Ферментативный гидролиз крахмала

Фермент амилаза, содержащийся в слюне, соке поджелудочной железы, крови, печени, мозге, катализирует гидролиз крахмала. Последовательно процесс расщепления крахмала можно представить следующим образом.

 

Реактивы: раствор слюны (свежую слюну разводят дистиллированной водой в 5 раз); 1 %-й раствор крахмала; раствор иода в иодиде калия (1 г KI растворяют в нескольких миллилитрах воды. В концентрированном растворе соли растворяют 1 г иода и разбавляют водой до 300 см³.); 5 %-й раствор гидроксида натрия; 5 %-й раствор сульфата меди.

Оборудование: пробирки; водяная баня.

Ход работы

Задание 1. Гидролиз крахмала.

1. В две пробирки налейте по 2 см³ 1 %-го раствора крахмала.

2. В одну пробирку долейте 1 см³ разведенной слюны, а в другую – 1 см³ воды (для контроля) и поставьте пробирки на 10 мин. в водяную баню или термостат, нагретые до 37 – 38 ^оС (внимательно следите за температурой, не допуская ее повышения).

3. По окончании реакции проанализируйте содержимое пробирок на содержание крахмала и мальтозы, как указано в заданиях 2 и 3.

Задание 2. Обнаружение продуктов гидролиза крахмала.

1. Из опытной и контрольной пробирок задания 1 отлейте в отдельные пробирки по 1 см³ растворов.

2. Добавьте в каждую пробирку по 1 капле раствора иода и перемешайте.

3. Сравните окраску полученных растворов.

Задание 3. Обнаружение мальтозы.

1. К оставшимся растворам опытной и контрольной пробирок добавьте по 1 капле раствора сульфата меди и по 5 капель раствора щелочи.

2. Содержимое пробирок перемешайте и поместите их в кипящую водяную баню.

3. Сравните окраску полученных растворов.

Оформление результатов.

Запишите схемы частичного и полного гидролиза крахмала. Объясните полученные результаты заданий 2 и 3.

ЛАБОРАТОРНАЯ  работа №2

Инактивация ферментов высокой температурой

 Поскольку ферменты являются белками, они весьма чувствительны к температуре, при которой протекает реакция. Температурный оптимум действия ферментов теплокровных животных составляет 37 – 38 ^оС. При небольшом повышении температуры скорость ферментативных реакций вначале повышается, но уже при дальнейшем нагревании (выше 50 ^оС) падает, а при 70 – 80 ^оС утрачивается.

Реактивы: раствор слюны (cвежую слюну разводят водой в 5 раз); 1 %-й раствор крахмала; раствор иода в иодиде калия (см. работу №11); 5 %-й раствор гидроксида натрия; 5 %-й раствор сульфата меди.

Оборудование: пробирки; водяная баня.

Ход работы

Задание  1

1. В две пробирки налейте по 1 см³ разведенной слюны.

2. Содержимое одной пробирки нагрейте до кипения и прокипятите 2-3 мин.

3. Затем в обе пробирки добавьте по 1 см³ раствора крахмала и поставьте их на 10 мин. в водяную баню, нагретую до 38 ^оС.

Задание 2.

Из опытной и контрольной пробирок задания 1 отлейте в отдельные пробирки по 1 см³ их содержимого.

1. Добавьте в каждую пробирку по 1 капле раствора иода и тщательно перемешайте.

2. Сравните окраску полученных растворов.

Задание 3. Обнаружение мальтозы.

1. К оставшимся растворам опытной и контрольной пробирок добавьте по 1 капле раствора сульфата меди и по 5 капель раствора щелочи.

2. Содержимое пробирок перемешайте и поместите их в кипящую водяную баню.

3. Сравните окраску полученных растворов.

Оформление результатов

Объясните полученные результаты заданий 2 и 3. Сделайте вывод о влиянии температуры на активность ферментов.

ЛАБОРАТОРНАЯ  работа №3