61. Вирус бешенства.

Вирус бешенства относится к семейству Rhabdoviridae (rhabdos - прут).

Род Lyssavirus (lyssa - водобоязнь). Бешенство - rhabies lyssa, hydrophobia.

Рабдовирусы имеют пулевидную форму, размером 170-70нм; рибонуклеопротеид имеет спиральный тип симметрии.

Во внешней оболочке есть липиды - чувствительны к эфиру, снаружи находятся ворсинки. РНК минус, однонитевая, нефрагментированная, не обладает инфекциозностью.

Различают следующие варианты вируса бешенства:

1) типичный, уличный вирус бешенства, который вызывает образование специфических включений в цитоплазме - телец Бабеша-Негри.

2) Вирус африканского собачьего бешенства.

3) Вирус американского бешенства летучих мышей.

4) Вирус дикования оленей, песцов, лис в Арктике.

5) Фиксированный вирус бешенства, который был получен

Л.Пастером после пассажей уличного вируса через мозговую ткань кроликов и утратил: 1) патогенные свойства для собаки и человека, 2) инкубационный период сократился до 5 дней, 3) не давал образования телец Бабеша-Негри.

Фикс-вирус был использован в качестве вакцины.

Бешенство - инфекционное зоонозное заболевание, которое возникает после укуса человека бешенными животными (лисы, шакалы, волки, собаки, кошки, рыси). В настоящее время заражение чаще всего происходит от лис и кошек. Вирус передается при укусах или попадании слюны на поврежденные кожные покровы и слизистую оболочку.

Во входных воротах инфекции вирус остается несколько дней.

Первичная репродукция происходит в клетках мышечной ткани на месте укуса, а затем вирусные частицы достигают окончаний чувствительных периферических нервов и передвигаются по осевым цилиндрам и периневральным пространствам (до 3мм в час), поражая нейроны спинного и головного мозга.

В нейронах идет репродукция вируса, в результате в цитоплазме появляются тельца Бабеша-негри, которые содержат вирусные нуклеокапсиды. Особенно интернсивно поражаются нейроны аммонова рога продолговатого мозга, клетки Пуркинье мозжечка.

Инкубационный период зависит:

1) от вирулентности штамма,

2) от места укуса,

3) его массивности ,

4) от различной скорости продвижения вируса по нервным стволам.

Наиболее опасны укусы в лицо, голову (2-3 недели), может быть 7-10 дней.

Заболевают в этом случае 90% непривитых.

В Витебской области ежегодно регистрируется около 200 случаев бешенства среди животных (80% - это лисы).

Лабораторная диагностика.

1. Анамнестические данные.

2. Вирусоскопический метод (постмортальный). Основан на обнаружении специфических ацидофильных включений Бабеша-Негри в цитоплазме клеток аммонова рога, продолговатого мозга, мозжечка.

Готовят гистологические препараты и окрашивают по методу Манна, Туревичу, Муромцеву.

3. Выявление вирусного антигена в пораженных тканях и в слюнных железах проводится с помощью реакции иммунофлюоресценции.

4. Биологический метод проводят при отрицательных результатах вирусоскопии.

Профилактика.

1. Неспецифическая - уничтожение бродячих собак.

2. Специфическая - вакцинация. Основой для вакцинных препаратов является штамм фикс вируса бешенства, полученного Л.Пастером.

В настоящее время применяется инактивированная культуральная вакцина, полученная в культуре клеток почек сирийского хомячка (на основе фикс-вируса бешенства) из штамма Внуково-32, инактивирована ультрафиолетовыми лучами. Она менее реактогенна.

При множественных укусах вводят и антирабический гамма-глобулин (гетерогенный или гомологичный).

Вирус гепатита А, эпидемический гепатит, болезнь Боткина, энтеровирус 72 типа.

Морфология и химический состав аналогичны с другими энте­ровирусами. Но есть особенности:

1. Отмечается большая устойчивость к физико-химическим факторам. При 60гр. не утрачивает инфекционную активность в течение 12 часов, при 20гр. сохраняется годами, при 100гр. - разрушается в течение 5 минут. Чувствителен к формалину, УФ-лучам.

