- •Шаронова н.Л., Пахомова в.М., Бунтукова е.К. Экология почвенной микробиоты и диагностика почв
- •Содержание
- •Глава 5. Влияние сельскохозяйственного использования почв на почвенную микробиоту 107
- •Глава 6. Влияние антропогенной деградации биоценозов на почвенную микробиоту 167
- •Введение
- •Глава 1. Общие представления о почвенной микробиоте
- •Почвенные водоросли
- •Почвенные животные
- •Простейшие
- •Коловратки
- •Нематоды
- •Тихоходки
- •Членистоногие
- •Почвенные грибы
- •Прокариоты
- •Цианобактерии
- •Протеобактерии
- •Спирохеты
- •Цитофаги
- •Грамположительные бактерии
- •Микоплазмы
- •Архебактерии
- •Глава 2. Специфика почвы как среды обитания микроорганизмов
- •Твердая фаза почвы
- •Жидкая фаза почвы
- •Газовая фаза почвы
- •Концентрация ионов водорода
- •Окислительно-восстановительные условия
- •Температура
- •Глава 3. Основные принципы биологической индикации и диагностики почв
- •Ботаническая и зоологическая биоиндикация и диагностика почв
- •Почвенно-альгологическая индикация
- •Микробиологическая диагностика и биологическая активность почв
- •Биологическая индикация загрязнения почвенной среды и самоочищения почв
- •Глава 4. Влияние промышленного загрязнения на почвенную микробиоту
- •Загрязнение тяжелыми металлами
- •Концепция предельно допустимых концентраций (пдк) тяжелых металлов в почве
- •Влияние тяжелых металлов на микроорганизмы в почве
- •Микробиологическое нормирование загрязнения почв тяжелыми металлами
- •Радиоактивное загрязнение
- •Загрязнение нефтью и нефтепродуктами
- •Влияние углеводородного загрязнения почв на показатели комплекса микромицетов
- •Влияние загрязнения углеводородами на водоросли
- •Биодеградация нефти в почве
- •Воздействие кислых дождей
- •Глава 5. Влияние сельскохозяйственного использования почв на почвенную микробиоту
- •Микробиологические аспекты загрязнения почв пестицидами
- •Влияние пестицидов на почвенные микроорганизмы
- •Микробиологические подходы к оценке действия пестицидов
- •Детоксикация пестицидов в почве
- •Влияние внесения минеральных удобрений
- •Влияние минеральных удобрений на общую численность и биомассу микроорганизмов в почве
- •Влияние минеральных удобрений на численность различных физиологических групп микроорганизмов и активность процессов азотфиксации и денитрификации в почве
- •Минеральные удобрения как фактор воздействия на видовой состав почвенных микроорганизмов и устойчивость микробных систем почв к удобрениям
- •Оценка устойчивости микробных систем различных почв к воздействию минеральных удобрений
- •Влияние длительного применения минеральных удобрений на микробную систему почв
- •Влияние эрозионных процессов
- •Глава 6. Влияние антропогенной деградации биоценозов на почвенную микробиоту
- •Влияние рекреационной и пастбищной дегрессии почв на микроорганизмы
- •Влияние рубки леса на микроорганизмы
- •Лабораторный практикум работа 1. Определение численности микроорганизмов различных физиологических групп в почве
- •1. Приготовление плотных и жидких питательных сред для выявления разных физиологических групп микроорганизмов
- •Ход работы
- •2. Выявление групп микроорганизмов методом обрастания комочков почвы
- •3. Взятие средней почвенной пробы и подготовка образца к микробиологическому анализу
- •4. Приготовление почвенной суспензии
- •Учет различных групп микроорганизмов
- •Материалы и оборудование
- •Работа 2. Исследование реакции микроорганизмов на факторы внешней среды
- •Ход работы
- •Материалы и оборудование
- •Работа 3. Исследование микробиоценозов почвы и определение ее биологической активности
- •1. Исследование микробоценозов почвы методом обрастания стекол по Холодному - Росси Ход работы
