Ход работы

На шкалах «в» и «б» найдите точки, соответствующие количеству эритроцитов и гемоглобина, найденным в предыдущих заданиях, и соедините их прямой. По точке пересечения на шкале «а» найдите ЦП.

Рис.19 - Номограмма для определения цветового показателя крови.

На рис.17 приведен пример показателя величины цветового показателя при количестве эритроцитов 3,5 млн и содержании гемоглобина по Сали 70%. Находят точки, соответствующие этим значениям на шкалах «б» и «в», и соединяют по прямой. Прямую линию продолжают до пересечения со шкалой «а». Точка пересечения отражает величину цветового показателя; в данном случае он составляет 1,0.

Оформление протокола

1. Сравните ЦПК, вычисленный по номограмме, с ЦПК, который подсчитан на основании определенного вами процента гемоглобина и числа эритроцитов.

в), Расчет цветового показателя крови (ЦПК) по формулам

Ход работы

1.Зная абсолютное содержание гемоглобина (Нb) и число эритроцитов в 1 л крови, можно рассчитать среднее массовое содержание гемоглобина в одном эритроците (СГЭ):

Нb, г/л

СГЭ = ————————

Число эритроцитов (шт. в литре крови)

Например, содержание Нb в 1 л крови у человека - 150 г/л. Число эритроцитов в 1 л крови – 4,9 х 10¹². Рассчитываем СГЭ:

150 г/л

СГЭ = ———— = 30,6 х 10^-12 г, или 30,6 пг (пикограмм)

4,9 х10¹²

Норма СГЭ для взрослых мужчин и женщин составляет: 27-35 пг.

Величина СГЭ выражает абсолютное соотношение между гемоглобином и эритроцитами, содержащимися в 1 л крови. Вместе с тем, это соотношение выражают и относительной величиной, называемой цветовым показателем крови (ЦПК).

2. Для расчета ЦПК необходимо иметь в виду следующее. Идеальное содержание Нb в крови – 166 г/л, идеальное количество эритроцитов в 1 л крови – 5х10¹². Следовательно, идеальная величина СГЭ (с округлением равна):

166 г/л

СГЭ_ид = ———— = 33 х 10 ^-12 г, или 33 пг

5 х 10¹²

Примем величину СГЭ в 33 пг за 1, тогда рассчитываемая величина СГЭ у конкретного человека, например, 30,6 пг от 1, составит величину Х, выражающую цветовой показатель крови – ЦП:

33 – 1

30,6 – Х (ЦП)

Следовательно, ЦП = 30,6/33 = 0,93.

Нормальными считают следующие значения ЦП (таблица 18)

Таблица 18 - Интерпретация значений Цветового показателя

ЦПК	Название
0,8-1,1	Нормохромазия
Менее 0,7	Гипохромазия
Более 1,1	Гиперхромазия

Гипо- и гиперхромазия встречаются лишь при анемиях различной этиологии.

Оформление протокола

1. Заполните таблицу 19 с результатами собственных исследований по номограмме и по формулам:

Таблица 19 - Результаты собственных исследований

ЦП по номограмме		СГЭ		ЦП по формуле
Норма	Свои результаты	Норма	Свои результаты	Норма	Свои результаты
0,8-1,1		27-35 пг		0,8-1,1

2. Сделайте заключение о соответствии полученных вами данных нормативным.

Контрольные вопросы для самостоятельного изучения

1. Что выражает СГЭ?

2. Среднее значение СГЭ.

3. Что выражает ЦПК?

4. Среднее значение ЦПК.

5.Изменение величины ЦПК у детей.

Лабораторная работа № 3.12. - Подсчет тромбоцитов

Оборудование: микроскоп, счетная камера Горяева, смеситель для лейкоцитов, скарификатор, чашка Петри, 5%-й раствор уксусной кислоты (СН3СООН), вата, спирт, жидкость Реес –Эккера, дистиллированная вода.

Ход работы:

1.Прокалывают палец, получают каплю крови. Смесителем для лейкоцитов набирают до метки 0.5, консервирующую жидкость Реес –Эккера, до метки 1.0 –исследуемую кровь, а затем до метки 11 –раствор 5% уксусной кислоты для гемолиза эритроцитов. Смесь тщательно перемешивают встряхиванием. Заполняют счетную камеру. В связи с тем, что оседание тромбоцитов происходит медленно, камеру на 15-20 минут оставляют в чашке Петри, а затем производят подсчет тромбоцитов в 80 малых квадратах. Результат подсчета, умноженный на 1000, дает общее число тромбоцитов.

Оформление результатов работы:

Отметьте количество тромбоцитов, полученное в результате подсчета. В выводе следует указать, соответствуют ли полученные данные норме.

Лабораторная работа № 3.13 - Определение времени кровотечения

(по Дьюку)

Цель работы: установить время остановки кровотечения по методу Дьюка

Принцип метода. Методом Дьюка определяется длительность кровотечения из капилляров и венул кожи, целостность которых нарушена строго дозированно (с помощью специального скарификатора с ограничителем глубины разреза).

