5. Анализ различных видов гемолиза.

Гемолиз - это разрушение эритроцитов, сопровождающееся выходом гемоглобина в раствор (окрашивается в красный цвет и становится прозрачной – «лаковая кровь»). Виды гемолиза: осмотический, химический, биологический, температурный (холодовой, тепловой), механический.

Оснащение: штатив с пятью пробирками, пипетки, физиологический раствор, дистиллированная вода, 0,1%-ный раствор HCl, 5%-ный раствор глюкозы, сапонин, исследуемая донорская кровь.

Ход работы: в штатив ставят 5 пробирок, в каждую из которых наливают по 3 мл соответственно физиологического раствора, дистиллированной воды, 0,1%-ного раствора HCl, 5%-ного раствора глюкозы, раствора сапонина. Во все 5 пробирок вносят пипеткой по 2 капли крови. Рассматривая содержимое всех 5 пробирок, сравнивают результаты.

Рекомендации к оформлению работы: Определите наличие или отсутствие гемолиза в каждой пробирке. Опишите механизм гемолиза в каждой пробирке.

Результаты работы:

Вывод:

5. Решение ситуационных задач: анализ гемограмм.

Тема зачтена

___________________подпись преподавателя

ОБРАЗЦЫ ГЕМОГРАММ ДЛЯ АНАЛИЗА (леч. факультет)

Гемограмма № 1		Гемограмма № 2
Гемоглобин - 120 г/л Эритроциты - 4,24•1012/л Лейкоциты - 6,0•109/л базофилы - 1% эозинофилы - 4% нейтрофилы: миелоциты - 0% метамиелоциты - 0% палочкоядерные - 15% сегментоядерные - 58% лимфоциты - 19% моноциты - 3% Тромбоциты - 270•109/л		Гемоглобин - 140 г/л Эритроциты - 5,0•1012/л Лейкоциты - 6,2•109/л базофилы - 1% эзозинофилы - 15% нейтрофилы: миелоциты - 0% метамиелоциты - 0% палочкоядерные 5% сегментоядерные - 56% лимфоциты - 20% моноциты - 3% Тромбоциты - 300•109/л
Гемограмма № 3		Гемограмма № 4
Гемоглобин - 80 г/л Эритроциты - 2,8•1012/л Лейкоциты - 8,8•109/л базофилы - 0% эозинофилы - 0% нейтрофилы: миелоциты - 0% метамиелоциты - 0% палочкоядерные - 20% сегментоядерные - 25% лимфоциты -50% моноциты -5% Тромбоциты -112•109/л		Гемоглобин - 58 г/л Эритроциты - 3,2•1012/л Лейкоциты - 33,0•109/л базофилы - 0% эозинофилы - 0% нейтрофилы: миелоциты - 6% метамиелоциты - 21% палочкоядерные - 29% сегментоядерные - 41% лимфоциты - 2% моноциты - 1% Тромбоциты - 150•109/л
Гемограмма № 5	Гемограмма № 6
Гемоглобин - 135 г/л Эритроциты - 5,3•1012/л Лейкоциты - 6,6•109/л базофилы - 1% эозинофилы - 15% нейтрофилы: миелолциты - 0% метамиелоциты - 0% палочкоядерные - 6% сегментоядерные - 67% лимфоциты - 10% моноциты - 1% Тромбоциты - 300•109/л	Гемоглобин - 200 г/л Эритроциты - 6,3•1012/л Лейкоциты - 6,6•109/л базофилы - 1% эозинофилы - 5% нейтрофилы: миелолциты - 0% метамиелоциты - 1% палочкоядерные - 6% сегментоядерные - 59% лимфоциты - 20% моноциты - 8% Тромбоциты - 280•109/л

ОБРАЗЦЫ ГЕМОГРАММ ДЛЯ АНАЛИЗА (пед. факультет)

Гемограмма № 1	Гемограмма № 2
Возраст - новорожденный Гемоглобин - 220 г/л Эритроциты – 6,25•1012/л Лейкоциты – 5,0•109/л базофилы - 0% зозинофилы - 3% нейтрофилы: метамиелоциты - 3% палочкоядерные - 26% сегментоядерные - 38% лимфоциты - 24% моноциты - 6% Тромбоциты - 142•109/л	Возраст – 5 дней Гемоглобин - 200 г/л Эритроциты-5,75•1012/л Лейкоциты - 16,2•109/л базофилы - 0% зозинофилы - 4% нейтрофилы: метамиелоциты - 2% палочкоядерные 5% сегментоядерные - 36% лимфоциты - 44% моноциты - 9% Тромбоциты - 129•109/л
Гемограмма № 3	Гемограмма № 4
Возраст – 1 год Гемоглобин - 122 г/л Эритроциты – 4,05•1012/л Лейкоциты - 2,98•109/л базофилы - 0% эозинофилы - 2% нейтрофилы: метамиелоциты - 0% палочкоядерные - 12% сегментоядерные - 26% лимфоциты -54% моноциты -6% Тромбоциты -209•109/л	Возраст – 5 лет Гемоглобин - 130 г/л Эритроциты - 4,15•1012/л Лейкоциты - 7,2•109/л базофилы - 0% зозинофилы - 3% нейтрофилы: метамиелоциты - 0% палочкоядерные - 2% сегментоядерные - 44% лимфоциты - 46% моноциты - 5% Тромбоциты – 217•109/л
Гемограмма № 5	Гемограмма № 6
Возраст – 9,5 лет Гемоглобин - 132 г/л Эритроциты – 4,15•1012/л Лейкоциты - 6,2•109/л базофилы - 0% зозинофилы - 2% нейтрофилы: метамиелоциты - 0% палочкоядерные - 2% сегментоядерные - 61% лимфоциты - 29% моноциты - 6% Тромбоциты - 250•109/л	Возраст – 5 лет Гемоглобин - 140 г/л Эритроциты - 4,5•1012/л Лейкоциты - 7,5•109/л базофилы - 1% зозинофилы - 4% нейтрофилы: метамиелоциты - 0% палочкоядерные - 5% сегментоядерные - 70% лимфоциты - 15% моноциты - 5% Тромбоциты – 217•109/л