2. Имеют более длительный цикл репродукции.

3. Отмечается строгий тропизм к паренхиматозным клеткам печени.

4. Репродукция в культуре клеток не сопровождается ЦПД. Патогенез.

Источник инфекции - больной человек. Путь передачи - фе­кально-оральный. Вирус с пищей, водой попадает в желудочно-ки­шечный тракт, где репродуцируется в эпителиальных клетках сли­зистой оболочки тонкой кишки и

регионарных лимфатическмх уз­лах. Далее возбудитель проникает в кровь, в которой он обнару­живается в конце инкубационого периода и в первые дни заболе­вания.

Основная мишень действия вируса гепатита А - клетки пече­ни, в их цитоплазме идет репродукция. Гепатоциты могут пора­жаться натуральными или естественными киллерами, которые в ак­тивированном состоянии взаимодействуют с гепатоцитами, вызывая их разрушение. Активация ЕКК происходит в результате их взаи­модействия с интерфероном,индуцированным вирусом. Поражение гепатоцитов сопровождается:

1/ желтухой,

2/ повышением ферментов /трансминаз в сыворотке крови/. Далее возбудитель с желчью попадает в просвет кишечника и

выделяется с фекалиями, в которых отмечается высокая концент­рация вируса в конце инкубационного периода в первые дни бо­лезни /до желтухи/.

Иммунитет после заболевания формируется пожизненный.

Ig М исчезает из сыворотки через 3-4 месяца после начала заболевания, а Ig д сохраняется годами.

Синтезируется секреторные Iд А. 80% населения к 40 годам имеют АТ часто болеют дети.

Лабораторная диагностика.

1. Вирусные частицы в фекалиях выявляют методом иммуноэ­лектронной микроскопии, ИФА,РИА.

2. Серологический диагноз - определение Ig М в течение первых 3-6 недель в парных сыворотках больного путем постанов­ки ИФА.

Профилактика - в стадии разработки генно-инженерная вак­цина.

Для лечения - гаммаглобулин.

ВИРУС ГЕПАТИТА В.

частицы Дейна, открыты 1970 г. Дейном.

Относится к семейству гепадновирусов (hepar+DNA). Семейс­тво включает также вирусы гепатитов земляных белок, уток, лес­ных цыплят и др.

К настоящему времени в мире насчитывается более 300 млн носителей ВГВ (большинство в Азии). В Белоруссии носителей 1,5%. Кроме того, вирус является вторым по важности (после компонентов табака) известным канцерогеном человека. Абсолютно достоверно известно, что вирус может вызывать специфический рак у человека. Для хронических носителей вируса риск развития первичной гепатомы повышается в 100 раз.

Структура вируса

1. Имеет сферическую форму.

2. Диаметр частиц 40-45 нм.

3. Имеет кубический тип симметрии, состоят из 180 капсо­меров.

4. Имеет липиды: чувствительные к эфиру.

5. Геном представляет собой двухцепочечную кольцевую мо­лекулу ДНК, необычную тем, что (+) цепь короче. В состав вируса входит ДНК-полимераза.

Репликация вируса происходит уникальным способом. ДНК-по­лимераза достраивает короткую цепь ДНК. Эта ДНК проникает в ядро клетки, где с нее синтезируется РНК-копия, получившая название прегенома. Он упаковывается в новый капсид. После этого РНК-зависимая ДНК-полимераза начинает строить ДНК-копию прегенома. Прегеном одновременно разрушается. Полимераза дост­раивает комплементарную цепь ДНК. В недостроенном виде 2-х-це­почечная ДНК может находиться достаточно долго, что обуславли­вает инкубационный период болезни длительностью до полугода. После ее достраивания цикл репликации повторяется.

Антигенное строение.

Содержит несколько антигенов: Hbs-АГ - поверхностный, гликопртеиновой природы "австралильский антиген"; Нве-АГ зани­мает промежуточной положение, отщепляется от НВсоr при прохож­дении его через гепатоцит, поэтому обнаруживают в крови; Нвсоr- сердцевинный нуклеопротеин,содержится в ядрах гепатоци­тов, но не поступает в кровь; НВx- имеет отношение к раковой трансформации гепатоцитов; антигенами являются и преS-белки.

