Вопрос 7.

Вопрос 8.

Принципы определения бактерицидной активности кожи

1. Берется соскоб с кожи предплечья (внутренняя поверхность) или плеча и делается посев на питательный агар с микрококками. Заключение ставится по лизису микрококков.

2. На внутреннюю поверхность предплечья наносится суточная бульонная культура E.coli, разведенная в 5х10⁴. Сразу после нанесения , а также через 5,10,15 минут ,с разных участков контаминированной кожи делают отпечатки на стекла, покрытые тонким слоем среды Эндо или МП А. Стекла выдерживают сутки в термостате при 37°, подсчитывают число колоний красного цвета и делают перерасчет на 1см² поверхности. Выражают в виде индекса бактерицидности. (антагонизм нормальной микрофлоры).

3. Посмертный срез кусочка кожи.

4. С помощью стандартных полосок (накладываются на кожу предплечья).

Вопрос 9.

Описать принципы определения вида и уровня Ig в биологических

жидкостях.

Постановка РСК (реакции связывания комплемента) с целью дифференцирования IgM и IgG.

Серологические реакции могут быть использованы для ориентировочного определения принадлежности специфических антител к одному из основных классов иммуноглобулинов: IgM или IgG. Возможность дифференцировать эти два класса иммуноглобулинов основана на их различной чувствительности к действию 2-меркаптоэтанола, цистеина и других редуцирующих веществ, которые вызывают разрывы дисульфитных связей в молекулах IgM и их распад на субъединицы, лишенные антительной активности.

Под действием той же концентрации 2-меркаптоэтанола молекулы IgG сохраняют свою целостность и антительную активность. Исходя из этого составляют серологическую реакцию (РСК или РТГА )с используемой сывороткой: нативной и обработанной 2-меркаптоэтанолом. При первичной инфекции гуморальный ответ начинается с синтеза IgM, а при рецидиве инфекции на повторную встречу с тем же антигеном ИС отвечает синтезом преимущественно IgG.

Снижение титра специфических антител в исследуемой сыворотке в результате обработки 2-меркаптоэтанолом свидетельствует в пользу первичной инфекции.

Вопрос 10.

УКАЗАТЬ ПОРЯДОК ДЕЙСТВИЙ ПРИ ПРИГОТОВЛЕНИИ ПРЕПАРАТА «ВИСЯЧАЯ КАПЛЯ».

Метод «висячей капли». Препарат готовят на покровном стекле, в центр которого наносят одну каплю бактериальной культуры. Затем предметное стекло с лункой, края которой предварительно смазывают вазелином, прижимают к покровному стеклу так, чтобы капля находилась в центре лунки. Быстрым движением переворачивают препарат покровным стеклом вверх. В правильно приготовленном препарате капля должна свободно висеть над лункой, не касаясь ее дна или края. Для микроскопии вначале используют малый сухой объектив 8, под увеличением которого находят край капли, а затем устанавливают объектив 40 и исследуют препарат.

Вопрос 11.

Метод «раздавленной» капли. На поверхность обезжиренного предметного стекла наносят каплю исследуемого материала или суспензию бактерий и покрывают её покровным стеклом. Капля должна быть небольшой, не выходящей за край покровного стекла. Микроскопируют препарат с объективом 40.