Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Гемотрансфузиология Уч мет пособие.docx
Скачиваний:
2
Добавлен:
01.07.2025
Размер:
328 Кб
Скачать
☆

3.Определение резус-принадлежности крови больного

10. Резус-принадлежность определяется в соответствии с инструкцией, прилагаемой к сыворотке антирезус.

11. В лаборатории проводят следующие исследования:

1) реакцию агглютинации на плоскости с Цоликлонами анти-D супер;

2) методом конглютинации с применением желатина;

3) с помощью универсального реагента антирезус.

12. При всех методах определения резус-принадлежности обязательна постановка контролей, а именно включение в реакцию стандартных резус-положительных и резус-отрицательных эритроцитов, а также обязательное исследование крови на возможную аутоагглютинацию, с 10% раствором желатина (если используется метод с применением желатина) или с 33% раствором полиглюкина (если используется стандартный универсальный реагент антирезус).

4. Реакция агглютинации на плоскости с помощью цоликлонов анти-d супер

13. Наносят большую каплю (около 0,1 мл) реагента на пластинку или планшет.

14. Наносят рядом маленькую каплю (0,02-0,03 мл) исследуемых эритроцитов. Тщательно смешивают реагент с эритроцитами стеклянной палочкой.

15. Через 10-20 секунд мягко покачивают пластинку.

16. Результаты реакции учитывают через 3 минуты после смешивания, несмотря на то, что четкая агглютинация наступает в первые 30 секунд.

17. При наличии агглютинации исследуемая кровь маркируется как резус положительная, при отсутствии - как резус отрицательная.

18. Для определения резус-принадлежности ускоренным методом на плоскости при комнатной температуре могут быть использованы поликлональные сыворотки анти-D с неполными антителами, приготовленные в комбинации с коллоидами (альбумином, полиглюкином).

5. Метод конглютинации с применением 10% раствора желатина

19. Используют реагенты, содержащие неполные поликлональные антитела (сыворотки анти-D) или неполные моноклональные антитела (цоликлоны анти-D).

20. В 2 пробирки вносят по 0,02-0,03 мл осадка эритроцитов, для чего выдавливают из пипетки небольшую каплю эритроцитов и касаются ею дна пробирки. Затем в первую пробирку добавляют 2 капли (0,1 мл) желатина и 2 капли (0,1 мл) реагента, во вторую (контрольную) пробирку добавляют 2 капли (0,1 мл) желатина и 2 капли (0,1 мл) 0,9% изотонического раствора натрия хлорида.

21. Содержимое пробирок перемешивают встряхиванием, после чего их помещают в водяную баню на 15 минут или термостат на 30 минут при температуре +46°С - 48°С. По истечении указанного времени в пробирки добавляют по 5-8 мл 0,9% изотонического раствора натрия хлорида и перемешивают содержимое путем 1-2-кратного переворачивания пробирок.

22. Результат учитывают, просматривая пробирки на свет невооруженным глазом или через лупу. Агглютинация эритроцитов свидетельствует о том, что исследуемый образец крови резус положительный, отсутствие агглютинации – о том, что испытуемая кровь резус отрицательная. В контрольной пробирке агглютинация эритроцитов должна отсутствовать.

23. Для определения резус-принадлежности ускоренным методом в пробирке при комнатной температуре может быть использован универсальный реагент, представляющий собой сыворотку анти-D с неполными антителами, разведенную 33% полиглюкином.