- •2. Определение биологической активности почвы по интенсивности разложения полотна методом Мишустина – Вострова - Петровой Ход работы
- •3. Определение биологической активности почвы по интенсивности разложения целлофановых мембран методом Гузева – Иванова - Левина Ход работы
- •4. Определение изменений в инициированном микробном сообществе Ход работы
- •Материалы и оборудование
- •Работа 4. Выявление ризосферной и корневой (ризопланы) микрофлоры методом теппер
- •Ход работы
- •Материалы и оборудование
- •Работа 5. Исследование свободноживущих и симбиотических азотфиксирующих бактерий
- •Ход работы
- •Материалы и оборудование
- •Работа 6. Исследование азотфиксирующей активности ацетиленовым методом в лабораторных условиях
- •Ход работы
- •Материалы и оборудование
- •Работа 7. Определение мобилизуемых запасов фосфора и калия в почве по методу буткевича
- •Ход работы
- •Материалы и оборудование
- •Работа 8. Определение токсичности водных экстрактов почвы и индивидуальных соединений с использованием в качестве тест-объекта бактерий pseudomonas putida
- •Ход работы
- •Материалы и оборудование
- •Работа 9. Определение общей микробной биомассы в почве
- •Ход работы
- •Материалы и оборудование
- •Работа 10. Определение ферментативной активности почвы
- •1. Газометрический метод определения активности каталазы в почве
- •Ход работы
- •Ход работы
- •3. Определение активности инвертазы в почве
- •Ход работы
- •2. Определение активности дегидрогеназы в почве
- •4. Определение активности уреазы в почве
- •Ход работы
- •Материалы и оборудование
- •Приложение
- •Глоссарий
- •Список использованной и рекомендованной литературы
Влияние внесения минеральных удобрений
Продуктивность современного сельского хозяйства в значительной степени зависит от использования минеральных и органических удобрений. По оценке американских ученых, удельный вес минеральных удобрений в системе мер повышения урожаев достигает 41 %, по данным немецких специалистов - 50 %, а, по мнению французских исследователей, - даже 50-70%. Мировое производство туков составляет в наши дни 120 млн. т. в год.
В нашей стране производство минеральных удобрений в послевоенные годы стало значительно расширяться (табл. 8). О росте применения удобрений и их роли в повышении урожайности сельскохозяйственных культур свидетельствует и зарубежный опыт (табл. 9).
Практика использования удобрений постоянно расширяется и совершенствуется. Однако химизация земледелия будет высокоэффективна только при условии правильного и рационального использования удобрений.
Эффективность применения удобрений зависит не только от физиологических особенностей растений, но и от изменения почвенной среды как биогенной системы, от характера протекающих в почве микробиологических процессов. Минеральные удобрения нередко поступают в агроэкосистемы в гораздо большем количестве, чем требуется для получения первичной продукции растений. В таких случаях наносится не только прямой экономический ущерб, но и усиливается эвтрофикация водоемов, снижается продуктивность почвы и качество урожая растений, что имеет нежелательные последствия для здоровья людей и нарушает сложившееся в природе равновесие.
В практике земледелия бесполезно теряется до 30-50 % всех вносимых минеральных удобрений. Из 23 млн. т азота удобрений, вносимых в пахотные земли, только около 50 % выносится с урожаем, остальное утрачивается, уходя в атмосферу вследствие процессов денитрификации (7-8 млн. т) или смывается и поступает в поверхностные и подземные природные воды (до 2 млн. т). Выделение оксидов азота в атмосферу влечет за собой не только экономические потери, но и грозит нарушением озонового экрана планеты.
