9. Лабораторная диагностика тб. Микроскопия мазка мокроты.

Показание: при подозрении на ТБ и наличии ТБ любых локализаций (у 85% больных поражены легкие)

Правила сбора: Сбор производят в чистые контейнеры, не загрязненные парафином или другими жирами. Объем 50мл. Желательно, чтобы пациент собирал мокроту на открытом воздухе, или в помещении, где нет других людей (специальные кабины для сбора мокроты)

Необходимо три образца мокроты: 1- при первичном обращении больного в медицинское учреждение; 2- рано утром (желательно – на следующий день после первого обращения больного); 3- в медицинском учреждении, когда пациент принесет на исследование второй образец мокроты.

Сразу после сбора, материал должен быть доставлен в лабораторию. Если транспортировка откладывается, то собранный материал следует хранить в холодильнике или в другом как можно более прохладном месте для задержки роста нежелательных микроорганизмов.

Транспортировка: биологический материал должен быть надежно упакован для предупреждения его вытекания из контейнера при ударах, повышении давления и в других ситуациях (помещают в стандартный прочный герметично закрытый контейнер, который затем упаковывается во второй контейнер, сделанный из металла, дерева или прочного картона и содержащий достаточное количество адсорбирующего материала. Бланки направлений на лабораторное исследование должны находиться отдельно от контейнеров с материалом. Для каждого транспортного контейнера должен быть подготовлен сопроводительный документ, в котором приводят сведения о пациентах и материале, взятом от них.

Прямая бактериоскопия мазка, окрашенного по методу Циля-Нильсена.- выявление КУМ

Чувствительность метода: МБТ могут быть обнаружены при наличии не менее 100.000 -1.000.000 бактериальных клеток в 1 мл патологического материала

1) окраска фуксином (с подогреванием) 2)промыть водой

3) обработка мазка 25% р-м серной ки­слоты или 3% р-м солянокислого спирта - обесцвечивание (3 минуты)

4) промыть водой 5) докрашивание ме­тиленовым синим - контрастирующая окраска (1 минута)-

Микобактерии окрашиваются в малиново-красный цвет, имеют вид тонких, слегка изогнутых палочек различной длины с утолщениями на концах или посередине, располагаются группами, парами и поодиночке. все остальные элементы мокроты и бактерии окрашены в синий или голубой цвет.

КУМ не обнаружены в 100 п/з	отрицательно
1-9 КУМ в 100 п/з	Указать точное число
10-99 КУМ в 100 п/з	+ (единичные в п/з)
1-10 КУМ в 1 п/з	++ (умеренное бактериовыделение)
Более 10 КУМ в 1 п/з	+++ (массивное бактериовыделение)

 Люминесцентная микроскопия

Чувствительность метода: 10.000 – 100.000 МБТ в 1 мл материала.

1)Производится окраска мазка флюорохромными красителями (аурамином или родамином)

2) исследование его в ультрафиолетовых лучах люминесцентного микроскопа с кварц-галогеновой лампой. При этом МБТ выглядят светящимися жёлтыми или оранжевыми палочками на темном или темно-зеленом окружающем фоне. 

0	КУМ не обнаружены
1-9 на 100 п/з	Укажите точное число
10–99 на 100 полей зрения	+
1–10 на одно поле зрения	++
> 10 на одно поле зрения	+++

Недостатки бактериоскопических методов:

-Невозможно идентифицировать микобактерии туберкулезного комплекса от нетуберкулез-ных (атипичных) микобактерий. На основании микроскопического исследова-ния возможно сделать заключение только о наличии или отсутствии в препарате кислотоустойчивых микобактерий. Отрицательный результат микроскопии не исключает диагноз туберкулеза, т.к в мокроте пациента может содержаться меньше микобактерий, чем может выявить микроскопическое исследование.

-Низкая чувствительность – необх конц – минимум 10 000 в 1 мл.

-Влияние человеческого фактора

 Преимущество методов бактериоскопии:

– быстрота (в течении 1 часа) и относительная простота исследования. Он в короткие сроки позволяет выявить наиболее эпидемически опасных больных туберкулезом.