Тема раздела: «ФИЗИОЛОГИЯ КРОВИ»
	дата

Занятие №3: Система гемостаза.

Группы крови. Резус-фактор.

Проблема переливания крови

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ: Изучить основные компоненты системы гемостаза, усвоить основные представления о группах крови, их определение.

ВОПРОСЫ ДЛЯ ПОДГОТОВКИ:

1. Понятие о системе гемостаза. Основные компоненты системы гемостаза, их характеристика. Роль сосудистой стенки и тромбоцитов в системе гемостаза.

2. Сосудисто-тромбоцитарный гемостаз, его характеристика.

3. Коагуляционный гемостаз, фазы, характеристика.

4. Противосвертывающие механизмы поддержания гемостаза. Фибринолизирующие механизмы.

5. Характеристика групповых систем крови человека. Характеристика системы АВО.

6. Определение групп крови системы АВО при помощи стандартных сывороток.

7. Резус-фактор. Значение определения резус-принадлежности. Проблема резус-конфликта между матерью и плодом.

8. Правила переливания крови. Основные принципы подбора донорской крови.

Дополнительно для пед. факультета

9. Особенности функционирования системы гемостаза у детей.

10. Особенности групповых признаков крови и резус-принадлежности у плода и детей.

ОФОРМИТЬ В ПРОТОКОЛЕ:

Упрощенную схему свертывания крови

ЛАБОРАТОРНЫЕ РАБОТЫ:

1. Определение групп крови при помощи стандартных сывороток.

2. Определение группы крови и резус-факторной принадлежности методом цоликлонов.

3. Определение свертываемости крови по способу Бюркера.

4. Решение ситуационных задач.

5. Компьютерный контроль.

12. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУПП КРОВИ ПРИ ПОМОЩИ СТАНДАРТНЫХ СЫВОРОТОК.

Группы крови отличаются друг от друга содержанием агглютиногенов и агглютининов. По системе АВО выделяют четыре группы крови: I (0_), II (А_), III (В_), IV (АВ). В основе определения групповой принадлежности крови лежит реакция агглютинации, обусловленная наличием в мембране эритроцитов определенных агглютиногенов (А, В), а в плазме крови – агглютининов (, ). Реакция агглютинации происходит при контакте одноименных агглютиногенов и агглютининов с образованием одноименных агглютинационных пар (например: А и  или В и ).

Оснащение: пробирки с исследуемой кровью, 2 серии стандартных сывороток I, II, III и IV группы, планшетка, стеклянные палочки, спирт, марлевые салфетки или ватные шарики, физиологический раствор.

Ход работы: Определение группы крови проводится при температуре +15° - +25°С. На маркированную планшетку наносят (не смешивая!) по капле стандартной сыворотки I, II, III группы (2 серии в соответствующие лунки), содержащие агглютинины: I -  и , II - , III - . После их нанесения получается шесть капель, расположенных в два ряда. Стеклянной палочкой переносят небольшое количество крови в первую лунку с каплей сыворотки I группы, затем вторым, чистым концом палочки такое же количество крови переносят во вторую лунку с сывороткой II группы. Третью каплю переносят в третью лунку с сывороткой III группы промытым и насухо вытертым концом палочки. Это же проделывают со стандартными сыворотками второй серии. Соотношение крови и сыворотки – 1:10. Каждый раз тщательно размешивают кровь в капле сыворотки, пока смесь не станет равномерно розового цвета. За ходом реакции, в общей сложности, наблюдают не менее 5-ти минут, периодически покачивая планшетку. В капли, где к третьей минуте наблюдения произошла агглютинация, вносят по капле физиологического раствора и наблюдают еще две минуты. Добавление физиологического раствора не разрушает истинной агглютинации и позволяет дифференцировать ее с псевдоагглютинацией, обусловленной самопроизвольным склеиванием эритроцитов в монетные столбики. При наличии агглютинации капля становится бесцветной, а эритроциты склеиваются в виде комочков. Результат оценивается по наличию агглютинации. Эритроциты группы 0 (I) не содержат антигенов и в реакцию агглютинации не вступают. Эритроциты группы А (II) не дают агглютинации только с сывороткой своей группы, эритроциты В (III) также не дают агглютинации только с сывороткой своей группы. Если во всех сыворотках произошла агглютинация, то для исключения неспецифической панагглютинации и подтверждения, что это эритроциты IV группы крови, следует дополнительно исследовать их стандартной сывороткой группы АВ (IV). Для этого используется одна сыворотка, исследование проводится с соблюдением всех выше указанных условий. Сыворотка группы АВ (IV) не содержит никаких антител, а поэтому не должна давать агглютинации.

Рекомендации к оформлению работы: зарисуйте полученную картину, установите, к какой группе относится исследуемая кровь.

Р езультаты работы:

Вывод: