Вирусы гепатитов

К вирусам, вызывающим гепатиты у людей, в настоящее время относятся 9 групп вирусов: Гепатит А. гепатит В, гепатит С, гепатит D, гепатит Е, гепатит G, гепатит TTV. HJV. SENV. Наибольшую угрозу для здоровья населения представляют вирусные гепатиты с парентеральным путем передачи. По данным ВОЗ около 300000 человек ежегодно заболевают вирусным гепатитом В. Сегодня в мире насчитывается 3 млн. больных ХГ В, что составляет 6-10% от общего числа хронических заболеваний печени. Еще большую опасность представляет вирусный гепатит С. В разных странах от 1 до 5 % населения поражены этим вирусом. В России частота встречаемости инфекции HCV составляет около 4,5%. Среди ХЗП вирусный гепатит С стоит на первом месте и составляет 40-60 % больных. Острый гепатит переходит в хронический гепатит а затем в - цирроз печени (или гепатоцеллюлярную карциному печени).

Вирус гепатита A (HAV)

Краткая характеристика инфекции.Вирус гепатита A (HAV) вызывает инфекционный, эпидемический гепатит, иначе болезнь Боткина. Выделен Файнстоуном в 1973 году, в США.

Классификация.Относится к семейству Picornaviridae, содержит РНК, род энтеровирус, СЕРОВ АР 72.

Морфология и химический состав.Строение, характерное для всех энтеровирусов, размеры 27-32 нм, имеет белковый капсид с кубическим типом симметрии, липидной оболочки нет.

Антигенные свойства.Содержит 1 АГ белковой природы, вирусспецифический.

Культивирование.Выращивается на перевиваемых культурах гепатомы - НРС - 5. Размножение вируса не сопровождается развитием ЦПД. В культуральной жидкости не определяется, поскольку накапливается в цитоплазме клеток культуры ткани.

Резистентность.Устойчив во внешней среде. Частично инактивируется при 60 град в течение 1 часа, полностью при 56 град - 12 час, при кипячении - в течение 30-40 минут. Чувствителен к формалину и УФО. В воде сохраняется неделями и месяцами. Замораживание выдерживает годы.

Патогенность для животных.Болеют шимпанзе и мармазетки, и 150 человек заболело в НИИ от обезьян (США).

Эпидемиология и патогенезИсточником инфекции являются больные люди и вирусоносители. Чаще больные бессимптомной формой инфекции. Так, например, по данным ВОЗ около 80% европейского населения имеют антитела к вирусу к 40 годам жизни. Больной наиболее опасен в конце инкубационного периода и в первые дни разгара болезни. Основной механизм передачи инфекции фекально-оральный. Основной путь передачи инфекции - водный и пищевой. В детских организованных коллективах может быть передача инфекции через игрушки и предметы обихода. Взрослые - заболевают редко (резистентность). Для этого гепатита характерна сезонность.

С пищей вирус попадает в ЖКТ, репродуцирутся в эпителиальных клетках и в региональных лимфоузлах кишечника. Затем поступает в кровь, где его можно обнаружить в конце инкубационного периода. Основной мишенью для этих вирусов являются клетки печени, в цитоплазме которых вирусы репродуцируются. Происходит поражение гепатоцитов (цитотоксическое на гепатоциты), которое может усиливаться активированными интерферонами НК-клетками. Развивается желтуха, и вирусы из разрушенных или инфицировнных гепатоцитов поступают в желчь, затем опять в кишечник и выделяются с фекалиями.

Для этого гепатита характерно острое начало, с повышением температуры тела, с катаральными явлениями, а затем с признаками гепатита. С появлением желтухи тяжесть течения заболевания уменьшается. Редко бывает хронизация процесса. Обычно через 1,5-2 мес наступает выздоровление. Может быть безжелтушное течение у детей - 12 : 1, у взрослых -1:1.

Иммунитет.После заболевания иммунитет пожизненный, даже после перенесения бессимптомного заболевания. Гуморальный. В острый период обнаруживаются AT IgM, сохраняются 3-4 месяца. AT IgG -десятки лет.

Лабораторная диагностика.

Экспресс-диагностика

В крови вирус можно обнаружить с помощью ИФА и РИА, в фекалиях _ иммуноэлектронная микроскопия, ИФА. РИА. ДНК-амплификация.