Оборудование: скарификаторы, фильтровальная бумага, секундомер, 70-% спирт, вата, настойка йода. Объект исследования - человек.

Ход работы:

1.Стерильным скарификатором сделайте глубокий укол в мякоть пальца испытуемого и сразу же начинайте отсчет времени.

2. Попросите испытуемого каждые 15 сек. прикасаться к выступающей капле крови фильтровальной бумагой, очередным ее сектором так, чтобы на ней каждый раз оставался только один отпечаток (по часовой стрелке).

3.Момент, когда на фильтровальной бумаге появляется последний отпечаток, отметьте как окончание кровотечения (рис.19). Оно обусловлено образованием белого тромба, состоящего в основном из тромбоцитов, лейкоцитов и фибрина.

Рис. 20Определение времени кровотечения (по Дьюку)

4. Отметьте время остановки кровотечения. В норме время кровотечения, определяемое этим способом, составляет 2-3 минуты.

Оформление протокола.

1. Вклейте в тетрадь фильтровальную бумагу с отпечатками капель крови.

2. Сделайте заключение о соответствии фактического времени кровотечения нормативному.

3.Соответствуют ли нормативным полученные Вами результаты свертывания крови.

Лабораторная работа № 3.14. Определение группы крови (в системе АВО).

Цель работы: определить групповую принадлежность с помощью стандартных сывороток и синтетических цоликлонов.

Оборудование: цоликлоны анти-А, и анти-В, предметное стекло, белая бумага, стеклянные палочки, стерильный скарификатор, спирт, вата и карандаш по стеклу.

ХОД РАБОТЫ

1. Взять предметное стекло, карандашом по стеклу нанести цифры 1, 2.

2. Ниже надписи нанести по капле (0,1 мл) реагента анти-А и анти-В и предметное стекло поместить на белую бумагу.

3. Ватным тампоном, смоченным спиртом протереть мякоть 4-го пальца левой руки и скарификатором проколоть протертый палец, отступив от середины на 1-2 мм влево.

4. Первую каплю крови стереть сухим тампоном. Со второй капли отдельными чистыми палочками перенести ее в каждую каплю реагента, с таким расчетом, чтобы на капле реагента было в 10 раз меньше крови (0,01 мл).

5. Реактив и кровь тщательно перемешать стеклянной палочкой, пока смесь не будет иметь равномерную розовую окраску.

6. Покачивая стекло, наблюдать в течение 1-5 минут за каплями смеси. Если капля смеси остается гомогенной, равномерно окрашенной, то это значит, что реакции гемагглютинации (РГА) нет. Если проявляются красные мелкие комочки, разделенные прозрачной плазмой, значит РГА есть. Группу крови определите по таб. 20 и рис. 18

Таблица 20- Определение групп крови с помощью синтетических цоликлонов

Эритротест цоликлон анти-А	Эритротест цоликлон анти-В	Группа крови
-	-	О (I)
+	-	А (II)
-	+	В (III)
+	+	АВ (IY)

«-» - реакции агглютинации нет

«+» - реакция агглютинации есть

Оценка результатов. Отсутствие агглютинации в обеих пробах служит доказательством принадлежности исследуемой крови к I (О) группе крови. Если агглютинация произошла с реагентом анти-А, то кровь принадлежит ко II (А) группе. Если агглютинация произошла с реагентом анти-В, то кровь III (В) группы. В случае агглютинации в обеих пробах, кровь следует отнести к IY (АВ) группе.

Рис. 21 Определение групп крови с помощью стандартных сывороток (А) и синтетических цоликлонов анти-А и анти-В (Б)

Таблица 21 - Совместимость различных групп крови

Группа сыворотки	Группа эритроцитов
	I (О)	II (А)	III (В)	IV (АВ)
I б,в	-	+	+	+
II в	-	-	+	+
III б	-	+	-	+
IV	-	-	-	-

Примечание: «+» - группы несовместимы (наличие агглютинации),

«-» - группы совместимы (отсутствие агглютинации)

По вертикали – кровь отдает, по горизонтали – кровь принимает. (Знак «-»).

Оформление протокола:

1. Запишите результаты исследования в тетрадь, заполнив таблицу 22.

Таблица 22 Результаты определения

Цоликлон Анти-А	Цоликлон Анти –В	Групповая принадлежность

2. Перенесите в тетрадь общую схему четырех групп крови, обозначив штриховкой реакцию агглютинации в соответствующих кружках.

3. Зарисуйте наблюдаемую вами картину с образцом исследованной крови, сделайте заключение о ее групповой принадлежности.

4. По таблице 20 сделайте заключение о совместимости своей группы крови с другими группами.

Лабораторная работа № 3.15. Определение резус-фактора (Rh)

Оборудование: стерильный скарификатор, вата, спирт, стеклянная палочка, предметное стекло, стандартный цоликлон анти-Д-супер, физиологический раствор (0,9%).