57. Вирусы.

Вирусы обладают следующими особенностями:

1) Имеют неклеточное строение.

2) В состав вирусов входит только одна нуклеиновая кислота ДНК или РНК.

3) Вирусы - генетические внутриклеточные паразиты.

4) Вирусы не размножаются на искусственных питательных средах.

5) имеют особый способ размножения путем дисъюктивной (разобщенной) репродукции (копирование), а затем происходит сборка вирусных компонентов и формирование новых частиц (можно сравнить с конвейером).

6) Вирусы имеют малую величину, видны только в электронном микроскопе (исключение - вирус оспы).

7) как и другие формы жизни, вирусы обладают наследственностью и изменчивостью.

8) Не чувствительны к антибиотикам.

9) Устойчивы к замораживанию и высушиванию.

Структура вирусов.

У простых вирусов нуклеиновая кислота покрыта одной оболочкой - капсидом, состоящим из белков - капсомеров. Форма укладки капсомеров определяет тип симметрии: спиральный, кубический, смешанный.

Сложные вирусы имеют еще вторую оболочку - суперкапсид, в состав которого входят гликопротеиды, липиды, углеводы, ферменты. Эти вещества вирусы приобретают от клетки хозяина.

Химический состав вирусов.

I. Нуклеиновые кислоты:

ДНК - может быть двунитчатой, однонитчатой, кольцевой, линейной, фрагментированной, может быть "+" , а может быть "-".

РНК также может быть однонитчатой и двунитчатой, "+" или "-". Если РНК "+", то она является информационной и обладает инфекциозностью. РНК "-" не выполняет этой функции, но при помощи специального фермента РНК-полимеразы присходит синтез комплементарной РНК "+", что приводит к репродукции вируса.

Функция нуклеиновых кислот - носители генетической инфор­мации.

II. Белки:

1. Структурные белки: 1) капсидные

2) суперкапсидные

3) геномные

2. Неструктурные белки - образуются в клетке во время репродукции

3. Липиды, углеводы (гликопротеиды) находятся в суперкап­сиде, имеют клеточное происхождение

Принципы классификации вирусов. Основаны на их свойствах:

1. Тип НК (РНК ил ДНК)

2. Количество нитей НК (одна или две)

3. Стратегия генома ("+" или "-" нить)

4. Тип симметрии

5. Наличие или отсутствие суперкапсида.

6. Размеры (от 10нм до 400нм)

7. Морфология (палочковидные, шаровидные, нитевидные, пулевидные, кубоидальные).

8. Антигенные свойства.

9. Характер взаимодействия с клеткой.

10. Круг хозяев - человек, животные, растения, бактерии.

11. Способ передачи (кишечные, респираторные и др.)

В классификацию входят 19 семейств: 7 ДНК и 12 РНК.

Репродукция вирусов.

Состоит из нескольких стадий:

1. Адсорбция - вирус распознает чувствительную клетку при помощи адресных белков и, за счет белков прикрепления адсорбируется на рецепторах клетки.

2. Проникновение - происходит путем рецепторного эндоциттоза.

3. Депротеинизация (раздевание). НК вируса освобождается

4. Эклипс-фаза (скрытая). Вирус в клетке не обнаруживается. Идет синтез белков, подавляющих функцию клетки, и подготовка к репликации вирусных НК.

5. Фаза репродукции при участии ферментов-полимераз.

6. Сборка вирусных частиц, т.к. белки и НК-вирусы образуются в разных местах клетки (дисъюнктивно).

7. Выход из клетки: 1. Путем взрыва - клетка погибает.

2. Путем почкования - клетка остается жизнеспособной.

Методы культивирования вирусов.

1. В курином эмбрионе используют 8-12-дневные эмбрионы, которых заражают в различные полости: аллантоисную, амниотическую, желточный мешок, хорионаллантоисную оболочку. Индикация - по гибели эмбриона, изменению оболочек, РГА. Идентификация по РТГА с противовирусной сывороткой.

2. В культурах клеток (первичные, перевиваемые, полуперевиваемые). Индикация: ЦПД (цитопатическое действие), включение в ядре или цитоплазме, реакция гемадсортции, цветная проба. Идентификация: основана на реакции нейтрализации вируса противовирусной сывороткой (РНЦПД, РН цветной пробы, РТГА).