В наши дни возникла угроза локального и регионального повышения концентрации соединений азота до уровня, токсичного для человека. Данные по балансу азота, полученные с помощью изотопа 15N, свидетельствуют о том, что в полевых условиях растениями усваивается лишь около 40 %, в отдельных случаях - 60-70 % действующего вещества азотных удобрений; 18-33 % азота иммобилизуется в почве, а 10- 30 % его улетучивается в виде различных газообразных соединений. Потери азота зависят от дозы вносимых удобрений и соотношения содержания азота и других питательных элементов, сроков и способов внесения, формы азотных удобрений и особенностей технологии их применения, а также от почвенно-климатических условий местности.
Таблица. 8
Поставка минеральных удобрений сельскому хозяйству и внесение их под основные сельскохозяйственные культуры
(по В.Д. Панникову и В.Г. Минееву)
Показатели |
В среднем за годы |
|
1971-1975 |
1976-1980 |
|
Поставка минеральных удобрений: всего, тыс. т питательных веществ на 1 га пашни, кг Внесено под сельскохозяйственные культуры, кг/га: зерновые в том числе под пшеницу сахарную свеклу хлопчатник картофель Урожайность сельскохозяйственных культур, кг/га: зерновых пшеницы озимой пшеницы хлопчатника сахарной свеклы картофеля |
14034 62,1
38 34 305 365 221
14,7 14,5 22,5 27,3 217 113 |
18064 80,90
51 39 460 409 272
16,0 16,4 24,7 29,3 237 117 |
Таблица 9
Применение минеральных удобрений (кг/га пашни и многолетних насаждений) и урожайность важнейших сельскохозяйственных культур )ц/га) в некоторых индустриально развитых странах
(по В.Д. Панникову и В.Г. Минееву)
Страна |
Показатель |
|
|
Годы |
|
|
||
1961- 1965 |
1966- 1970 |
1971- 1975 |
1976- 1980 |
1981- 1982 |
||||
США |
Внесено удобрений |
53 |
76 |
94 |
106 |
107 |
||
|
Урожай: |
|
|
|
|
|
||
|
зерновых |
28,1 |
33,0 |
35,6 |
39,7 |
43,5 |
||
|
сахарной свеклы |
423 |
394 |
425 |
447 |
446 |
||
Канада |
Внесено удобрений |
12 |
19 |
25 |
38 |
45 |
||
|
Урожай: |
|
|
|
|
|
||
|
зерновых |
10 |
20,6 |
20,5 |
22,0 |
24,3 |
||
|
сахарной свеклы |
314 |
314 |
293 |
360 |
418 |
||
Великобритания |
Внесено удобрений |
200 |
240 |
254 |
290 |
324 |
||
|
Урожай: |
|
|
|
|
|
||
|
зерновых |
34,4 |
37,7 |
38,3 |
44,7 |
51,7 |
||
|
сахарной свеклы |
360 |
368 |
336 |
351 |
386 |
||
ФРГ |
Внесено удобрений |
315 |
345 |
393 |
430 |
433 |
||
|
Урожай: |
|
|
|
|
|
||
|
зерновых |
30,5 |
36,8 |
37,2 |
42,9 |
46,5 |
||
|
сахарной свеклы |
384 |
443 |
447 |
468 |
514 |
||
Франция |
Внесено удобрений |
142 |
195 |
205 |
290 |
360 |
||
|
Урожай: |
|
|
|
|
|
||
|
зерновых |
26,1 |
35,3 |
28,1 |
43,9 |
47,7 |
||
|
сахарной свеклы |
382 |
427 |
431 |
461 |
487 |
||
Болгария |
Внесено удобрений |
53 |
140 |
148 |
173 |
221 |
||
|
Урожай: |
|
|
|
|
|
||
|
зерновых |
19,2 |
25,0 |
32,7 |
35,5 |
40,6 |
||
|
сахарной свеклы |
182 |
210 |
236 |
249 |
257 |
||
Венгрия |
Внесено удобрений |
56 |
97 |
198 |
278 |
267 |
||
|
Урожай: |
|
|
|
|
|
||
|
зерновых |
20,5 |
26,0 |
35,1 |
42,8 |
47,0 |
||
Особое внимание, как наиболее опасным по последствиям применения уделяют азотным удобрениям. Синтетическое производство азотных минеральных удобрений из азота атмосферы было начато в 20-х гг. XX века. Сейчас его объем составляет более 80 млн. т. азота ежегодно. Уровень применения азотных удобрений в виде нитратов, аммонийных удобрений, мочевины в 1985 – 86 гг. составлял в мире в среднем 51 кг N/ га. Причем в разных регионах земного шара дозы сильно отличались: в Африке 12 кг/га, в Европе 123 кг/га.
Отрицательные последствия внесения азотных удобрений связаны с деятельностью почвенных микроорганизмов, участвующих в трансформации азота в биосфере и производящих процессы азотфиксации, аммонификации, нитрификации, денитрификации.
На первом месте по токсическим последствиям для человека рассматривается процесс нитрификации – трансформации аммиачных соединений в нитриты и нитраты, в результате которого содержание нитратов и нитритов, поступающих в грунтовые воды увеличивается. Использование питьевой вод и пищи с высоким содержанием нитратов и нитритов приводит к возникновению отравлений и специфических заболеваний.
Попадая в кровь животных и человека нитраты переводят двухвалентное железо, содержащееся в гемоглобине крови в трехвалентное. Образующееся при этом соединение – метгемоглобин – не способно к переносу кислорода. В результате происходит ухудшение снабжения организма кислородом, при замещении 20% гемоглобина у людей наблюдается анемия, а при замещении 80% - даже летальный исход. Установлено, что от содержания нитратов в пище и воде также зависит и заболеваемость раком.
В целях охраны здоровья населения ВОЗ установлены нормы потребления нитратов и нитритов, которые не должны превышать для нитратов 200 мг, а для нитритов 10 мг/ день. Предельно допустимые концентрации нитратов в питьевой воде не должны превышать 22 мг/л в умеренных широтах, а в тропиках – 10 мг/л.
Причиной появления практически половины загрязняющих почвы и воды нитратов считают внесение минеральных удобрений.
Нитрификация в почвах может протекать двумя путями. Автотрофная нитрификация осуществляется специфическими нитрифицирующими бактериями двух родов, специализированных в отношении проводимых реакций. Бактерии, окисляющие аммиак до нитритов – представители Nitrosomonas и бактерии, окисляющие нитриты до нитратов – представители Nitrobacter. Наиболее эффективно процесс автотрофной нитрификации протекает в почвах при хорошей аэрации, влажности, нейтральной среде, невысоком содержании органических веществ. Результатом реакции является образование нитритов и нитратов с возможным промежуточным образованием газообразных соединений (NOx).
NH+4 → NH2OH → [NOH] → NO-2 → NO-3
В последнее время установлено, что процесс нитрификации могут проводить не только специализированные автотрофные бактерии, но и гетеротрофные почвенные микроорганизмы. В отличие от автотрофной нитрификации, процесс гетеротрофной нитрификации не является, по современным представлениям, основным источником для роста клеток и продукции биомассы. Скорость процесса гетеротрофной нитрификации обычно ниже. Он протекает в условиях, отличных от автотрофной – при наличии органического вещества, слабо кислом рН, дефиците кислорода. Он часто более выражен для лесных почв, в то время как процесс автотрофной нитрификации – для окультуренных. Опасными последствиями гетеротрофной нитрификации в почвах может быть не только увеличение содержания нитратов, но и синтез промежуточных соединений – гидроксиламина, нитрозосоединений, которые даже в небольших количествах могут давать токсический и/или канцерогенный эффект для человека.