2. Вирусологический метод.

Применяется редко. Культивируется на культурах клеток гепатомы.-*>

3. Серодиагностика.

Применяется чаще, ИФА, РИА в парных сыворотках, AT IgM достигают наивысшего титра к 3-6 неделе заболевания.

Специфическая профилактика.Иммуноглобулин человека, титрованный на AT к вирусу гепатита А. Существует генно-инженерная и синтетическая вакцина, содержащая белок вируса гепатита А. Хаврикс (Англия), Авоксин (Франция), Вактс (США), Геп-Ч-ин-ВАК (культуральная инактивированная) и Геп-Ч-инВАК-пол (добавлен полиоксидоний), производство РФ. Вакцинация осуществляется 2хкратно с интервалом 6-12 мес.

Вирус гепатита В (HBV)

Краткая характеристика инфекции.

Около 2 млн. человек погибают ежегодно. Открыт Д. Дейном в 1970 году.

Классификация.Семейство Hepadnaviridae.

Морфология и химический состав.Размер 42 нм, сферической формы (частица Дейна), состоит из нуклеоида, имеющего форму икосаэдра диаметром 28 нм, внутри находится двухцепочечная ДНК, концевой белок и ДНК-полимераза. Отличительной особенностью является наличие однонитевого участка ДНК, который непостоянен и составляет у разных штаммов от 15 до 60 % от всей длины, в изолированном виде не представляет инфицирующего начала.

Антигенные свойства.В состав нуклеоидного белка входят НВс и НВе антигены. Внешняя оболочка толщиной 7 нм образована поверхностным антигеном HBs. Избыточная продукция поверхностного антигена приводит к его нахождению в сыворотке крови больного в свободном виде. Открыт Блюмбергом в 1965 году у австралийских аборигенов и назван австралийским антигеном. Представляет гликопротеин с липидным компонентом. Имеет 2 субъединицы . PreS2 - полиглобулиновый рецептор, отвечает за адсобцию вируса на гепатоцитах, связывается с сывороточным альбумином - полиальбумин - в результате чего во внешней оболочке вируса образуется та же структура, что в плазме крови человека. PreSl - обладает выраженными иммуногенными свойствами и является основой для вакцин.

НВс - коровский антиген, нуклеопротеид, обнаруживается в ядре гепатоцитов, где вирус репродуцируется.

НВе - обнаруживается в крови, отщепляется от НВс при проникновении вируса в гепатоцит. НВх - содержит онкоген и, предположительно, отвечает за опухолевую трансформацию гепатоцитов. Считается, что это мутировавший НВс , обнаруживается только в гепатоцитах. AT синтезируются против HBs, НВс, НВе.

Культивирование.Культивируется очень плохо, поэтому все вакцины рекомбинантные.

Резистентность.Вирус устойчив во внешней среде и выдерживает кипячение в течение 15-20 мин, 60 град -несколько часов. В крови при комнатной температуре сохраняется - 6 мес. УФО и - 20 град не влияют на вирус. Формалин и детергенты убивают вирус.

Эпидемиология и патогенезИсточником инфекции являются больные люди и вирусоносители. Считают, что 5 % населения носители вируса. Путь передачи - парентеральный, чаще ятрогенный, со шприцами, при переливании крови, при взятии крови на анализ, гемофилии, массовых прививках. Другой путь _ трансплацентарный - от матери к плоду. 3-й путь - половой. Вирус, попадая в кровь, попадая

в печень. Репликация вируса происходит в ядрах гепатоцитов. При этом однонитевая цепь ДНК достраивается до двухнетевой. С помощью ДНК-полимеразы. Синтезируются все антигены и другие компоненты. Сборка вируса идет в ядре гепатоцита. Репродукция вируса не сопровождается цитолизом клеток, поэтому поражение печени не связано с размножением вируса, а с экспрессией его антигенов на гепатоцитах и их распознавание иммунной системой человека. Многообразование форм связано с АГ особенностями возбудителя и характером его взаимодействия с гепатоцитами.

