumoniae, Streptococcus группы В, H.influenzae, S.aureus, P.aeruginosa, E.coli, Proteus spp., Enterobacter spp., Klebsiella spp., Serratia spp., S.pyogenes, M.catarrhalis.
При хронически протекающей инфекции и серозном среднем отите чаще обнаруживают ассоциации микроорганизмов, основными представителями которых являются P.aeruginosa, H.influenzae, S.aureus, K.pneumoniae, M.catarrhalis, Proteus spp., Bacteroides spp., Fusobacterium spp., Peptostreptococcus spp.
71. Взятие исследуемого материала.
71.1. При поражениях среднего и внутреннего уха исследуют пунктаты и материал, полученный во время оперативных вмешательств.
При самопроизвольной перфорации барабанной перепонки экссудат собирают стерильным тампоном, используя слуховое зеркало, в этом случае высока веротность контаминации биологического материала эндогенной флорой.
71.2. При воспалении наружного уха отбор материала производится во время операции или перевязки. Промыванием раневой поверхности физиологическим раствором удаляют местно применяемые антисептические и антибактериальные препараты. Кожу вокруг раневой поверхности обрабатывают антисептиком, некротические массы, детрит, гной удаляют стерильной сухой салфеткой и отбирают отделяемое из основания очага поражения.
Материал, отобранный с помощью микробиологического тампона, храниться при комнатной температуре и доставляется на исследование не позднее 2-х часов. Допускается хранение и транспортировка материала в транспортной среде до 24 часов при комнатной температуре. Материал, собранный в стерильный контейнер, должен быть доставлен в лабораторию в течение 2 часов, допускается хранение материала в течение 24 часов при комнатной температуре.
72. Микроскопия исследуемого материала.
Мазки фиксируют над пламенем и окрашивают по Граму или метиленовым синим, при подозрении на туберкулез - по Циль-Нильсену, при необходимости – другими методами. Результаты бактериоскопии немедленно сообщают лечащему врачу в виде предварительного ответа. В соответствии с результатами микроскопии могут быть внесены коррективы в ход бактериологического исследования.
73. Посев исследуемого материала.
Питательные среды:
Внутреннее ухо: кровяной агар, шоколадный агар, среда Эндо (среда МакКонки ), ЖСА, 0,1% полужидкий сывороточный агар или ТСБ, при подозрении на грибы – среда Сабуро, при подозрении на анаэробную инфекцию - анаэробный агар.
Наружное ухо: кровяной агар, шоколадный агар, агар Эндо (МакКонки агар), ЖСА, при подозрении на грибы – агар Сабуро.
Культивирование: на кровяном агаре при 35-370 С, 5-10% СО2, в течение 24-48 часов; на шоколадном агаре при 35-370 С, 5-10% СО2, в течение 24-48 часов; Эндо агар (Мак-Конки агар) – при 35-370 С в аэробных условиях, в течение 24 часов; ЖСА - при 35-370 С в аэробных условиях, в течение 24-48 часов; 0,1% полужидкий сывороточный агар или триптиказо-соевый бульон - при 35-370 С в аэробных условиях в течение 48 часов; Сабуро агар - при 25-300 С в аэробных условиях в течение 72 часов; анаэробный агар - при 35-370 С в анаэробных условиях в течение 7 дней. Чашки с биологическим материалом просматривают ежедневно. При отсутствии роста колоний на твердых средах делают высев из сред «обогащения» на кровяной агар и шоколадный агар.
Схема посева биологического материала собранного с помощью микробиологического тампона представлена в приложении 7 к настоящей Инструкции. Поворачивая тампон вокруг оси равномерно распределить материал на 1/4 поверхности чашки Петри. Используя одну бактериологическую петлю, произвести рассев биологического материала на сектора II – IV. После посева на твердые питательные среды поместить тампон в 0,1% полужидкий сывороточный агар или ТСБ.
При появлении роста на плотных средах проводят учет колоний различной морфологии, учитывая их рост на секторах: рост колоний микроорганизмов на только I секторе - скудный рост; на I-II секторах - умеренный рост; на III- IV секторах – массивное количество. При наличии роста в жидких средах, производят высев на кровяной агар.
Проводят видовую идентификацию микроорганизмов. Отрицательный результат исследования выдается при отсутствии роста на всех питательных средах в течение 3-5 суток.
74. Оценка результатов.
Выделение бактерий только на средах обогащения свидетельствует о высокой вероятности контаминации материала на любом из диагностических этапов (отбор, хранение, транспортировка и посев биологического образца на питательные среды).