В целях снижения потерь азота удобрений и экотоксикологических последствий для уменьшения поступления нитратов почвы и грунтовые воды разработана группа веществ, тормозящих процесс нитрификации, которые получили название N – serve. Это, например, такие вещества как 2-хлоро-6(трихлорметил)пиридин(нитрапирин), дициандиамид, КМП и др. Однако было установлено, что эти вещества в производственных дозах ингибируют только процессы автотрофной нитрификации и не влияют на гетеротрофный процесс. Кроме того, внесение этих соединений может оказывать негативное влияние на почвенную биоту.
Внесение азотных удобрений оказывает большое воздействие и на другие этапы микробной трансформации азота в почве – азотфиксацию и денитрификацию.
Биологическая фиксация азота в настоящее время превышает небиологическую. Тем не менее, ситуация приближается к переломной в ближайшие годы объем промышленного синтеза окажется сопоставимым с биологической фиксацией. Последствия этого представляются экологически опасными. Биологически фиксировать азот могут микроорганизмы симбиотически живущие с растениями и свободноживующие в почве. По сравнению с удобрениями биологический азот безвреден для человека, повышает урожайность растений, а экономические затраты, необходимые для его получения несопоставимо меньше, чем при производстве минеральных удобрений. Изменение активности азотфиксации во многом определяется формой вносимых соединений азота.
Большое внимание в последнее время уделяется изменению процесса денитрификации при внесении азотных удобрений. Денитрицирующие бактерии обладают способностью восстанавливать нитрат через нитрит до газообразной закиси азота:
Сорг + NO-3 → (СН2Оn) + СО2 + N2O + N2
Этот процесс наиболее активно протекает в анаэробных условиях, например, при переувлажнении и наличии органического вещества. Интенсивность процесса зависит от почвенно-экологических условий, вносимых удобрений, наличия органического вещества и особенно интенсивно протекает в ризосфере растений.
Большую тревогу увеличение поступления газообразных соединений азота, наблюдающееся при денитрификации, автотрофной и гетеротрофной нитрификации в атмосферу вызывает в связи с гипотезой разрушения озонового слоя в результате реакций этих газов и озона
Сельское хозяйство является основным источником поступления о биосферу соединений фосфора. Ассортимент фосфатов постоянно изменяется в зависимости от требований сельского хозяйства. В общем объеме выпуска фосфорных удобрений постоянно возрастает доля концентрированных и комплексных форм.
От других биогенных элементов фосфор отличается практическим отсутствием газообразных соединений и тем, что большинство фосфатов плохо растворимы. Тем не менее, большое количество соединений фосфора ежегодно поступает в природные воды вследствие смыва фосфорных удобрений с полей под воздействием орошения и эрозионных процессов; в результате возрастания производства различных фосфоросодержащих препаратов, используемых в сельском хозяйстве, быту, промышленности; вследствие вовлечения в биогеохимический круговорот фосфора, входящего в состав горных пород, - фосфоритов и апатитов.
По мнению В.А. Ковды (1985), до 14-17 млн. т фосфора ежегодно поступало с континентов планеты в Мировой океан с тенденцией к возрастанию. Постоянная миграция вызывает постоянное увеличение содержания фосфора в водоемах суши. Подсчитано, что только за счет поверхностного смыва с каждого гектара пашни ежегодно уносится до 10 кг фосфора.
Кроме азотных и фосфорных удобрений в современном земледелии используется широкий ассортимент калийный удобрений, поставки которых достигают 12 млн. т. в год. Большинство калийных удобрений содержит балластные вещества.
Решение проблемы рационального и эффективного использования минеральных удобрений возможно только на основе комплексного подхода, большое значение в котором принадлежит микробиологическим исследованиям. Внесение минеральных удобрений резко интенсифицирует микробиологические процессы в почвах. Это до определенного предела может рассматриваться как положительное явление, если ставится задача повышения урожая, так как молодая система может продуцировать высокий урожай. Однако чрезмерная активизация микробиоты может быть и вредной, так как процессы, направленные на восстановление нарушенного равновесия, приводят к прямым потерям минеральных удобрений, ухудшению физико-химических и биологических свойств почвы, другим серьезным экологическим последствиям.