Формы: острая, подострая, хроническая и персистирующая, последняя более злокачественная, и зависит от действия Д вируса гепатита (См. ниже). При острой форме - подавляется активность Тх, что приводит к подавлению выработки AT. При хронической - подавление Тс. что приводит к развитию аутоиммунных процессов.

Макрофаги, в которых вирус тоже может размножаться, при этом экспрессируют антигены вируса на мембране и инициируют выработку AT. Но может развиться и дефект распознавания вируса вследствие его размножения внутри макрофага.

Различают интегративную и репликативную инфекции. Интегративная инфекция характеризуется синтезом HBsAg. Репликативная инфекция реализуется в острое течение, а затем заканчивается выздоровлением, или в - хроническое течение, затем в цирроз печени, а затем - в карциному.

Иммунитет.Циркулируют антитела к HBsAg.

Лабораторная диагностика.Экспресс-диагностика

ПЦР

2. Серодиагностика

Динамика синтеза AT против различных АГ не одинакова: в продромальный период появляются НВс - AT, затем НВе - AT и лишь в последнюю очередь HBs - AT. По наличию AT к тем или иным АГ, определяемым с помощью ИФА, можно судить о периоде заболевания.

Специфическая профилактика и лечение.Рекомбинантные (дрожжевые) вакцины: Энджерикс (Бельгия), Комбиотех и Вирион - РФ. Иммуноглобулин донорский.

Вирус гепатита С (HCV)

Краткая характеристика инфекции. Выделен и идентифицирован в 1989 группой японских и американских специалистов. Распространение. ЮВА - 1 % НОСИТЕЛИ, Европа - 1%, СНГ - Средняя Азия - до 10 %, Москва - 1,3 %. Выявляют по AT.

Классификация.Относится к флавивирусам. Является РНК содержащим и обладает лимфотропным и гепатотропным действием.

Морфология и химический состав.Размером 40-60 нм. Геном представлен одноцепочечной РНК. К структурным белкам относят белок сердцевины (кор) и гликопротеины оболочки (Е1 и Е2). Неструктурная часть - в основном РНК-полимераза. Помимо вирусных белков снаружи вирион покрыт липидной оболочкой, состоящей из липопротеинов низкой плотности организма хозяина.

Выделяют 3 генотипа, наиболее неблагоприятное течение при инфицирование генотипом 1.

Культивирование.Пока не удается на культурах клеток.

Эпидемиология.Та же, что и при В гепатите.

Патогенез.Вирус оказывает на гепатоциты иммунологически опосредованное действие. Инкубационный период - 6-8 нед. Исход и прогноз неблагоприятный. Высокая частота хронизации. В 83% -безжелтушная форма, малосимптомная. В 80 % - ХАГ. В 20 % - развивается цирроз. В 1-3 % -гепатоцеллюлярная карцинома. Ласковый убийца. Широкий спектр внепеченочных проявлений болезни: васкулиты, гломерулонефрит, тиреоидит. лимфопролиферативные заболевания.

Лабораторная диагностика.Существует 4 поколения ИФА тест- систем для обнаружения антител к структурным и неструктурным белкам вируса, а также иммуноблот. Но антитела не свидетельствуют о продолжающейся репликации вируса, а могут являться признаком как текущей, так и перенесенной инфекции.Ведущая позиция принадлежит генодиагностике, которая позволяет выявить генетический материал вируса в сыворотке крови и тканях человека, а также определить концентрацию РНК вируса. Обнаружение РНК в сыворотке крови является «золотым стандартом» диагностики, свидетельствующим о репликации вируса. По рекомендации ВОЗ диагноз выставляется при трехкратном обнаружении РНК в сыворотке крови при отсутствии других маркеров. Предпочтительнее использовать ПЦР в реальном времени.

Специфическая профилактика. Вакцины против гепатита С - нет.

Вирус гепатита D (HDV)

Краткая характеристика инфекции. Дельтавирусный гепатит.

В 1987 г. Ризетто (Италия) обнаружил новый антиген в печени HBd. Но оказалось это новый вирус. Это дефектный вирус, у него нет информации о синтезе белкового капсида. Он может размножаться только в присутствии помощника, а именно вируса гепатита В. При этом используется или своя обратная транскриптаза, или вируса гепатита В.

Морфология и химический состав.

