- •Методические советы студентам
- •Техника лабораторных работ и безопасность труда
- •Биологическим материалом
- •Реактивами
- •3. Электрическими приборами
- •Центрифугами в лабораторном практикуме
- •Занятие № 1 работа № 1. Колориметрия, общий принцип. Устройство фотоэлектроколориметра
- •Принципиальная схема устройства фотоэлектроколориметра
- •Занятие № 2 работа № 1. Цветные реакции на белки и аминокислоты
- •Биуретовая реакция на белки
- •5. Газовыми и другими нагревательными приборами
- •6.Водопроводом
- •7. Химической посудой и вспомогательными приспособлениями
- •2. Нингидриновая реакция
- •Ксантопротеиновая реакция Мульдера (на ароматические аминокислоты)
- •4. Реакция Фоля на цистеин
- •Работа № 2. Определение общего белка плазмы биуретовым методом
- •Занятие № 3 работа № 1. Осаждение белков концентрированными минеральными кислотами
- •Работа № 2. Разделение альбуминов и глобулинов яичного белка методом высаливания
- •Занятие № 4 работа № 1. Кислотный гидролиз белков
- •Работа № 2. Определение протеолитической активности трипсина
- •Занятие № 5 работа № 1. Влияние температуры на активность амилазы
- •Работа № 2. Влияние активаторов и ингибиторов на активность амилазы слюны
- •Работа № 3. Определение активности амилазы (диастазы) в сыворотке крови и моче по методу каравея
- •Занятие № 6 работа № 1. Кинетика действия липазы. Влияние желчи на активность липазы
- •Занятие № 10 работа № 1. Количественное определение мочевой кислоты в моче
- •Занятие № 11 самостоятельная аудиторная работа
- •Задания для самостоятельной работы:
- •Занятие № 12 работа № 1. Определение активности сукцинатдегидрогеназы
- •Работа № 2. Определение активности цитохромоксидазы
- •Принцип метода. Смесь -нафтола и п-фенилендиамина (реактив «Нади») окисляется цитохромоксидазой в присутствии кислорода, образуя продукт конденсации индофеноловый синий по схеме:
- •Занятие № 13 работа № 1. Количественное определение макроэргических соединений мышц
- •Занятие № 19 работа № 1. Количественное определение глюкозы в крови. Энзиматический (глюкозооксидазный) метод
- •Занятие № 20
- •Занятие № 21 работа № 1. Количественное определение пировиноградной кислоты в моче
- •Занятие № 22 самостоятельная аудиторная работа
- •Задания для самостоятельной работы:
- •Занятие № 24 работа № 1. Определение триглицеридов в сыворотке крови
- •Занятие № 25 работа № 1. Определение общего холестерина в сыворотке крови (энзиматический метод)
- •Занятие № 26 работа № 1. Определение липопротеинов низкой плотности (лпнп) в сыворотке крови
- •Занятие № 29 работа № 26. Активность аланинамино-трансферазы (АлАт) в сыворотке крови
- •Занятие № 30 работа № 1. Определение мочевины в сыворотке крови (диацетилмонооксимный метод)
- •Занятие № 34 работа № 1. Определение гемоглобина гемоглобинцианидным методом
- •Работа № 2. Определение кальция фотометрическим методом
- •Занятие № 35 работа: биохимический анализ мочи
- •Качественная реакция на белок
- •2. Полуколичественное определение белка.
- •3. Качественное определение глюкозы в моче (проба Гайнеса).
- •Занятие № 36 работа № 1: определение общего белка в спинномозговой жидкости биуретовым методом
- •Референтные величины основных биохимических показателей у взрослых кровь
- •Спинномозговая жидкость
- •Оценка знаний студентов проводится по следующим критериям:
- •4) Кори
- •2) Ламберта-Бугера-Бера
- •2) Эмиль Фишер
- •4) Мишер
- •Сопряжение с каким метаболическим процессом необходимо при синтезе атф путем окислительного фосфорилирования?
