Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
+ Lab.praktikum ОМ 2014-15 КРЕДИТ 1-4.doc
Скачиваний:
0
Добавлен:
01.07.2025
Размер:
477 Кб
Скачать
☆

Определение содержания - и пре- липопротеинов сыворотки крови ту рбидиметрическим методом.

Мотивация. Знакомство с унифицированным методом определения содержания и пре--липопротеинов в сыво­ротке крови необходимо для диагностики и контроля за ле­чением ряда заболеваний (атеросклероз, сахарный диабет, ожирение, механическая желтуха, острые и хронические заболевания печени и др.). Содержание - и пре--липопротеинов в сыворотке крови составляет 35-55 усл.ед.

Реактивы. 0,025 ммоль/л р-р хлорида кальция; гепа­рин активностью 1000 ЕД в 1 мл.

Принцип. В присутствии хлорида кальция и гепарина нарушается коллоидная устойчивость белков сыворотки крови, в связи с чем осаждаются - и пре--липопротеины. Гепарин способен образовывать с -липопротеинами комплекс, который под действием хлористого кальция выпадает в осадок. По степени помутнения раствора судят о концентрации - и пре--липопротеинов в сыворотке крови.

Xод работы.

  1. В пробирку вносят 2 мл раствора хлорида кальция и 0,2 мл сыворотки крови. Содержимое пробирки перемешивают.

  2. Определяют оптическую плотность раствора (Ej) на ФЭКе против 0,025 моль/л раствора хлорида кальция при красном светофильтре (длина волны 720 им).

  3. Раствор из кюветы переливают в пробирку, добавляют 0,04 мл гепарина и точно через 4 минуты снова определяют оптическую плотность раствора (Е2) в тех же условиях.

  4. Рассчитывают концентрацию по формуле:

С = (Е2 – Е1) х 100, где 100 - эмпирический коэффициент.

Клинико-диагностическое значение.

Увеличение уровня - и пре--липопротеинов в сы­воротке крови тесно связано с повышением содержания хо­лестерина в крови. Повышение - и пре--липопротеинов наблюдается при атеросклерозе, механической желтухе, острых и хронических заболеваниях печени, сахарном диа­бете, гликогеновой болезни, ксантоматозе и ожирении. Уменьшение описано при -плазмоцитоме.

СХЕМА

протоколирования полученных результатов

№№

Экстинция Е1

Экстинция Е2

Концентрация - и

пре--липопротеинов в усл. ед.

Оценка результатов

1.

Обнаружение кетоновых тел в моче с помощью сухого реактива и диагностической полоски кетофан

Мотивация. Кетоновые тела (-гидроксимасляная кислота, ацетоуксусная и ацетон) появляются в моче при нарушениях углеводного и жирового обменов, в частности диабете, а также при голодании. В нормальной моче кето­новые тела обычными реакциями не обнаруживаются. Оп­ределение кетоновых тел в моче очень важно для диагно­стики заболевания, для контроля за ходом лечения и уста­новлением диеты для больного диабетом.

Обнаружение кетоновых тел в моче с помощью сухого реактива

Принцип. Нитропруссид натрия в щелочной среде реагирует с кетоновыми телами с образованием комп­лекса красно-фиолетового цвета.

Ход работы. На предметное стекло помещают небольшое количество сухого реактива и наносят на него 2-3 капли мочи. При наличии кетоновых тел получается окрашивание от розового до темно-фиолетового (появление окраски может наступить в течение 2-3 минут).