Вирус РНК содержащий, размером 36 нм. Он покрывается HBs антигеном. Несмотря на необходимость наличия вируса В для передачи и распространения D «из клетки в клетку» внутри пораженной печени, репликация D может происходить независимо от В., но частицы D не формируются в отсутствии В. В частицах Дейна не ДНК, а РНК.

ПатогенностьТа же, что при гепатите В.

РаспространениеНе совпадает с гепатитом В, есть регионы, где много В и мало D. Италия и Турция - мало В, но много носителей D.

Эпидемиология.Та же, что и при В гепатите.

Патогенез.Вирус оказывает прямое цитопатическое действие на гепатоциты.

Клинически 2 формы. При суперинфекции (когда есть В и присоединяется D) течет волнообразно, тяжело, 70 % ХАГ, цирроз.

При коинфекции (одновременное инфицирование и В и D) - среднетяжелые формы - 45 %, тяжелые - 20%, фульминантные (молниеносные)- 25 %.

Лабораторная диагностика.ИФА-диагностика для определения IgM к HDV, иммуноблотинг, ПЦР-диагностика.

Специфическая профилактика.Вакцина против В эффективна.

Вирус гепатита Е (HEV)

Краткая характеристика инфекции.

В 1955г в Индии вспышка инфекционного гепатита, но это был не гепатит А. В середине 80 годов в Центральной Азии возникла исключительно крупная водная эпидемия гепатита Е, вовлекшая более 150 тыс. человек. Было доказано, что вспышка была обусловлена несколькими штаммами Е.

Классификация.

РНК - вирус, семейство Caliciviridae.

Морфология и химический состав. Размер 32-34 нм, сферической формы.

Эпидемиология.

Во многом напоминает гепатит А, вспышки в основном водные. Инкуб. Период - 14-50 дней. Течение тяжелее, чем при А. Среди беременных - летальность 80 %. Оказывает прямое действие на гепатоциты.

Лабораторная диагностика.ПЦР диагностика в сыворотке крови и в фекалиях. ИФА - диагностика для определения AT.

Вирус гепатита G (HGV)Открыт в 1994 году. Относится к семейству флавивирусы. Предположение о существовании этого вируса было высказано в 70-х гг., когда сывороткой крови хирурга (с инициалами G.B.). заболевшего гепатитом были заражены экспериментальным путем нечеловекообразные обезьяны. РНК содержащий, РНК позитивной полярности, протяженностью от 9013 до 9392 нуклеотидов, одноцепочечная. Парентеральный путь заражения, вирусоносительство пока не уточнено, склонность к хронизации выражена. Обнаружение при помощи ПЦР. Используют также ИФА-диагностику для обнаружения AT.

TTV - кандидат в возбудители посттранфузионного гепатита.

В 1997 г японский ученый Нишизава сообщил об обнаружении фрагментов ДНК ранее неизвестного вируса у пациентов после переливания крови через 8-11 недель и при развитии гепатита. ДНК - содержащий вирус, имеет кольцевую ДНК, размером 30-50 нм, без липидной оболочки. Отнесен к семейству парви- , затем к семейству цирко- , или первый член нового семейства цирцино - (опоясывающий крут). Установлено 2 генотипа.

Основной орган репликации - печень, затем в желчь, затем в кишечник и в фекалии. Он обнаружен в слюне, эякуляте, вагинальном секрете.

Лабораторная диагностика. ПЦР, обнаружение AT в реакции преципитации.

Вирус может персистировать 22 года. Этиологическая роль не доказана окончательно. Интерфероны позволяют добиться элиминации вируса. Возможен и фекально-оральный путь инфицирования.

SENV - ДНК-вирус, неклассифицируемый. Парентеральный путь передачи. Открыт в 1999 году сотрудником итальянской фирмы DiaSorin Даниилом Пери. Анализ различных изолятов установил существование 8 вариантов этого вируса от А до Н. ДНК одноцепочечная. представляет линейную молекулу протяженностью 3800 нуклеотидовс тремя открытыми рамками считывания, обладающих вариабельностью. По своим свойствам этот вирус подобен TTV. Обнаруживают этот вирус у доноров, у наркоманов, убольных гепатитом В.и С.

Для диагностики разработана ПЦР тест-система с последующим выявлением продуктов амплификации в ИФА.