- •В каком компартменте генерируется протонный градиент при переносе электронов по цтд?
- •2) Липолитическое (увеличивает распад жира)
- •2) 2800 Ккал/сут
- •В состав триглицеридов входят:
- •Главный тип выведения продуктов азотистого обмена из организма человека – это:
- •Положительную биуретовую реакцию дают:
- •При альбинизме:
- •Изоэлектрическая точка аминокислоты – это:
- •Трансаминирование – это:
- •Подписано в печать
Занятие № 36 работа № 1: определение общего белка в спинномозговой жидкости биуретовым методом
ОБОСНОВАНИЕ ВЫПОЛНЕНИЯ РАБОТЫ. Содержание белка в спинномозговой жидкости, в отличие от сыворотки крови, незначительно. Определение общего белка в спинномозговой жидкости имеет важное значение для диагностики опухолей мозга и воспалительных заболеваний центральной нервной системы.
ХИМИЧЕСКИЙ МЕХАНИЗМ МЕТОДА. Раствор белка в щелочной среде в присутствии сульфата меди (NaOH/CuSO4) окрашивается в сине-фиолетовый цвет. Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации белка в сыворотке крови и определяется фотометрически.
ХОД РАБОТЫ: взять опытную и контрольную пробирки.
ОТМЕРИТЬ
|
ОПЫТ
|
КОНТРОЛЬ
|
РЕАКТИВ ГОРНАЛА СПИННОМОЗГОВАЯ ЖИДКОСТЬ NaCl 0,9% |
4,0 мл
0,1 мл -
|
4,0 мл
- 0,1 мл |
Перемешать, фотометрия через 20 минут. Кювета 1 см, λ=540 нм (зеленый светофильтр) |
||
РЕЗУЛЬТАТ:
Е оп =
С общего белка =
КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ.
Нормальное содержание общего белка в спинномозговой жидкости – 0,22-0,33 г/л.
Гиперпротеинрахия – увеличение уровня белка в СМЖ наблюдается при менингитах (серозный и гнойный), опухолях головного мозга, полиомиелите, арахноидите, кровоизлияниях в мозг, абсцессах мозга, рассеянном склерозе.
Гипопротеинрахия – снижение уровня белка в СМЖ отмечается при гидроцефалии, гиперсекреции ликвора, доброкачественной внутричерепной гипертензии.
ВЫВОД:
Референтные величины основных биохимических показателей у взрослых кровь
-
Показатель
Значение
АлАТ
0,1 - 0,68 ммоль/ч•л
Альбумины
40 - 50 г/л
Амилаза
16 -30 г/ч•л
АсАТ
0,1 - 0,45 ммоль/ч•л
Белок общий
65 - 85 г/л
Билирубин общий
5,0 - 20,5 мкмоль/л
Гемоглобин
115 - 145 г/л (женщины)
130 - 160 г/л (мужчины)
Глобулины
20 - 30 г/л
Глюкоза
3,3 - 6,4 ммоль/л
Железо
8,8 - 31,0 мкмоль/л
Калий
3,2 - 5,6 ммоль/л
Кальций
2,25 - 2,75 ммоль/л
Креатинин
53 – 115 мкмоль/л
Мочевая кислота
0,12 - 0,24 ммоль/л
Мочевина
2,5 - 8,33 ммоль/л
Натрий
130 - 155 ммоль/л
Общие липиды
4,0 - 8,0 г/л
Триглицериды
0,4 - 1,54 г/л у женщин
0,45 – 1.82 у мужчин
Фибриноген
2 - 4 г/л
Хлор
95 - 110 ммоль/л
Холестерин
3,1 - 5,2 ммоль/л
МОЧА
-
Показатель
Значение
Амилаза
28 -160 г/ч•л
Мочевая кислота
1,6 – 6,44 ммоль/сут
Мочевина
333 – 583 ммоль/сут