Наиболее иммуногенным является Hbs-АГ, имеющий 5 АГ де­терминант.

В организме появляются АТ к Hbs-АГ, НВcАГ и НВeАГ Культивирование

Вирус не разм. в культуре ткани и в организме животных, в куриных эмбрионах. Единственным животным восприимчивым к виру­су-шимпанзе.

Резистентность Обдадает высокой устойчивостью к темпера­туре, выдерживает кипечение в 15-20 минут, 600С-несколько ча­сов, а при 200С - несколько месяцев.

Вирус не инактивируется при УФ-облучении плазмы, хранении при 200С , повторном замораживании и оттаивании.

Механизм заражения, пути передачи.

Распространяется главным образом через кровь и ее продук­ты. Кроме того, передача возможна половым путем. Сперма и слю­на инфекциозны, инфекциозность других биологических жидкостей не установлена. Парентерально инфекция передается при исполь­зовании нестерильных инструментов и т.д. Повышенная частота ВГВ наблюдается у наркоманов и

гомосексуалистов, а также мед­работников. Большое значение имеет вертикальная передача от матери к плоду - 1/5 часть заболевших инфицируется перинаталь­но.

Входные ворота-кровеносные сосуды. Вирусы проникают в кровь парентерально, с кровью переносятся в печень и размножа­ются в гепатоцитах. Инкубационный период 3-6 месяцев.

В зависимости от типа: I) взаимодействия вирусов с клет­ками печени а) пролиферативный, б) интегративный процесс.

II) силы иммуного процесса

III) дозы вируса

Различают клинические формы заболевания: 1) тяжелый гепа­тит с высокой летальностью, 2) длительное вируносительство, 3) первичный рак печени.

ПАТОГЕНЕЗ

В патогенезе болезни помимо действия самого вируса боль- /шое значение имеет аутоиммунный цитолиз гепатоцитов. На их

мембране экспрессируется Нвс-АГ и гепатоцит подвергается атаке

Т-киллеров с последующим разрушением и некрозом печени.

ИММУНИТЕТ

Инфекционный процесс сопровождается развитием иммунитета, выроботкой АТ к Hbs-АГ, НВcАГ и НВeАГ при нормальном его раз­витии. Хронические формы гепатита В.

Диагностика.

Основана на анамнезе, клинической картине заболевания (лихорадка, желтуха, увеличение печени), а также генетических и серологических способах исследования, поскольку вирус не культивируется в лабораторных условиях и его можно накопить только генноинженерными методами.

Широкое распространение получил также серологический ме­тод диагностики ВГВ. В настоящее время на смену РПГА для опре­деления Нвs-АГ в сыворотке крови приходят ИФА и РИА. Диагнос­тическое значение имеет также выявление Нве-АГ, анти-Нвs- и анти-cor-АТ, особенно класса IgM.

Специфическая профилактика.

Первоначально была предложена вакцина из очищенного Нвs-АГ, полученного из сыворотки вирусоносителей. Несмотря на ощутимый клинический эффект, вакцина неудобна своим способом получения. Отсюда новая генноинженерная вакцина является, по­жалуй, пока единственным примером широкого применения рекомби­нантных вакцин в практике. Ее получают, клонируя S-ген в клет­ках дрожжей с последующим выделением его продукта - нативного Hbs-АГ.

Для лечения в последнее время широко используется лейко­цитарный альфа-интерферон.

У некоторых больных ВГВ может протекать очень остро с последующим формированием хронического агрессивного гепатита. Оказалось, что подобное течение вызывается за счет суперинфек­ции ВГВ новым вирусом, получившим название дельта- или Д-ви­рус. Такой гепатит называется гепатитом Д. ВГД представляет собой дефектный РНКовый вирус, репликация которого невозможна без ВГВ.

