Вопрос 56.

Произвести посев материала от больного штриховым способом на плотную питательную среду для выделения чистой культуры микроорганизмов.

Чашку Петри с питательной средой делят на 4 сектора. Бактериологической петлей производят посев на 1-й сектор ,после этого петлю прожигают и делают по 4 штриховых посева из 1-го сектора во 2-й и т.д.

Вопрос57.

ПРОИЗВЕСТИ ПОСЕВ ОТ БОЛЬНОГО ПО ДРИГАЛЬСКОМУ НА ПЛОТНУЮ ПИТАТЕЛЬНУЮ СРЕДУ ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ ЧИСТОЙ КУЛЬТУРЫ МИКРООРГАНИЗМОВ.

Используют 3 чашки Петри с питательной средой. На 1-ю чашку петлей или пипеткой наносят каплю исследуемого материала и растирают стерильным шпателем по всей поверхности питательного агара. Затем шпатель, не обеззараживая, переносят во 2-ю чашку и втирают оставшиеся на нем микроорганизмы в поверхность питательной среды. Далее шпатель переносят в 3-ю чашку и аналогичным образом производят посев. На 1-й чашке вырастает максимальное количество колоний, на 3-й - минимальное. В зависимости от содержания микробных клеток в исследуемом материале на третьей или на второй и третьей чашках вырастают отдельные колонии, пригодные для выделения чистой культуры.

Вопрос58.

Произвести посев изолированной колонии с чашки Петри с МПА на скошенный агар и среду Олъкеницкого.

Среда Олькеницкого является комбинированной. Готовится на основе не очень плотного МПА и содержит лактозу (1%), сахарозу (1%), глюкозу (0.1 %), мочевину, соль Мора (сульфат железа), гипосульфит натрия и индикатор. Посев проводится штрихом по скошенной части и уколом в столбик.

Для пересева изолированных колоний просматривают чашку Петри и изучают колонии. Прокаливают петлю, открывают чашку, остужая об ^ стенку петлю, и снимают часть колонии, не задевая соседние. Чашку закрывают.

При пересеве на среду Олькеницкого пробирку берут в левую руку, правой вынимают пробку над пламенем горелки. Для посева по скошенной части в пробирку вносят петлю с посевным материалом, опускают ее до конденсата в нижней части среды, и зигзагообразным движением распределяют материал по скошенной части.

При посеве уколом в столбик петлей делают прокол среды с поверхности до дна. Вынув петлю, ожигают край пробирки и закрывают ее пробкой. Петлю стерилизуют в пламени горелки и ставят в штатив.

Вопрос 59, 60.

Поставить опыт, произвести учёт и оценить результаты определения чувствительности стафилококка к антибиотикам методом стандартных дисков. Метод стандартных дисков (метод диффузии в агар) - наиболее простой и широко применяемый. Это качественный метод, позволяющий определить, к каким антибиотикам чувствителен микроб, выделенный от больного. Испытуемую культуру засевают сплошным газоном на чашку с питательным агаром. Затем на поверхность агара помешают бумажные диски, пропитанные антибиотиками. После суточного инкубирования в термостате измеряют диаметр зон задержки роста вокруг каждого диска и чем больше диаметр, тем исследуемая культура бактерий чувствительнее к антибиотику. А значит именно этот антибиотик будет более действенным при лечении. Определение проводят с чистыми культурами бактерий. Однако в некоторых случаях для быстрого получения ориентировочных результатов используют непосредственно патологический материал. Метод дисков не даст надежных данных при определении чувствительности микроорганизмов к плохо диффундирукшим в агар полипептндным антибиотикам (полимнксин, ристомииин) Если эти антибиотики предполагается использовать для лечения, рекомендуется определять чувствительность микроорганизмов методом серийных разведений