Вопрос 39.

Испражнения больного собирают в стерильный флакон троекратно на протяжении первых 3-5 дней заболевания. Для уничтожения многочисленной бактериальной флоры обрабатывают их антибиотиками (смесь пенициллина со стрептомицином. Содержащая по 100 ЕД/мл каждого антибиотика в растворе Хенкса) в течение суток при 4 градусах,после чего проводят контрольный высев на стерильность. При отсутствии бактерий суспензию испражнений используют для заражения клеточных структур ,а при сохранении бактериальной флоры повторно обрабатывают теми же антибиотиками. Заражают одновременно по 2-3 пробирки с первичной культурой клеток( фибробластов эмбриона человека или почек обезьян) и перевиваемой культурой клеток) линии HeLa, амниона человека и др.), посколу одни виды энтеровирусов лучше репродуцируются в первичных, другие- в перевиваемых клетках. Обычно на 2-Зй день после инкубации зараженных клеточных культур при 35 градусах наблюдается полная или частичная дегенерация клеток. При этом интенсивность ЦПД зависит от многих причин: дозы вируса, вида и состояния культуры кйеток и др. В случае слабовыраженного или полного отсутствия ЦПД проводят дополнительно 2-3 пассажа. При отрицательном результате исследование пркращают, при положительном- приступают к идентификации выделенного цитопатогенного агента(вируса). Исследуемый вирус предварительно титруют в той же клеточной культуре. На которой он был выделен. Для реакции нейтрализации берут 100 ЦПД50 данного вируса (за 1 ЦПД50 принимают максимальное разведение вируса, вызывающее дегенерацию не менее 50% клеток культур). Идентификацию энтеровирусов проводят путем серотипирования в реакции нейтрализации в культуре клеток. С этой целью используют смеси диагностических моновалентных сывороток или стандартные поливалентные сыворотки, а затем соответствующие моновалентные сыворотки. Вначале устанавливают принадлежность исследуемого агента к вирусам полиомиелита,Коксаки или ,ЕСНО в реакции нейтрализации с поливалентными сыворотками к каждой из Зх упомянутых групп вирусов. Так,если нейтрализация исследуемого материала произошла с поливалентной сывороткой полиомиелита, то на следующем этапе ставят реакцию нейтрализации с моновалентными сыворотками к каждому серотипу данного вируса.

Вопрос 40.

. Работа в микробиологической лаборатории мед.учреждения проводится с

возбудителями инфекционных заболеваний - патогенными микроорганизмами. Поэтому для предохранения от заражения персонал обязан строго соблюдать правила внутреннего распорядка.

1. Все сотрудники должны работать в медицинских халатах, шапочках и сменной обуви. Вход без халата категорически воспрещен. В необходимых случаях работающие надевают на лицо маску из марли. Работа с особо опасными микроорганизмами регламентируется специальной инструкцией и проводится в режимных лабораториях.

2. В лаборатории запрещается курить и принимать пищу.

3. Рабочее место должно содержаться в образцовом порядке. Личные вещи сотрудников следует хранить в специально отведенном месте.

4. при случайном попадании заразного материала на стол, пол и пр.место необходимо тщательно обработать дез.раствором

5. хранение, наблюдение за культурами микроорганизмов и их уничтожение должны производиться согласно специальной инструкции. Все культуры патогенных микроорганизмов регистрируют в спец. журнале.

6. по окончании работы руки следует тщательно вымыть, а при необходимости обработать дез. раствором.

Если произошла авария с разбрызгиванием патогенных биологических агентов:

1. все находящиеся в помещении лица немедленно прекращают работу и, задержав дыхание, выходят из заразного помещения в предбокс, плотно закрывают дверь, включают аварийную сигнализацию и сообщают о случившемся руководителю подразделения

2. руки обрабатывают дез раствором или спиртом

3. слизистые глаза, носа и рта обрабатывают препаратами из аварийной аптечки, рот и горло прополаскиваются 70% этиловым спиртом, в нос закапывают раствор марганцовокислого калия 1:100000 или 1% раствором борной кислоты, а при аварии с вирусами затем закапывают интерферон

4. защитную одежду снимают, погружают в дез раствор или в бикс для автоклавирования

5. открытые части тела протирают 70% этиловым спиртом

6. в глаза закапывают средства к которым чувствителен возбудитель (антибиотики)

7. принимают гигиенический душ и одевают чистую одежду.