3. Заражение лабораторных животных, обычно новорожденных.

Методы диагностики вирусных инфекций. Есть 3 основных метода:

1/ Быстрая диагностика: обнаруживание вируса или его антигенов непосредственно в материале от больного.

Используют МИФ, РИА, ИФА.

2/ Вирусологический метод выделение вируса путем заражения культур клеток, или куриного эмбриона, или лабораторного животного. С последующей индикацией и идентификацией.

3/ Серологический метод. Широко распространен. Основан на выявлении нарастания титра антител в парных сыворотках больного, взятых в начале заболевания и через 2-4 недели.

Диагностическое значение имеет четырехкратное и более нарастание титра антител. Используют РСК,РТГА,ИФА,РИА.

58. Вирус гриппа.

К семейству ортомиксовирусов (греч. ortnos - правильный, myxa - слизь) относятся вирусы гриппа типов А, В, С, имеющие тропизм к слизистым оболочкам дыхательных путей.

Морфология и химический состав

Вирионы имеют сферическую форму, диаметром 80-120нм, состоят из сердцевины и липопротеидной оболочки.

Сердцевина содержит РHK минус однонитевую, линейную, фрагментированную (состоит из 8 фрагментов), покрыта белковым капсидом, который окружен суперкапсидом

На поверхности суперкапсида есть шипы – одни из которых являются гемагглютинином (Н), другие нейраминидазой(N).

Культивирование. Для культивирования вируса используют куриные эмбрионы, культуру ткани и лабораторных животных – белых мышей. Заражают интраназально.

Антигенная структура. Вирусы гриппа имеют внутренние и поверхностные антигены.

Внутренние сердцевидные антигены придают типовую специфичность, на основании чего вирусы гриппа делятся на типы А,В,С.

Поверхностные представлены гемагглютинином (Н) и нейраминидазой (N).

Характерной особенностью вирусов гриппа типа А является изменчивость антигенов Н и N.

В зависимости от из сочетания выделяют три подтипа вируса гриппа А человека Н ₁N₁, Н ₂N₂, Н ₃N₂.

Источник инфекции – больной человек. Механизм передачи – воздушно-капельный.

Первичная репродукция вируса происходит в эпителиальных клетках дыхательных путей.

Заболевание начинается с лихорадки, озноба, гиперемии кожи лица, головной боли (из-за токсического действия нейраминидазы) боли в глазных яблоках, воспаление дыхательных путей.

Лабораторная диагностика. Материал - носоглоточный смыв, а в поздние сроки сыворотка больного.

I). Экспресс метод: РИФ - готовят мазки отпечатки, прикасаясь узким стеклом к нижним раковинам носовых ходов. За счет дегенерации клеток они остаются на стекле (пластами). Добавляют типоспецифические люминесцирующие сыворотки. Через 1,5-2 часа при микроскопии в люминесцентном микроскопе выявляют свечение в цитоплазме клеток.

II). Вирусологический метод - культивирование вируса с последующей индикацией и идентификацией вируса. Заражают 10-11-дневные куриные эмбрионы в аллантоисную полость смывом с носоглотки, обработанными антибиотиками.

С целью индикации вируса ставят реакцию гемагглютинации, если она положительна, то с целью идентификации ставят реакцию торможения гемагглютинации со специфическими сыворотками типа А (Н₃ N₂), (Н₂ N₂) и др.

III). Серологический диагноз - Исследуют парные сыворотки больного ( 2 сыворотки) их берут с интервалом в 7-10 дней. Если титр АТ во 2-й сыворотке возрастает в 4 и более раз, то больной перенес грипп.

Специфическая профилактика и лечение.

Для профилактики используют химиопрепараты (ремантадин, аданпромин, дейтифорин), интерферон и вакцины (живые и инактивированные). Есть суъединичные вакцины, которые содержат поверхностные антигены Н и N и обладают минимальной реактогенностью и высокой иммуногенностью (гриппол). Есть рекомбинантные субъединичные вакцины, полученные по принципу генной инженерии путем пересадки вирусных генов в бактерии.