К настоящему времени известно еще 2 вирусных гепатита. Вирусный гепатит Е напоминает вирусный гепатит А, имея фекаль­но-оральный механизм передачи, но протекает гораздо тяжелее, особенно при беременности. Возбудителя относят к семейству ка­лицивирусов.

Возбудитель же гепатита С, обуславливающий до 60-70% всех посттрансфузионных гепатитов, до сих пор не идентифицирован.

62. ВИЧ.

Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) вызывает инфекционное заболевание, связанное с первичным поражением системы иммунитета и развитием ярко выраженного вторичного иммунодефицита, на фоне которого активируется условно-патогенная и непатогенная микрофлора. Заболевание имеет фазовое течение. Период выраженных клинических проявлений был назван синдромом приобретенного иммунодефицита (СПИД), хотя в настоящее время по рекомендации ВОЗ принят термин "ВИЧ-инфекция".

Вирус ВИЧ (типа I и II) относится к семейству Retroviridae.

Вирус имеет палочковидную или овальную (реже круглую) форму, диаметр его 100-140 нм, содержит внешнюю липидную оболочку.

Геном ВИЧ представлен двумя идентичными однонитчатыми РНК и содержит 3 структурных гена: gag, env, pol. Первый кодирует групповые гликопротеидные АГ оболочки (gp41 и gp120), 2-й - белки оболочки (p18 и p24), 3-й - РНК-зависимую ДНК-полимеразу (ревертазу) - фермент, осуществляющий обратную транскрипцию - синтез ДНК по матрице РНК вируса. Эта ДНК встраивается в клеточный геном и называется провирусом.

Источником инфекции служит вирусоноситель. Он выделяет вирус со всеми биологическим жидкостями. В достаточной для заражения концентрации вирус содержится в сыворотке крови, сперме. Механизм передачи требует обязательного попадания вируса в кровь. Пути передачи: половой, особенно при гомосексуальном контакте, парентеральный через инфицированные препараты крови, загрязненные медицинские инструменты, а также - трансплацентарный. В соответствии с путями передачи различают группы риска: гомо- и бисексуалы, наркоманы, больные гемофилией, дети больных родителей, больные, которым часто переливают кровь, а также медработники.

Вирус неустойчив в окружающей среде. Он погибает при температуре 56⁰С в течение 30 мин, чувствителен ко всем дезинфектантам, однако достаточно устойчив к высушиванию.

Патогенез заболевания.

Одним из основных механизмов ВИЧ-инфекции является специфическое взаимодействие гликопротеина gp120 оболочки ВИЧ с белком-рецептором CD4, который имеется на поверхности Т-лимфоцитов хелперов, а также макрофагов, моноцитов, астроцитов.

Кроме хелперного звена поражаются и другие звенья иммунитета, продукция иммуноглобулинов В-клетками, возникает дефицит некоторых компонентов комплемента и т.д.

Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции.

В лабораторной практике обычно исследуют сыворотку больного для обнаружения АТ к антигенам вируса ВИЧ. Это исследование обычно проводят в 2 этапа: на первом из них определяют АТ к вирусным белкам p24, gp120 и gp41 при помощи иммуноферментного анализа (ИФА). На втором этапе положительные сыворотки исследуют методом иммуноблотинга, в котором выявляют антитела против индивидуальных антигенов вируса. При выявлении антител минимум к трем антигенам gp120, gp41, p24 человека считают ВИЧ-инфицированным.

Профилактика.

1. Выявление ВИЧ-инфицированных лиц среди угрожаемых контингентов (лица, контактные с инфицированными, проститутки, наркоманы, подозрительные больные).

2. Предупреждение инфицирования медицинского инструментария, лекарств, препаратов крови.

3. Пропаганда знаний по предупреждению заражения ВИЧ при половых контактах (исключение случайных связей, применение средств индивидуальной защиты).

4. Предупреждение заражения медработников при контакте с больными и их биологическими жидкостями (кровь, секреты, экссудаты, моча и т.д.).

Сейчас предпринимаются попытки создать вакцины на основе белка gp120 и антиидиотипические вакцины на основе АТ против CD4, однако по-прежнему главными остаются неспецифические профилактические меры.