Определение hla-генотипа, гаплотипа и фенотипа

у каждого чел-ка имеется диплоид набор хром 1 отцовская др материнская, Полный набор генов в материнской и отцовской хромосомах – генотип. Набор генов 1 хромосомы – гаплотип , его фенотип согласно принципу кодаминантности запис идентично А2, 3 В5,8. что имеется в генотипе то выражено в фенотипе Лимфоцитотоксич тест для опред HLA I и II клас. суспензию лимфоцитов смешивают и инкубируют анти-НЬА-антисывороток.Если ан­тисыворотка содержит антитела к одному из HLA-антигенов, то они свя­зываются с клеточной мембраной. Затем добавляют комплемент Клетки, несущие на мембране связанные антитела, будут разрушены при активации комплемента. Затем добавляют кот поглощается только мертвыми клетками, которые окрашиваются. Это позволяет установить HLA-антиген по антисыворотке, вызвавшей лизис. При этой пробе выявляются только серологически дефинированные (SD) HLA-антигены, которые представляют не весь спектр антигенов гис-тосовместимости, а только те из них, которые продуцируют антитела.Для идентификации антигенов гистосовместимости II класса, кодируе­мых генами HLA-DR, применяют клеточную реакцию (реакцию бласттрансформации). При этой пробе взвесь лимфоцитов смешива­ют с лимфоцитами донора. При отсутствии совместимости лимфоциты ре­ципиента подвергаются пролиферации и образуют бластные формы. Анти­гены II класса главного комплекса гистосовместимости активируют и сти­мулируют пролиферацию Т-хелперов, способных выявлять разницу в анти­генах, что недоступно при проведении серологических тестов.

Определение абсолютного и относительного количества т-лимфоцитов и их субпопуляции, рбтл и ртмл.

Метод розеткообразования (опр Т-лимфоцитов) осн на том, что на пов-ти Т-лимфоц содерж рецепторы к бараньим эритроцитам (белокСD2) Инкубируют взвесь лимфоцитов с бараньими эритроцитами, получ «розетки»-в центре Т-лимфоц, по периферии-бараньи эритроц. Е-РОК(Е-эритр, РОК-розеткообраз кл) моноклональные антитела к дифференцировоч антигенам (CD) в ИФ тесте. Для опр общег кол-ва Т-лимф прим Мон АТ к CD2,3, хелперной субпопуляции-CD4, киллерно-супрессорной-CD РБТЛ реакции бластной трансформации лимфоцитов основана на св-ве лимфоцитов в результате контакта с митогенами и Аг превращаться в лимфобласты – кл, готов – ся к делению и активно синтез-е ДНК. В кач-ве стимулятора в основном используют фитогемагглютинин ФГА. Результат оценивают 2-мя способами: 1) подсчет кол-ва кл, подвергшихся бласттрансформации, под микроскопом ( неточн.) 2) радиометрическое измерение:добав в культуру лимфоц меченый изотопом Н3 тимидин, необх для синтеза ДНК, измер кол-во включ изотопа. РТМЛ р-я торможения миграции лейкоцитов Смесь лейкоцитов, полученных из плазмы крови без примеси эритроцитов, смешивают в равных объемах со средой 199 и с ФГА-индуцированный вариант. Конц ФГА сост 10 мкг в 1 мл

Определение и химическая природа антигенов. Понятие чужеродности, антигенности, иммуногенности и специфичности антигенов.

Антигены-высосокомолекул хим соед ,кот генетич чужерод для данного орг-ма и способны вызвать против себя иммун ответ. Эпитоп - часть молекулы антигена, хар химич и структурной индивидуальн, кот обеспеч специфич антител и эфекторных т-лимфоцитов, образующ в процессе иммун отовета. Кол эпитопов зависит от структуры и размера молекулы. По структуре эпитопы: линейные и конфирмацион. Т-лимфоциты распознают линейные а В-лимф конфармационные. Те эпитопы кот распозн В-лимф и против кот синтезир антитела -гаптенами. Основная часть молекулы антигена, та что не явл гаптеном - носителем. Различ первич и вторич аутоантигены. Первичные- антигены собственных нормал тканей орг-ма. Кот в процессе формир иммун системы в эмбриоген не имели и во взрослом орган не имеют контакта с имунокомпетент клетками, так как наход за гистогематическим барьером: ткани мозга.паращет желез,Семеников хрусталика глаза. Втор- здесь компоненты клеток и тканей организма могут становится аутоантигенами по действием различ поврежд факторов. Чужеродностьо-отсутствие аналогичных субстанций в реагирующем организме, это индивид свойства антигена для каж вида детерминировано генетически. Антигеность- это мера способности вещества вызыв те или иные имунологич реакции различ интенсивности. Иммуногенность это способность создавать иммунитет. Специфичность это не антигенные особенности, благодаря кот антигены отлич друг от друга. Имунологич специфичность антигенов определ не всей макромалекулой антигена в целом а свойствами антиген детерминант. виды специфич: видовая, групповая, тканеспецефичность, стадиоспецефичность, органоидная

Связь лабораторных показателей с клиническими проявлениями ИДС у больных

Осложнения при вакцинации.

Аттенуированные вакцины против полиомиелита, кори, паротита получили всеобщее признание. С ними, однако, связан небольшой риск осложнений, например, развитие энцефалита при иммунизации против кори. При использовании живых вирусных вакцин всегда существует опасность того, что нуклеиновая кислота вируса встроится в геном хозяина или произойдет реверсия к вирулентной форме.

Очень важно иметь в виду возможность тяжелых осложнений при вакцинации больных с иммунодефицитными состояниями. Чрезвычайно важно до введения живой вакцины выявить детей с иммунодефицитом. Дети с недостаточностью клеточного иммунитета могут заболеть и умереть даже от БЦЖ. У детей, инфицированных вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ) и проявляющих признаки синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД), иммунизация БЦЖ приводит к развитию генерализованной БЦЖ-инфекции.

Живые вакцины не следует вводить больным, которые прохо­дят курс лечения кортикостероидами, иммунодепрессантами или радиотерапию, а также больным с лимфомами или лейкозами. Сюда же следует отнести и беременных женщин в связи с высокой чувствительностью плода.

Введение вакцины может привести к антигенной перегрузке на фоне иммунодефицита, что может вызвать срыв регуляторных механизмов и привести к возникновению гиперэргических реакций (аллергии), либо спровоцировать срыв естественной толерантности и вызвать тем самым аутоиммунный прогресс в организме.

Необходимо помнить также, что хроническим инфекциям практически всегда сопутствует иммунодефицит. Само по себе хроническое течение инфекционного заболевания возникает как прямое следствие иммунодефицита, а со временем оно истощает иммунную систему и углубляет иммунодефицит. В свою очередь, это способствует дальнейшей хронизации процесса.

Иммунизацию больных с аутоиммунной патологией лучше не проводить, так как это может вызвать значительное обострение аутоиммунного процесса. Иммунизацию таких больных можно проводить только в случаях крайней необходимости.

Практически любой инфекционный материал содержит остатки питательных сред, используемых для его выращивания, которые могут вызвать аллергические реакции