Необходимость применения минеральных удобрений одновременно с повышением урожайности вызывает загрязнение почв биогенными элементами и балластными веществами. Например, при внесении в почву калийного удобрения KCl вместе с необходимым для растений калием вносится хлор; при мелиорации солонцовых почв фосфогипсом в почву попадает некоторое количество стронция.
Если балластные соединения хорошо растворимы, они вымываются из почвы и поступают в поверхностные и подземные воды, загрязняя их. Если они малорастворимы, то аккумулируются в почве и при достижении определенной концентрации поступают в растения и далее по пищевым (трофическим) цепям в организм животных и человека. Иногда содержание балластных веществ может достигать токсичных уровней и стать причиной нарушений здоровья человека. Токсичного уровня может достичь и содержание в почве биогенных элементов, чаще всего азота в форме нитратов, что может стать причиной отравления сельскохозяйственными продуктами.
Основной причиной загрязнения биосферы являются грубые нарушения научно обоснованной технологии транспортировки минеральных удобрений, их хранения и внесения в почву. Чаще всего загрязняющие элементы, содержащиеся в удобрениях, поступают в окружающую среду:
1) при транспортировке от завода до поля;
2) вследствие смыва удобрений с поверхности полей в реки, озера, моря и вымывания по профилю почвы до грунтовых вод;
3) в процессе водной и ветровой эрозии почвы;
4) вследствие аккумуляции избыточного количества удобрений в почвенном профиле при передозировке, или неравномерном внесении;
5) при бесконтрольном использовании в качестве минеральных удобрений отходов различных отраслей промышленности.
Внесение высоких доз удобрений и длительное их применение не всегда дает ожидаемую прибавку урожая. Коэффициент использования азота сельскохозяйственными растениями снижается по мере возрастания доз азотных удобрений.
Так, длительное применение азотных и калийных удобрений приводило на дерново-подзолистых почвах к снижению урожайности сельскохозяйственных культур. Двойственная природа действия минеральных удобрений заключается в том, что, снабжая растения питательными веществами, удобрения обеспечивают повышение урожая и, ухудшая свойства почвы, «скрыто» понижают его, Поэтому в первый год их применения дают значительную прибавку урожая, при повторных внесениях эффект от них снижается, и затем они могут оказывать даже отрицательное действие. Это явление, названное скрытым негативным действием удобрений, не удается объяснить изменением только агрохимических свойств дерново-подзолистых почв. Реально было бы предположить, что длительное применение минеральных удобрений приводит к существенным изменениям в структуре комплекса почвенных микроорганизмов, активизации и росту численности токсинообразующих микробов. Известно, что фитотоксичные микроорганизмы широко распространены в различных почвах и микробные метаболиты могут играть важную роль в возникновении токсикоза почв, в частности при монокультуре.
Таким образом, необходимо установить пределы устойчивости микробной системы почв, выявить взаимосвязь высоких доз минеральных удобрений с изменениями в составе и функционировании почвенных микроорганизмов, с проявлением микробного токсикоза.
При оценке антропогенного воздействия недостаточно применения одного-двух тестов, важна характеристика изменения всех экологической обстановки с учетом предельно допустимой нагрузки на экосистему. Микробиологические методы исследования почвы весьма разнообразны по своей принципиальной сущности, и каждый из них дает ответ на определенный частный вопрос влияния удобрений на микробиоту. В связи с этим решение проблемы в целом возможно лишь при использовании всего комплекса современных подходов, их серьезном критическом анализе.
Поиск оптимальных с позиции, как охраны окружающей среды, так и повышения урожая растений доз и форм азотных удобрений для различных почв является актуальной задачей. При этом важно повысить долю «биологического» азота в питании растении и сократить до минимума уровень газообразных потерь.
